スフィンゴ脂質代謝酵素の解析
キーワード：スフィンゴ脂質　酵素　セラミド
2003.04.

海洋生物資源の高度利用に関する研究
キーワード：高度不飽和脂肪酸、脂質結合タンパク質
2003.04.

ラビリンチュラ類を用いた機能性脂質の生産基盤の構築と活用
2014.08～2017.03, 代表者：伊東　信, 九州大学, 平成26年度農林水産業・食品産業科学技術研究推進事業委託事業.

主要著書

1.	沖野　望、伊東　信, 原核生物のスフィンゴ脂質分解酵素とその利用 セラミド研究の新展開〜基礎から応用へ〜, セラミド研究会編 食品化学新聞社, pp 179-185, 2019.05.
2.	沖野　望, 生物機能の新展開, 日本食品出版, pp93-102, 2000.06.

主要原著論文

1.	Nyunoya, Hayato; Ishibashi, Yohei; Ito, Makoto; Okino, Nozomu, Significance of mitochondrial fatty acid β-oxidation for the survivability of Aurantiochytrium limacinum ATCC MYA-1381 during sugar starvation., Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry, 10.1093/bbb/zbac141, 86, 11, 1524-1535, 2022.10.
2.	Ikumi Endo, Takashi Watanabe, Tomofumi Miyamoto, Hatsumi Monjusho-Goda, Junichiro Ohara, Masahiro Hayashi, Yoichiro Hama, Yohei Ishibashi, Nozomu Okino, Makoto Ito, C4-monomethylsterol β-glucoside and its synthase in Aurantiochytrium limacinum mh0186, Glycobiology, 2021 Jul 5;cwab070. doi: 10.1093/glycob/cwab070., 2021.11.
3.	Nyunoya, Hayato; Noda, Tatsuki; Kawamoto, You; Hayashi, Yasuhiro; Ishibashi, Yohei; Ito, Makoto; Okino, Nozomu, Lack of increment 5 Desaturase Activity Impairs EPA and DHA Synthesis in Fish Cells from Red Sea Bream and Japanese Flounder, MARINE BIOTECHNOLOGY, 10.1007/s10126-021-10040-9, 23, 3, 472-481, 2021.06.
4.	Nozomu Okino, Mengbai Li, Qingjun Qu, Tomoko Nakagawa, Yasuhiro Hayashi, Mitsufumi Matsumoto, Yohei Ishibashi, Makoto Ito, Two bacterial glycosphingolipid synthases responsible for the synthesis of glucuronosylceramide and alpha-galactosylceramide, Journal of Biological Chemistry, 10.1074/jbc.RA120.013796, 295, 31, 10709-10725, 2020.07, [URL], Bacterial glycosphingolipids such as glucuronosylceramide and galactosylceramide have been identified as ligands for invariant natural killer T cells and play important roles in host defense. However, the glycosphingolipid synthases required for production of these ceramides have not been well-characterized. Here, we report the identification and characterization of glucuronosylceramide synthase (ceramide UDP-glucuronosyltransferase [Cer-GlcAT]) in Zymomonas mobilis, a Gram-negative bacterium whose cellular membranes contain glucuronosylceramide. On comparing the gene sequences that encode the diacylglycerol GlcAT in bacteria and plants, we found a homologous gene that is widely distributed in the order Sphingomonadales in the Z. mobilis genome. We first cloned the gene and expressed it in Escherichia coli, followed by protein purification using nickel-Sepharose affinity and gel filtration chromatography. Using the highly enriched enzyme, we observed that it has high glycosyltransferase activity with UDP-glucuronic acid and ceramide as sugar donor and acceptor substrate, respectively. Cer-GlcAT deletion resulted in a loss of glucuronosylceramide and increased the levels of ceramide phosphoglycerol, which was expressed in WT cells only at very low levels. Furthermore, we found sequences homologous to Cer-GlcAT in Sphingobium yanoikuyae and Bacteroides fragilis, which have been reported to produce glucuronosylceramide and α-galactosylceramide, respectively. We expressed the two homologs of the cer-glcat gene in E. coli and found that each gene encodes Cer-GlcAT and Cer-galactosyltransferase, respectively. These results contribute to the understanding of the roles of bacterial glycosphingolipids in host-bacteria interactions and the function of bacterial glycosphingolipids in bacterial physiology..
5.	Nozomu Okino, Hiroyoshi Wakisaka, Yohei Ishibashi, Makoto Ito, Visualization of Endoplasmic Reticulum and Mitochondria in Aurantiochytrium limacinum by the Expression of EGFP with Cell Organelle-Specific Targeting/Retaining Signals, Marine Biotechnology, 10.1007/s10126-018-9795-7, 1-11, 2018.01, [URL].
6.	Nozomu Okino, Makoto Ito, Molecular mechanism for sphingosine-induced Pseudomonas ceramidase expression through the transcriptional regulator SphR, Scientific Reports, 6, 38797, 2016.12.
7.	Inoue T, Okino N, Kakuta Y, Hijikata A, Okano H, Goda HM, Tani M, Sueyoshi N, Kambayashi K, Matsumura H, Kai Y, Ito M., Mechanistic insights into the hydrolysis and synthesis of ceramide by neutral ceramidase., J Biol Chem, 284(14):9566-9577, 2009.04.
8.	N. Okino and M. Ito, Ceramidase Enhances Phospholipase C-induced Hemolysis by Pseudomonas aeruginosa, J. Biol. Chem. , 282, 6021-6030, 2007.03.
9.	H. Monjusho, N. Okino, M. Tani, M. Maeda, M. Yoshida, and M. Ito, A Neutral Ceramidase Homologue of Dictyostelium discoideum Exhibits an Acidic pH Optimum, Biochem. J., 10.1042/BJ20030652, 376, 473-479, 376, pp473-479, 2003.12.
10.	X. He, N. Okino, R. Dhami, A. Dagan, S. Gatt, H. Schulze, K. Sandhoff, and E. H. Schuchman, Purification and Characterization of Recombinant, Human Acid Ceramidase, J. Biol. Chem., 278, pp32978-32986, 2003.08.
11.	N. Okino, X. He, S. Gatt, K. Sandhoff, M. Ito, and E. H. Schuchman, The Reverse Activity of Human Acid Ceramidase, J. Biol. Chem., 10.1074/jbc.M303310200, 278, 32, 29948-29953, 278, pp29948-29953, 2003.08.

主要総説, 論評, 解説, 書評, 報告書等

1.	Ito M, Ishibashi Y, Watanabe T, Iwaki J, Kurita T, Okino N., Assays and Utilization of Enzymes Involved in Glycolipid Metabolism in Bacteria and Fungi, Methods Mol Biol. 2023;2613:229-256, 10.1007/978-1-0716-2910-9_18, 2023.01.
2.	Ito M, Chisada S, Matsunaga N, Okino N. , Vibrio-binding gangliosides in fish intestinal tracts , Glycoconj J. 2023 Jun;40(3):315-322. , 10.1007/s10719-023-10110-1, 2023.06.
3.	沖野 望,石橋洋平,伊東 信, ラビリンチュラ類のDHAとDHA含有脂質の合成機構の解明, 九州大学アイソトープ統合安全管理センターニュース　4，　8-11, 2020.03.
4.	沖野　望、伊東　信 , スフィンゴシンに特異的な転写制御因子を介した緑膿菌セラミダーゼの発現誘導機構とその生理的意義 , 生化学 90(2):178-182 (2018) , doi:10.14952/SEIKAGAKU.2018.900178, 2018.04.
5.	Makoto Ito, Nozomu Okino, Motohiro Tani, New insight into the structure, reaction mechanism, and biological functions of neutral ceramidase, Biochimica et Biophysica Acta, 1841, 682–691, 2014.05.
6.	沖野　望、伊東　信, 細菌セラミダーゼの生理機能と高次構造の解明, 生化学 81(10)：911-916, 2009 , 2009.10.
7.	沖野　望、谷　元洋、光武　進、吉村征浩、合田（問註所）初美、伊東　信, 構造から読み解く中性セラミダーゼの触媒機構、存在様式及び生理機能, 細胞, 2009.05.
8.	沖野　望, 緑膿菌はなぜセラミダーゼを分泌するのか, バイオサイエンスとインダストリー, 64(7) 27-28 (2006), 2006.07.

主要学会発表等

1.	沖野　望, 細菌スフィンゴ糖脂質の合成マシ―ナリーの解明, 第15回セラミド研究会　第16回スフィンゴテラピィ研究会　合同年会, 2022.10.
2.	沖野　望, 海洋細菌由来スフィンゴ糖脂質合成酵素の探索とその反応メカニズムの解析, 日本農芸化学会 2022 年度西日本支部大会, 2022.09.
3.	沖野　望, 糖転移酵素から明らかにする細菌スフィンゴ脂質の機能性, 第94回日本生化学会大会, 2021.11.
4.	沖野 望, 宿主免疫を活性化する細菌由来の糖脂質を合成する糖転移酵素, 第62回日本脂質生化学会, 2020.05.
5.	沖野 望, 細菌由来グルクロン酸含有糖脂質合成酵素の機能解析, 日本農芸化学会2020年度大会, 2020.03.
6.	Nozomu Okino, Makoto Ito, Identification and functional analysis of the bacterial glucuronosylceramide synthase, 11th Asian Community of Glycoscience and Glycotechnology Conference, 2019.11.
7.	Hayato Nyunoya, Nozomu Okino, Yohei Ishibashi, Makoto Ito, Evaluation of delta5 desaturase activity in marine fish cells, Marine Biotechnology Conference 2019, 2019.09.
8.	丹生谷 颯人、石橋 洋平、沖野　望、伊東　信, ラビリンチュラ類の新規脂質代謝関連遺伝子の探索, 第43回　蛋白質と酵素の構造と機能に関する九州シンポジウム, 2019.09.
9.	Nozomu Okino, Hiroyoshi Wakisaka, Yohei Ishibashi, Makoto Ito, Visualization of endoplasmic reticulum and mitochondria in Aurantiochytrium limacinum ATCC MYA-1381, First International Conference on Labyrinthulean Protists (ICoLP), 2019.08.
10.	沖野　望、李　夢白、石橋　洋平、伊東　信, Zymomonas mobilisはグルクロノシルセラミドが欠損するとセラミドホスホグリセロールを合成する, 第61回日本脂質生化学会, 2019.07.
11.	Nozomu Okino, Mengbai Li, Yohei Ishibashi, Makoto Ito, Identification and functional characterization of ceramide UDP-glucronosyltransferase in Zymomonas mobilis, 60th International Converence on the Bioscience of Lipids, 2019.06.
12.	丹生谷　颯人、野田　樹、河本　洋、石橋　洋平、沖野　望、伊東　信, マダイΔ６デサチュラーゼのクローニングとn-3PUFA生合成能の解析, 2019年度　日本生化学会九州支部例会, 2019.06.
13.	沖野 望、花田 理沙、重常 公彦、堤 圭一郎、石橋 洋平、有田 誠、伊東 信, ラビリンチュラ類を用いた外来遺伝子の導入によるn-3系高度不飽和脂肪酸代謝物の生産, 日本農芸化学会2019年度大会, 2019.03.
14.	沖野　望、伊東 信, 緑膿菌由来グルクロノシルジアシルグリセロール合成酵素の機能解析 , 日本農芸化学会2018年度西日本支部大会（西日本支部第324回講演会）, 2018.09.
15.	Nozomu Okino, Makoto Ito, Identification and functional analysis of diacylglycerol glucuronosyltransferase in Pseudomonas aeruginosa, 2nd Japan-Korea Lipid Joint Symposium, 2018.09.
16.	李　夢白、沖野　望、石橋　洋平、伊東 信, 細菌由来グルクロノシルセラミド合成酵素の同定と機能解析, 第37回日本糖質学会, 2018.08.
17.	沖野　望、伊東　信, 緑膿菌はリン欠乏時にグルクロノシルジアシルグリセロールを合成する：リン欠乏時における緑膿菌の生体膜恒常性維持機構, 第60回脂質生化学会, 2018.06.
18.	沖野 望, 細菌セラミダーゼからスフィンゴ脂質生物学を斬り開く, 2017年度　生命科学系学会合同年次大会（ConBio 2017）, 2017.12.
19.	李 夢白、沖野 望、石橋 洋平、伊東 信, Zymomonas mobilisのセラミドUDP‐グルクロン酸転移酵素の同定, 2017年度　生命科学系学会合同年次大会（ConBio 2017）, 2017.12.
20.	Nozomu Okino, Makoto Ito, Transcriptional regulation of Pseudomonas ceramidase through the sphingosine-specific transcriptional regulator SphR , 58th International Conference on the Bioscience of Lipids, 2017.09.
21.	沖野 望、伊東　信, 緑膿菌のグルクロノシルジアシルグリセロール合成酵素の生理的意義 , 第36回　日本糖質学会年会, 2017.07.
22.	花田 理沙，沖野　望，重常 公彦，石橋 洋平，有田　誠，伊東　信, A. limacinumを用いたn-3系PUFA代謝物の解析, 第4回　ラビリンチュラ・シンポジウム, 2017.07.
23.	沖野 望、伊東　信, ラビリンチュラ類におけるn-3 PUFA代謝物の解析, 第4回　ラビリンチュラ・シンポジウム, 2017.07.
24.	沖野 望、伊東　信, スフィンゴシンに特異的な転写制御因子による緑膿菌セラミダーゼの遺伝子発現機構 , 第59回　日本脂質生化学会, 2017.06.
25.	沖野 望, 緑膿菌に見出した糖脂質合成酵素の生理機能とそのホモログの分布, 平成29年度　比較グライコーム研究会, 2017.06.
26.	花田 理沙，沖野 望，重常 公彦，石橋 洋平，有田 誠，伊東 信, ラビリンチュラ類を用いたn-3 PUFA 代謝物の生産, 第19回マリンバイオテクノロジー学会, 2017.06.
27.	沖野 望, 伊東 信, 緑膿菌中性セラミダーゼの発現調節機構とその生理学的意義, 第９回セラミド研究会, 2016.10.
28.	沖野 望, 伊東 信, 緑膿菌ゲノムにおいてスフィンゴ脂質分解酵素遺伝子の近傍に位置する糖脂質合成酵素遺伝子, 第35回　日本糖質学会年会, 2016.09.
29.	脇坂拓芳, 沖野 望, 石橋 洋平, 伊東 信, Aurantiochytrium limacinum の細胞内小器官の局在, 第3回ラビリンチュラ・シンポジウム, 2016.07.
30.	重常公彦, 沖野 望, 石橋 洋平, 有田　誠, 伊東 信, ラビリンチュラ類のn-3 PUFA代謝物の解析と外来遺伝子の導入によるn-3 PUFA代謝物の生産, 第18回マリンバイオテクノロジー学会, 2016.05.
31.	沖野 望, Yoshimitsu Kakuta, 鵜木(加藤)陽子, 大坪　怜央, 石橋 洋平, 小林　宇太郎, makoto kimura, 伊東 信, Crystal structures of unique glycosphingolipid-degrading enzymes, The 7thACGG conference, 2015.11.
32.	沖野 望, 伊東 信, Marine biotechnology: New understanding and developments, PKNU – KU Joint Symposium SMART Oceans and Fisheries, 2015.10.
33.	沖野 望, 伊東 信, Identification of a transcriptional regulator SphR for ceramidase expression in Pseudomonas aeruginosa, 第10回スフィンゴテラピィ研究会, 2015.06.
34.	沖野 望, 伊東 信, 緑膿菌セラミダーゼの発現制御に関わる新規転写因子SplRの解析, 日本農芸化学会2014年度大会, 2014.03.
35.	沖野 望, 角田 佳充, 鵜木(加藤)陽子, 藤川由香莉, 大坪怜央, 坂口圭史, 合田 初美, 石橋洋平, 小林宇太郎, 田村具博, 木村 誠, 伊東 信, 糖脂質分解酵素とその活性化タンパク質のX線結晶構造解析, 第31回 日本糖質学会年会, 2012.09.
36.	沖野　望, スフィンゴ脂質分解酵素の反応マシーナリの解明, 第49回化学関連支部合同九州大会, 2012.06.
37.	沖野　望, 細菌由来新規スフィンゴ脂質分解酵素の構造と機能解析, 第35回　蛋白質と酵素の構造と機能に関する九州シンポジウム, 2011.09.
38.	沖野　望、伊東　信, 緑膿菌セラミダーゼの遺伝子発現機構の解明, 第84回日本生化学会大会, 2011.09.
39.	NOZOMU OKINO, X-Ray Structure of Sphingolipid Ceramide N-Deacylase, The 31st Naito Conference　糖鎖の発現と制御[II], 2011.09.
40.	沖野 望、伊東 信, 緑膿菌セラミダーゼの遺伝子発現機構の解析, 第53 回 日本脂質生化学会, 2011.05.
41.	沖野　望，伊東　信, 緑膿菌セラミダーゼの発現を制御する新規転写因子SplR, BMB2010, 2010.12.
42.	N. Okino, Y. Kakuta, Y. Kato-Unoki, N. Sueyoshi, M. Ito, The Crystal Structure of Sphingolipid Ceramide N-Deacylase that Catalyzes the Cleavage and Creation of an N-Acyl Linkage of Various Glycosphingolipids, 25th International Carbohydrate Symposium; ICS2010, 2010.08.
43.	Nozomu Okino and Makoto Ito, Identification of a transcriptional regulator for ceramidase expression in Pseudomonas aeruginosa, 第27回　内藤コンファレンス　生体膜ダイナミクスと脂質生物学　[I], 2010.06.
44.	沖野 望, スフィンゴ脂質分解酵素の高度利用を目指した機能改変, 第11回 酵素応用シンポジウム, 2010.06.
45.	沖野　望, 角田佳充, 鵜木（加藤） 陽子, 末吉紀行, 伊東　信, スフィンゴ脂質セラミドN-デアシラーゼ（SCDase）のX 線結晶構造解析, 第82回　日本生化学会大会, 2009.10.
46.	沖野　望、角田佳充、土方敦司、合田初美、谷　元洋、末吉紀行、井上　豪、伊東　信, 中性セラミダーゼの高次構造解析, 第５１回 日本脂質生化学会, 2009.07.
47.	沖野　望, 細菌由来新規スフィンゴ脂質分解酵素の構造と機能及びその応用, 平成21年度日本農芸化学会　西日本支部大会, 2009.05.
48.	沖野　望、伊東　信, スフィンゴ脂質から脂肪酸を遊離する酵素の構造とその応用, 日本農芸化学会2009年度大会, 2009.03.
49.	沖野　望、伊東　信, 緑膿菌セラミダーゼの構造と生理機能, 第43回　緑膿菌感染症研究会, 2009.02.
50.	沖野　望, 生体膜を構成する糖脂質の構造と機能～スフィンクスの謎に迫る～, 香川大学機能糖鎖プロジェクトシンポジウム, 2008.12.
51.	沖野　望、井上　豪、角田佳充、土方敦司、岡野浩幸、上林浩二、合田（問註所）初美、谷　元洋、末吉紀行、松村浩由、甲斐　泰、伊東　信, 緑膿菌由来の中性セラミダーゼのX線結晶構造解析と反応機構の解明, BMB2008, 2008.12.
52.	沖野　望、井上　豪、岡野浩幸、上林浩二、合田(問註所)初美、谷　元洋、末吉紀行、角田佳充、伊東　信, 緑膿菌セラミダーゼの結晶化と高次構造の解析, 日本農芸化学会　西日本支部大会, 2008.09.
53.	沖野　望, 細菌セラミダーゼの構造と機能に関する研究, 平成２０年度日本生化学会九州支部例会, 2008.05.
54.	沖野　望、池田理恵、伊東　信, 結核菌セラミダーゼの大量発現系構築と諸性質の検討, 日本農芸化学会2008年度大会, 2008.03.
55.	沖野　望, 井上　豪, 岡野浩幸, 上林浩二, 合田(問註所)初美, 谷　元洋, 末吉紀行, 角田佳充, 伊東　信, 緑膿菌セラミダーゼの構造と機能の解析, 第80回日本生化学会大会、第30回日本分子生物学会年会, 2007.12.
56.	Nozomu Okino and Makoto Ito, Functional analysis of Pseudomonas ceramidase, 48th International Conference on the Bioscience of Lipids , 2007.09.
57.	沖野　望、伊東　信, 緑膿菌セラミダーゼの生細胞に対する作用機構の解析, 第49回　脂質生化学会, 2007.06.
58.	Nozomu Okino, Makoto Ito, Transcriptional regulation of Pseudomonas ceramidase by lipids , 20th IUBMB International Congress of Biochemistry and Molecular Biology and 11th FAOBMB Congress, 2006.06.

1.	Nozomu Okino, Makoto Ito, 日本糖鎖科学統合データベース JCGGDB GlycoPOD (GlycoScience Protocol Online Database) , 2012.03 Hydrolysis of ceramide by ceramidase (CDase) and measurement of CDase activity Hydrolysis of glycosphingolipids by a sphingolipid ceramide N-deacylase (SCDase), [URL].
2.	Nozomu Okino, Makoto Ito, 日本糖鎖科学統合データベース JCGGDB GlycoPOD (GlycoScience Protocol Online Database) , 2010.06 Extraction of glycolipids Thin-layer chromatography (TLC) Quantitative determination of ceramide Quantitative determination of sphingomyelin , [URL].

特許出願・取得

所属学会名

学協会役員等への就任

学会大会・会議・シンポジウム等における役割

学会誌・雑誌・著書の編集への参加状況

学術論文等の審査

海外渡航状況, 海外での教育研究歴