Faculty Profiles - YAMAUCHI NOBUHIKO

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YAMAUCHI NOBUHIKO

Organization

Faculty of Agriculture Department of Bioresource Sciences Associate Professor
School of Agriculture Department of Bioresource and Bioenvironment（Concurrent）
Graduate School of Bioresource and Bioenvironmental Sciences Department of Bioresource Sciences（Concurrent）

Contact information

Tel

0928024590

Profile

Research: I have been studied about animal reproductive physiology covered from oocyte maturation, fertilization, early development through implantation and placental development. Physiological characters of domestic animal oocytes in in vitro culture were investigated by using molecular and biochemical techniques. At present, functions of genes expressed during oocyte maturation and early development are being analyzed using RNA interference method. Furthermore, to clarify the complex implantation and placental development process, an in vitro model for analyzing the functions are being developed from endometrial and placental derived cells using 3-D tissue engineering techniques. Education: Besides teaching in classes (Laboratory Exercise in Animal Reproduction and Basic Zoology), I am giving instructions for faculty and graduate students in the laboratory meeting and seminar. Also based on the above theme for the research, basic experimental protocols are taught practically for student遮s own thesis with a lot of discussions.

Homepage

http://www.agr.kyushu-u.ac.jp/asweb/chiku1/yamauchi/top.html

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Research Areas

Life Science / Animal production science

Degree

Ph. D. (Agriculture)

Research History

に至る

2003 - Present

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１９９５年４月東北農業試験場非常勤職員（重点基礎研究）１９９６年４月東北農業試験場において、新技術事業団の科学技術特別研究員１９９９年１月　農業生物資源研究所（旧農林水産省畜産試験場）において、生物系特定産業技術研究推進機構の派遣研究員

１９９５年４月東北農業試験場非常勤職員（重点基礎研究）１９９６年４月東北農業試験場において、新技術事業団の科学技術特別研究員１９９９年１月　農業生物資源研究所（旧農林水産省畜産試験場）において、生物系特定産業技術研究推進機構の派遣研究員

Education

Tohoku University 農学研究科畜産学

- 1995

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Country：Japan

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Tohoku University Faculty of Agriculture 畜産学科

- 1989

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Country：Japan

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Research Interests・Research Keywords

Research theme：胎盤形成

Keyword：胎盤形成

Research period： 2024
Research theme：着床

Keyword：着床

Research period： 2024
Research theme：卵子成熟

Keyword：卵子成熟

Research period： 2024
Research theme：体外受精

Keyword：体外受精

Research period： 2024
Research theme：三次元培養

Keyword：三次元培養

Research period： 2024
Research theme：スフェロイド

Keyword：スフェロイド

Research period： 2024
Research theme： Analysis of the function of implantation specific genes using RNAi

Keyword： RNAi, implantation, endometrium, gene, implantation window

Research period： 2008.4
Research theme： Development of in vitro implantation model using the endometrial spheroid

Keyword： rat, spheroid, embryo, implantation, endometrium

Research period： 2006.4
Research theme： Expression of rat uterine serine proteinases homologous to mouse implantation serine proteinase 2

Keyword： serine protease; implantation; rat; uterus; pregnancy

Research period： 2005.4 - 2007.3
Research theme： Development of endometrial spheroid using tissue engineering technique

Keyword： endometrium, tissue engineering, spheroid, stromal cells, rat

Research period： 2004.4 - 2006.3
Research theme： Analysis of the gene function in oocytes and early embryos of domestic animal using RNAi

Keyword： RNAi, oocyte maturation, in vitro fertilization, early development

Research period： 2003.4 - 2005.3
Research theme： Isolation and characterization of stromal cells derived from bovine placenta

Keyword： placenta, cell culture, stem cell, implantation, stromal cells

Research period： 2002.4 - 2003.12
Research theme： A three-dimensional cell culture model for bovine endometrium: regeneration of a multicellular spheroid using ascorbate

Keyword： spheroid, a three-dimensional cell culture, endometrium, MMP

Research period： 1999.1 - 2003.3
Research theme： Effect of cumulus cells on maturation, fertilization and subsequent development of porcine oocytes in vitro

Keyword： H1K, MAPK, GSH, in vitro fertilization

Research period： 1996.4 - 2000.12
Research theme： Studies of porcine follicular oocytes matured in in vitro system

Keyword： oocyte maturation, GVBD, osmolarity, hormones

Research period： 1990.4 - 1997.12

Awards

SRD Outstanding Research Award

2024.9 The Society for Reproduction and Development Development of a three-dimensional culture model of endometrium to study embryo-uterine interactions

山内伸彦

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Award type：International academic award (Japan or overseas) Country：Japan

　三次元培養細胞は，従来から行われている単層培養細胞と比較して，形態的・生理的に生体内により近い性質を示す事が報告されており，創薬や医療，動物実験の代替法あるいは細胞や組織の機能解析に用いられている．一方で，三次元培養は単層培養に比べて技術的に困難であり，組織や細胞に依存したそれぞれの培養法が必要となる．本研究は，妊娠の成立と維持に必要な子宮内膜の機能解析モデルとして，子宮内膜細胞の独自の三次元培養方法を確立した．さらにそのモデルを利用し，胚と子宮間の相互作用の解明を行ったものである[3.4-1]．
（1）子宮内膜細胞の三次元培養法の確立
ウシ子宮内膜間質細胞(BES)をアスコルビン酸添加培地で培養し，コンフルエントに達した後EDTA処理を行ったところ，ECM産生が促進されるため単層培養細胞がシート状に培養皿から脱離することを見出した．細胞シートは収縮・凝集し，脱離3日後に三次元多細胞塊（スフェロイド）が構築された．ウシ子宮内膜上皮細胞(BEE)と共培養することにより二種類の細胞から構成されるヘテロスフェロイドの構築も可能であった[5.2-11]．より簡易的な方法としてU字型の細胞非接着性プレートを用い，BESとBEEを混合播種することにより，容易にヘテロスフェロイドを作製する手法を開発した[3.3-12, 3-4-11, 5.1-7]．作製されたヘテロスフェロイドは，内部のBESを最外層のBEEが被う形態を示し，マトリックスメタロプロテイナーゼ（MMP）の発現が生体と同様に安定していた．さらに，腺上皮細胞のモデルとしてBEEのマトリゲル内培養を行った．ゲル内で三次元培養したBEEは腺様構造を形成し，腺上皮特異的遺伝子の発現が高いことを明らかにした[3.3-2]．
（2）胚-子宮間相互作用の解析
　着床前の子宮内膜では胎盤形成に備えて組織改変が起こり，ECMが減少することが知られている．ウシ子宮内膜におけるこの変化は，胚性のI型IFNによって誘導されると考えられている．候補者は，IFNがECM分解酵素であるMMPを制御していると仮定し，スフェロイドを用いてその仮説を検証した．その結果，IFNはMMP遺伝子の発現に対して抑制的に作用するものの，スフェロイド内部に蓄積されているMMPを活性化させ，培養液中への放出を促進することを明らかにした[3.3-3]．また，ウシ子宮内膜のRNAseq解析[3.3-4]によりMMPを活性化するグリコサミノグリカン分解酵素を検索し，N-acetylgalactosamine-6-sulfatase（GALNS）の発現が着床期に上昇することを見出した．さらに，GALNSの発現がIFNによって誘導され，GALNSがMMPの放出を促進することをスフェロイドを用いて実証した[3.2-7]．これらの結果は、IFNがGALNSを介してMMPの放出を促進し，着床期子宮内膜の組織改変を誘起することを示している．
（3）生体外着床モデルの構築
　生体外で着床現象を再現するモデルの構築は，着床や胎盤形成を解明する上で有効なツールとなり得る．齧歯類の子宮内膜上皮細胞は継代培養が困難であり，スフェロイドの作製が不可能である．そこで，ラット子宮組織小片を細胞非接着性の培養皿で培養し，内部の間質細胞とECMが一層の上皮細胞で覆われた形態を有する培養組織片を作製した．培養ラット子宮組織片をdb-cAMPとMPAで処理し脱落膜化を誘導したところ，マーカー遺伝子であるPrl8a2とBmp2の発現が増加した．脱出胚盤胞期胚との共培養を行うと胚接着が確認され（36%），接着率はP4処理によって上昇し（64%），E2処理によって認められなくなった（0%）[3.2-9, 3.3-6, 3.4-6]．
　ウシ胚においてIFN以外の妊娠認識物質を検索するため，伸長期胚培養上清のLC-MS/MS解析を行い新たな胚性因子としてマクロファージ遊走阻止因子（MIF）を見出した[3.2-10]．さらに，MIFがIFNとの共作用によって子宮内膜のCCL2発現を促進することを明らかにした[3.3-1, 3.4-2]．CCL2の着床における機能を解明するために，ウシ栄養膜細胞を三次元的に培養した栄養膜小胞を用いる着床モデルを作製し，上皮細胞との共培養を行った．その結果，CCL2が接着因子の発現を制御することにより胚の上皮細胞への接着を促進することを明らかにした[3.2-5]．
　以上，本研究は子宮内膜細胞の三次元培養方法を確立し，その応用により胚-子宮間相互作用の解明を行ったものである．これらの知見は実験動物にとどまらず，家畜およびヒトを含め，哺乳動物への普遍的な適用が可能である．

Papers

C-C motif chemokine ligand 2 regulates prostaglandin synthesis and embryo attachment of the bovine endometrium during implantation. Reviewed International journal

#Yun CS, #Saito Y, #Rahman AMI, @Suzuki T, @Takahashi H, @Kizaki K, @Khandoker MAMY, @Yamauchi N.

Cell Tissue Res. 2024 May;396(2):231-243. doi: 10.1007/s00441-024-03869-8. Epub 2024 Mar 5. PMID: 38438567 2024.5

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Gene expression of bovine endometrial epithelial cells cultured in matrigel. Reviewed International journal

#Nishino D, #Kotake A, #Yun CS, #Rahman AMI, @El-Sharawy M, @Yamanaka KI, @Khandoker MAMY, @Yamauchi N.

Cell Tissue Res. 2021 Apr 10. doi: 10.1007/s00441-021-03418-7. Online ahead of print. 2021.4

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)

Glandular epithelial cells (GE) in the endometrium are thought to support the elongation and survival of ruminant embryos by secreting histotrophs. In the present study, the gene expression of bovine endometrial epithelial cells cultured in matrigel was analyzed and examined whether it could be an in vitro model of GE. Bovine endometrial epithelial cells (BEE) and stromal cells (BES) were isolated from the slaughterhouse uteri and cultured in DMEM/F12 + 10% FBS. BEE showed the gland-like structure morphological changes when cultured in 15% matrigel but could not be identified in higher concentrations of the matrigel (30% or 60%). The expression of typical genes expressed in GE, SERPINA14 and GRP, was substantially high in matrigel-cultured BEE than in monolayer (P < 0.05). P4 and INFα have no significant effect on the SERPINA14 expression of BEE cultured in matrigel without co-culture with BES. On the other hand, when BEE were co-cultured with BES in matrigel culture, the expression of FGF13 was increased by the P4 treatment (P < 0.05). Furthermore, SERPINA14 and TXN expressions were increased by P4 + IFNα treatment (P < 0.05). These results demonstrate the appropriate conditions for BEE to form glandular structures in matrigel and the effect of co-culture with BES. The present study highlighted the possible use of matrigel for the culture of BEE to investigate the expression of cell-specific glandular epithelial genes as well as P4 and type-I IFN as factors controlling endometrial function during the implantation period.
Analysis of novel embryonic factors of cattle and effects on endometrial cells in vitro. Reviewed International journal

#Yun CS, #Masaka H, #Nishino D, #Horaku S, #Rahman AMI, @Khandoker MAMY, @Yamauchi N.

Anim Reprod Sci. 2021 Mar;226:106696. doi: 10.1016/j.anireprosci.2021.106696. 226 2021.3

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)

Interferon tau (IFNT) is thought to have essential functions in maternal recognition and establishment of pregnancy in ruminants. There, however, is a lack of research on embryonic factors that affect pregnancy other than IFNT. The present study was conducted to determine what are other embryo-derived factors involved in pregnancy recognition and to identify effects on endometrial cells using an in vitro culture system. With use of LC-MS/MS procedures to evaluate the supernatant of elongating embryos of cattle in culture, there was detection of 78 secretary proteins including five cytokines and two growth factors. Then there was analysis for up-regulated genes using ingenuity pathway procedure, IFNT and MIF were identified as upstream regulators of 37 and five genes, respectively. The mRNA transcript of MIF receptors was identified in endometrial cells, however, not in embryos. Among genes induced by MIF, CCL2, IL7 and IL23A transcripts were identified in endometrial cells. When endometrial cells were treated with interferon alpha (IFNA) and MIF, the CCL2 transcript was in a larger abundance of endometrial epithelial and polymorphonuclear neutrophil cells, and there was a larger abundance of there mRNA transcripts as a result of MIF treatment of peripheral blood mononuclear cells. In conclusion, MIF secreted by elongating embryos of cattle synergistically regulates relative abundances of specific mRNA transcripts of endometrial cells when there is treatment with IFNA, indicating further there are several factors other than IFNT that have effects on gene expression in the endometrium during early stages of gestation in cattle.
Type-I interferon regulates matrix metalloproteinases clearance of the bovine endometrial spheroid Reviewed International journal

#Rahman ANMI, #Yamashita S, #Fujihara T, #Islam MR, #Fujihara T, #Yamaguchi H, @Kawahara M, @Takahashi M, @Takahashi H, @Gotoh T, @Yamauchi N.

Anim Sci J. Jan-Dec 2020;91(1):e13350. doi: 10.1111/asj.13350. 89 1609-1621 2020.1

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)

This study investigated the effect of type-I interferon (IFN) on the expression of matrix metalloproteinases (MMPs) of the bovine endometrial stromal cells (BES) and epithelial cells (BEE). The cells were separated and purified from the caruncles and cultured in DMEM/F-12 containing 10% fetal bovine serum. Spheroids were generated by using ascorbate. Zymograms of the supernatant showed that BEE
predominantly expressed MMP-9, whereas MMP-2 was expressed in BES and homospheroids. While MMPs expression was not detected in hetero-spheroids. Real-time quantitative PCR revealed that type-I IFN and P4 suppressed the gene expression of MMP-2 and MMP-9 in hetero-spheroids, respectively. On the other hand, gelatin zymography analysis of the supernatant showed that type-I IFN strongly promote the clearance of MMPs. While zymograms of the MMPs stocked in the hetero-spheroids were significantly reduced by type-I IFN. Phenylmethanesulfonyl fluoride and leupeptin (both are serine proteinase inhibitors) significantly repressed the clearance of MMP-2 and MMP-9 induced by type-I IFN. Moreover, collagen fibers in heterospheroids significantly decreased after the treatment with type-I IFN. In conclusion, it was suggested that type-I IFN participate in the tissue remodeling by regulation the clearance of MMPs.
Analysis of differentially expressed genes and the promoters in bovine endometrium throughout estrus cycle and early pregnancy. Reviewed International journal

#Musavi SAA, #Yamashita S, #Fujihara T, #Masaka H, #Islam MR, @Kim S, @Gotoh T, @Kawahara M, @Tashiro K, @Yamauchi N.

Anim Sci J. 2018 Nov;89(11):1609-1621. doi: 10.1111/asj.13091. Epub 2018 Sep 5. 89 1609-1621 2018.11

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)

Endometrial gene expression is primarily regulated by the ovarian steroids and pregnancy recognition factors. The present study was aimed to characterize differential expression genes (DEGs) in bovine endometrium together with the analysis of their promoter region. Bovine uteri at follicular stage (FS), luteal stage (LS) and implantation stage (IS) at day18 of pregnancy were collected. Total RNA extracted and prepared cDNA were then subjected to high-throughput sequencing. For promoter analysis, 1kb upstream promoter region of each DEG was analyzed. The number of highly expressed DEGs were 496 and 597 at FS and LS, respectively. When compared the gene expression of IS with LS, 383 and 346 DEGs showed higher and lower expression at IS, respectively. It was also observed that 20-30 transcription factors (TFs) were included in each DEGs. Additionally, promoter analyses estimated 150-160 TFs for each stage. DLX4 and IRF4 at FS, and IRF5, IRF9, STAT1 and STAT2 at IS were in common to DEGs and estimated TFs, respectively. The present study highlighted potential molecular mechanisms controlling endometrial function during estrus cycle and implantation stage, which will further guide to better understand the endometrial functions in future studies.

DOI： 2018 Nov;89(11):1609-1621. doi: 10.1111/asj.13091. Epub 2018 Sep 5.
Development of an in vitro model to study uterine functions and early implantation using rat uterine explants. Reviewed International journal

#Islam MR, #Ikeguchi Y, #Yamagami K, El-Sharawy M, #Yamauchi N.

Cell Tissue Res. 370 501 - 512 2017.6

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)

The study was conducted to develop an in vitro model using rat uterine explants to explore complex uterine functions. Rat uterine explants (1-2 mm) were isolated, cultured and further characterized. Cultured explants after steroid hormone treatment exposed that both Muc1 and Pr are up-regulated significantly (P<0.05) by E2. Areg is up-regulated significantly (P<0.05) by P4. Surprisingly, Igfbp1 is up-regulated significantly (P<0.05) by E2 and P4, although in rat Igfbp1 is E2 dependent. Furthermore, in vitro decidualization of cultured explants was induced and two potential markers of decidualization namely Prl8a2 and Bmp2 were analysed. Real time quantitative PCR data revealed that both Prl8a2 and Bmp2 are significantly (P<0.05) up-regulated in MPA and db-cAMP treated explants compared to the control group of explants. Then, individual hatched blastocyst and cultured explant was placed in a 96U (U shaped round bottom) well plate. Results showed that stable attachments are observed after 48 hours of co-culture, where embryos were stably attached to the explants and could not be dislodged after mild shaking and/or pipetting. Steroid hormone treatment revealed that the rate of attachment of embryo to the explant is significantly increased in P4 treated group (63.6%) compared to the control group (35.5%). On the other hand, rate of attachment is significantly reduced in E2 treated group compared to the control group, where no stable attachments are observed in E2 treated group (0.0%). Despite the necessity of comprehensive investigation, our results suggest that the cultured rat uterine explants can be a useful in vitro model to study uterine functions and early implantation.
Effect of Organic and Inorganic Selenium Supplementation on Semen Quality and Blood Enzymes in Buffalo Bulls. Reviewed International journal

El-sharawy M, Eid E, Darwish S, El-razek IABD, Islam MR, Kubota K, Nobuhiko Yamauchi, El-shamaa I

Anim Sci J. 21 2016.5

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Growth factor induced proliferation, migration, and lumen formation of rat endometrial epithelial cells in vitro. Reviewed International journal

Md. Rashedul Islam, Yamagami K, Yashii Y, Nobuhiko Yamauchi

J Reprod Dev 2016.3

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Kid depletion in mouse oocytes associated with multinucleated blastomere formation and inferior embryo development. Reviewed International journal

Egashira A, Nobuhiko Yamauchi, Md. Rashedul Islam, Yamagami K, Tanaka A, Suyama H, El-Sayed EM, Shoji Tabata, Kuramoto T

Anim Sci J. 2016.2

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Preimplantation embryo-secreted factors modulate maternal gene expression in rat uterus. Reviewed International journal

Yamagami K, Md. Rashedul Islam, Yoshii Y, Mori K, KOSUKE TASHIRO, Nobuhiko Yamauchi

Cell Tissue Res. 364 453 - 463 2015.12

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Expression dynamics of bovine MX genes in the endometrium and placenta during early to mid pregnancy. Reviewed International journal

Shirozu T, Sasaki K, Kawahara M, Yanagawa Y, Nagano M, Nobuhiko Yamauchi, Takahashi M

J Reprod Dev 62 ( 1 ) 29 - 35 2015.10

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Developmental capacity and implantation potential of the embryos with multinucleated blastomeres. Reviewed International journal

Egashira A, Nobuhiko Yamauchi, Tanaka K, Mine C, Otsubo H, Murakami M, Md. Rashedul Islam, Ohtsuka M, Yoshioka N, Kuramoto T

J Reprod Dev 61 ( 6 ) 595 - 600 2015.9

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Development of an in vitro model for the analysis of bovine endometrium using simple techniques. Reviewed International journal

Yamauchi K, Nobuhiko Yamauchi, Yamagami K, Nakamura N, Yamashita S, Islam MR, Shoji Tabata, Yahiro K, Tamura T, Hashizume K, Masa-aki Hattori

Anim Sci J. 2015 May;86(5):523-31. 2015.5

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Expression and Regulation of Foxa2 in the Rat Uterus during Early Pregnancy. Reviewed International journal

Yamagami K, Nobuhiko Yamauchi, Kubota K, Nishimura S, Vishwajit Sur Chowdhury, Yamanaka K, Takahashi M, Shoji Tabata, Masa-aki Hattori

J Reprod Dev 2014.9

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Effect of PPARβ/δ Agonist on the Placentation and Embryo-Fetal Development in Rats. Reviewed International journal

Nishimura K, Nakano N, Vishwajit Sur Chowdhury, Kaneto M, Torii M, Nobuhiko Yamauchi, Masa-aki Hattori, Kawai M

Birth Defects Res B Dev Reprod Toxicol. 2013 Apr;98(2):164-9. 2013.4

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Expression of peroxisome proliferator-activated receptor isoforms in the rat uterus during early pregnancy. Reviewed International journal

Nishimura K, Yamauchi N, Chowdhury VS, Torii M, Hattori MA, Kaneto M.

Cell Tissue Res. 2011 Aug;345(2):275-84. 2011.7

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Steroidal regulation of Ihh and Gli1 expression in the rat uterus. Reviewed International journal

Kubota K, Yamauchi N, Yamagami K, Nishimura S, Gobaru T, Yamanaka K, Wood C, Soh T, Takahashi M, Hattori MA.

Cell Tissue Res. 2010 May;340(2):389-95. Epub 2010 Mar 16. 2010.3

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
In vitro decidualization of rat endometrial stromal cells. Reviewed International journal

Matsumoto K, Yamauchi N, Watanabe R, Oozono S, Kubota K, Nishimura K, Wood C, Soh T, Kizaki K, Hattori MA.

Cell Tissue Res. 2009 Mar;335(3):575-83. Epub 2008 Dec 17. 2008.12

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Expression of rat uterine serine proteinases homologous to mouse implantation serine proteinase 2. Reviewed International journal

Oozono S, Yamauchi N, Nishimura K, Matsumoto K, Watanabe R, Kubota K, Aramaki S, Sato F, Wood C, Soh T, Kizaki K, Hattori MA.

J Exp Zoolog B Mol Dev Evol. 2008 Dec 15;310(8):642-9. 2008.12

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Expression of hedgehog family genes in the rat uterus during early pregnancy. Reviewed International journal

Kubota K, Yamauchi N, Matsumoto K, Watanabe R, Oozono S, Aramaki S, Wood C, Soh T, Hattori MA.

J Reprod Dev. 2008 Oct;54(5):340-5. Epub 2008 Jul 8. 2008.7

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Effects of tumor necrosis factor-alpha on cell proliferation, prostaglandins and matrix-metalloproteinases production in rat endometrial stromal cells cultured in vitro Reviewed International journal

Gamo T, Yamauchi N, Nishimura K, Watanabe R, Matsumoto K, Oozono S, Kubota K, He PJ, Soh T, Hattori MA.

J Exp Zool Part A Ecol Genet Physiol 2007.12

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Proliferative potential of endometrial stromal cells, and endometrial and placental expression of cyclin in bovine. Reviewed International journal

N Yamauchi, T Takezawa, K Kizaki, CB Herath, K Hashizume

J Reprod Dev 49 ( 6 ) 553 - 560 2003.10

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)

Proliferative potential of endometrial stromal cells, and endometrial
and placental expression of cyclin in bovine.
N Yamauchi, T Takezawa, K Kizaki, CB Herath, K Hashizume.
J Reprod Dev 49(2003), 553-560.

DOI： 10.1262/jrd.49.553
Expression of integrin subunits depend on bovine endometrial stromal cells cultured in vitro. Reviewed

N Yamauchi, K Kizaki, O Yamada, T Takahashi, CB Herath, K Hashizume

Connective Tissue 2003.2

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)

Expression of integrin subunits depend on bovine endometrial stromal cells cultured in vitro.
N Yamauchi, K Kizaki, O Yamada, T Takahashi, CB Herath, K Hashizume
Connective Tissue 35(2003), 1-7.
A three-dimensional cell culture model for bovine endometrium; regeneration of a multicellular spheroid using ascoebate. Reviewed International journal

N Yamauchi, O Yamada, T Takahashi, K Imai, T Sato, A Ito, K Hashizume

Placenta 2002.10

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)

A three-dimensional cell culture model for bovine endometrium; regeneration of a multicellular spheroid using ascoebate.
N Yamauchi, O Yamada, T Takahashi, K Imai, T Sato, A Ito, K Hashizume.
Placenta 24(2002), 258-269.
Cloning and localization of heparanase in bovine placenta. Reviewed International journal

K Kizaki, O Yamada, H Nakano, T Takahashi, N Yamauchi, K Imai, K Hashizume

Placenta 2002.10

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)

Cloning and localization of heparanase in bovine placenta.
K Kizaki, O Yamada, H Nakano, T Takahashi, N Yamauchi, K Imai, K Hashizume
Placenta 24(2002), 424-430.
Spheroid formation of bovine endometrial stromal cells using non- adherent culture plate. Reviewed International journal

N Yamauchi, O Yamada, T Takahashi, K Hashizume

Journal of Reproduction and Development 2001.4

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)

Spheroid formation of bovine endometrial stromal cells using non-
adherent culture plate.
N Yamauchi, O Yamada, T Takahashi, K Hashizume.
Journal of Reproduction and Development 47 (2001), 165-171.
C<bold>-</bold>C motif chemokine ligand 2 regulates prostaglandin synthesis and embryo attachment of the bovine endometrium during implantation

Yun, CS; Saito, Y; Rahman, AMI; Suzuki, T; Takahashi, H; Kizaki, K; Khandoker, MAMY; Yamauchi, N

CELL AND TISSUE RESEARCH 396 ( 2 ) 231 - 243 2024.5 （ ISSN:0302-766X eISSN:1432-0878 ）

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Language：English Publisher：Cell and Tissue Research

C-C motif chemokine ligand 2 (CCL2) has been reported to be expressed in the bovine endometrium during pregnancy. However, the details of its functions involved in the implantation mechanism are still not clear. The purpose of this study is to analyze the functional properties of CCL2 in the bovine endometrium and embryos. The expression of CCR2 was not different between the luteal phase and implantation phase of their endometrial tissues, but was significantly high in IFNa treated bovine endometrial stromal (BES) cells in vitro. The expressions of PGES1, PGES2, AKR1C4, and AKR1C4 were high at the implantation stage compared with the luteal stage. On the other hand, PGES2 and AKR1B1 in BEE and PGES3 and AKR1A1 in BES were significantly increased by CCL2 treatment, respectively. The expressions of PCNA and IFNt were found significantly high in the bovine trophoblastic cells (BT) treated with CCL2 compared to the control. CCL2 significantly increased the attachment rate of BT vesicles to BEE in in vitro co-culture system. The expression of OPN and ICAM-1 increased in BEE, and ICAM-1 increased in BT by CCL2 treatment, respectively. The present results indicate that CCL2 has the potential to regulate the synthesis of PGs in the endometrium and the embryo growth. In addition, CCL2 has the possibility to regulate the process of bovine embryo attachment to the endometrium by modulation of binding molecules expression.

DOI： 10.1007/s00441-024-03869-8

Web of Science

Scopus

PubMed
The Effect of Integrated Play Therapy on Self-Expression and Depression in Elderly Women Living Alone in Rural Areas

@Tae Young KIL, @Han Su RYU and @Nobuhiko YAMAUCHI

J Faculty Agriculture, Kyushu University. 63 ( 2 ) 265 - 270 2018.10

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)

The aim of this study is to investigate the effects of an integrated play therapy program on self-expression, depression, and psychosocial well-being among elderly women who live alone in rural areas. The study was conducted on a group of elderly women, aged 65 and over, who were living alone. Researchers selected one village in the township of A-country, Chungcheongnam-do, South Korea. Data were collected from 24 experimental groups and 24 non-participating control groups. The program was applied to the experimental group for a total of eight weeks (one two-hour session per week). An analysis compared the results of the non-identical control group before and after the program; the effect of the program was measured by assessing participants using a follow-up test, before, immediately after, and ten weeks after the program. The results showed that levels of self-expression increased significantly in the experimental group, from 2.96 before the program, to 3.45 immediately after the program, and 4.13 ten weeks later. Rates of depression decreased significantly in the follow-up tests, measuring 0.85, 0.67, and 0.21 before, after, and ten weeks later. These results show that the play therapy program was effective and had a continuous effect on elderly participants. This study confirms that integrated play therapy is an effective program for developing self-expression and reducing depression among elderly women who live alone in rural areas. Based on these results, this article discusses the impact of the program on self-expression and depression among elderly women who live alone in rural areas; it proposes a policy as a basis for operating and using integrated play therapy to help vulnerable elderly people.
Effect of Various Coconut (Cocos nucifera) Milk Concentrations Instead of Egg Yolk on Freezability and Fertility of Frozen Holstein Bull Spermatozoa.

@Ibrahim EL-SHAMAA, @Mostafa IBRAHIM, @Mohamed EL-SHARAWY, @Raed MAHMOUD, @Kaiyu KUBOTA, @Nobuhiku YAMAUCHI and @El-Shenawy El-SIEFY

J Faculty Agriculture, Kyushu University. 63 ( 2 ) 265 - 270 2018.10

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)

The study was carried out to investigate if the substitution of egg yolk (EY) with various coconut (Cocos nucifera) milk concentrations in extenders can improve the freezability and fertility of frozen Holstein bull spermatozoa. Semen from five Holstein bulls was collected twice weekly and ejaculates with 75% progressive motility and more 85% normal sperm morphology prior to cryopreservation were pooled in order to have sufficient semen for a replicate and to eliminate the bull effect. Five extenders were used. Tris 20% egg yolk extender with 7% glycerol as a control, and substitution of whole egg yolk with 5, 10, 15, and 20% coconut milk. Semen was diluted to 80 million sperm/ml packaged into 0.25ml straws, cooled held at 5ºC for 4 h, and then frozen in liquid nitrogen and stored at –196ºC until for artificial insemination. Sperm progressive motility, live sperm, sperm abnormality, intact sperm acrosome and plasma membrane integrity were evaluated post dilution, post–equilibration and post frozen–thawed processes. The results revealed that 5% coconut milk extender was more effective in preservation of progressive motility, live sperm, sperm abnormality, intact sperm acrosome and plasma membrane integrity of Holstein spermatozoa than whole egg yolk extender and other coconut milk extenders. Fertility rates were higher in 5% and 10% coconut milk extenders compared with whole egg yolk extender (65% and 55% vs 45%, respectively) and other 15% and 20% coconut milk extenders (45% and 40%, respectively). It was concluded that 5% coconut milk extender improved the freezability and fertility of Holstein bull spermatozoa.
Protective effect of Trehalose on Canine Spermatozoa in Cryopreservation.

Park KS, Chun JL, Kim EY, Lee JH, Lee HS, Yamauchi N, Lee KB, Kim MK.

J Faculty Agriculture, Kyushu University. 63 ( 1 ) 53 - 60 2018.4

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Genetic Structure Analysis of Northeast Asian Sika Deer (Cervus nippon) Populations using Mitochondrial and Microsatellite Markers.

Yun CS, Chun JL,Yu J, Kim DE, Park KS, Kim EY, Lee JH, Yoon KB, #Yamauchi N, Lee S, Kim MK.

J Faculty Agriculture, Kyushu University. 63 ( 1 ) 37 - 44 2018.4

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)

Repository Public URL： http://hdl.handle.net/2324/1909900
Production of Female Bovine Embryos with Sperm Sorted by Magnetic Activated Cell Sorting.

Zhuang L, Chun JL, Wu J, Lee JH, Kim EY, Lee BM, Yamauchi N, Lee HS, Kim MK.

J Faculty Agriculture, Kyushu University. 63 ( 1 ) 45 - 52 2018.4

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)

Repository Public URL： http://hdl.handle.net/2324/1909901
Effect of Glutathione on Cryopreservation of Buck Spermatozoa.

El-behnsawy B, El-shenawy ES, El-halawany R, El-sharawy M, Kubota K, #Yamauchi N, El-Salam AM.

J Faculty Agriculture, Kyushu University. 62 ( 2 ) 367 - 372 2017.10

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)

Repository Public URL： http://hdl.handle.net/2324/1854008
Soybean Milk-Based Extender for Cryopreservation of Buck Spermatozoa.

Soltan W, El-shenawy ES, El-razek IABD, El-sharawy M, Kubota K, #Yamauchi N, El-shamaa I.

J Faculty Agriculture, Kyushu University. 2017;62(2):361-366. 62 ( 2 ) 361 - 366 2017.10

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Conserved roles of fibroblast growth factor receptor 2 signaling in the regulation of inner cell mass development in bovine blastocysts. Reviewed International journal

Akizawa H, Nagatomo H, Odagiri H, Kohri N, Nobuhiko Yamauchi, Yanagawa Y, Nagano M, Takahashi M, Kawahara M

Mol Reprod Dev. 2016.4

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
The nuclear receptor REV-ERBα represses the transcription of growth/differentiation factor 10 and 15 genes in rat endometrium stromal cells. Reviewed International journal

Zhao L, Isayama K, Chen H, Nobuhiko Yamauchi, Shigeyoshi Y, Hashimoto S, Masa-aki Hattori

Physiol Rep. 2016.2

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Requirement for nuclear autoantigenic sperm protein mRNA expression in bovine preimplantation development. Reviewed International journal

Nagatomo H, Kohri N, Akizawa H, Hoshino Y, Nobuhiko Yamauchi, Kono T, Takahashi M, Kawahara M

Anim Sci J. 87 ( 3 ) 457 - 461 2015.12

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Comparing spatial expression dynamics of bovine blastocyst under three different procedures: in-vivo, in-vitro derived, and somatic cell nuclear transfer embryos. Reviewed International journal

Nagatomo H, Akizawa H, Sada A, Kishi Y, Yamanaka K, Takuma T, Sasaki K, Nobuhiko Yamauchi, Yanagawa Y, Nagano M, Kono T, Takahashi M, Kawahara M

Jpn J Vet Res. 2015 Nov;63(4):159-71. 63 ( 4 ) 159 - 171 2015.11

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Integration of the nuclear receptor REV-ERBα linked with circadian oscillators in the expressions of Alas1, Ppargc1a, and Il6 genes in rat granulosa cells. Reviewed International journal

Chen H, Isayama K, Kumazawa M, Zhao L, Nobuhiko Yamauchi, Yasufumi Shigeyoshi, Seiichi Hashimoto, Masa-aki Hattori

Chronobiol Int. 2015; 32(6):739-49. 32 ( 6 ) 739 - 749 2015.6

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Removal of Rev-erbα inhibition contributes to the prostaglandin G/H synthase 2 expression in rat endometrial stromal cells. Reviewed International journal

Isayama K, Zhao L, Chen H, Nobuhiko Yamauchi, Shigeyoshi Y, Hashimoto S, Masa-aki Hattori

Am J Physiol Endocrinol Metab. 2015 Apr 15;308(8):E650-61. 2015.4

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Inhibitory role of REV-ERBα in the expression of bone morphogenetic protein gene family in rat uterus endometrium stromal cells. Reviewed International journal

Tasaki H, Zhao L, Isayama K, Chen H, Nobuhiko Yamauchi, Shigeyoshi Y, Hashimoto S, Masa-aki Hattori

Am J Physiol Cell Physiol. 2015 Apr 1;308(7):C528-38. 2015.4

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
REV-ERBα Inhibits the PTGS2 Expression in Bovine Uterus Endometrium Stromal and Epithelial Cells Exposed to Ovarian Steroids. Reviewed International journal

Isayama K, Chen H, Nobuhiko Yamauchi, Masa-aki Hattori

J Reprod Dev 2014.7

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
The Putative Promoters of Germ Cell-specific Genes and Nanog are Hypomethylated in Chicken Sperm. Reviewed International journal

Kito G, Tanaka H, Tomoki 　 Soh, Nobuhiko Yamauchi, Masa-aki Hattori

J Reprod Dev 2014.3

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Contribution of testosterone to the clock system in rat prostate mesenchyme cells. Reviewed International journal

Kawamura M, Tasaki H, Misawa I, Chu G, Nobuhiko Yamauchi, Masa-aki Hattori

Andrology 2014.3

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Effect of ATP-binding cassette subfamily B member 1 on bovine blastocyst implantation. Reviewed International journal

Mori M, Kuwano T, Kamori T, Isozaki Y, Nishihara T, Nobuhiko Yamauchi, Masa-aki Hattori

Theriogenology 2014.3

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Profiling of circadian genes expressed in the uterus endometrial stromal cells of pregnant rats as revealed by DNA microarray coupled with RNA interference. Reviewed International journal

Tasaki H, Zhao L, Isayama K, Chen H, Nobuhiko Yamauchi, Shigeyoshi Y, Hashimoto S, Masa-aki Hattori

Frontiers in Endocrinology — Systems and Translational Endocrinology (Circadian Clock and Pregnancy) 4: 82 (2013). 2013.7

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Down-regulation of core clock gene Bmal1 attenuates expression of progesterone and prostaglandin biosynthesis-related genes in rat luteinizing granulosa cells. Reviewed International journal

Chen H, Zhao L, Kumazawa M, Nobuhiko Yamauchi, Shigeyoshi Y, Hashimoto S, Masa-aki Hattori

Am J Physiol Cell Physiol. 2013 Apr 17. 2013.4

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
FSH induces the development of circadian clockwork in rat granulosa cells via a gap junction protein Cx43-dependent pathway. Reviewed International journal

Chen H, Zhao L, Chu G, Kito G, Nobuhiko Yamauchi, Shigeyoshi Y, Hashimoto S, Masa-aki Hattori

Am J Physiol Endocrinol Metab. 2013 Mar 15;304(6):E566-75. 2013.3

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Improvement of the cellular quality of cryopreserved bovine blastocysts accompanied by enhancement of the ATP-binding cassette sub-family B member 1 expression. Reviewed International journal

Mori M, Kasa S, Isozaki Y, Kamori T, Yamaguchi S, Ueda S, Kuwano T, Eguchi M, Isayama K, Shotaro Nishimura, Shoji Tabata, Nobuhiko Yamauchi, Masa-aki Hattori

Reprod Toxicol. 2013 Jan;35:17-24. 2013.1

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Rev-erbα regulates circadian rhythms and StAR expression in rat granulosa cells as identified by the agonist GSK4112. Reviewed International journal

Chen H, Chu G, Zhao L, Yamauchi N, Shigeyoshi Y, Hashimoto S, Hattori MA.

Biochem Biophys Res Commun. 2012 Apr 6;420(2):374-9. 2012.4

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Contribution of FSH and triiodothyronine to the development of circadian clocks during granulosa cell maturation. Reviewed International journal

Chu G, Misawa I, Chen H, Yamauchi N, Shigeyoshi Y, Hashimoto S, Hattori MA.

Am J Physiol Endocrinol Metab. 2012 Mar;302(6):E645-53. 2012.3

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Alterations of circadian clockworks during differentiation and apoptosis of rat ovarian cells. Reviewed International journal

Chu G, Yoshida K, Narahara S, Uchikawa M, Kawamura M, Yamauchi N, Xi Y, Shigeyoshi Y, Hashimoto S, Hattori MA.

Chronobiol Int. 2011 Jul;28(6):477-87. 2011.7

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Down-regulation of circadian clock gene period 2 in uterine endometrial stromal cells of pregnant rats during decidualization. Reviewed International journal

Uchikawa M, Kawamura M, Yamauchi N, Hattori MA.

Chronobiol Int. 2011 Feb;28(1):1-9. 2011.2

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Upregulation of P-Glycoprotein Activity in Porcine Oocytes and Granulosa Cells During In Vitro Maturation. Reviewed International journal

Yokota K, Hirano T, Urata N, Yamauchi N, Hattori MA.

J Reprod Dev. 2011 Jan 28. 2011.1

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Temporal and Spatial Differential Expression of Chicken Germline-specific Proteins cDAZL, CDH and CVH During Gametogenesis. Reviewed International journal

Kito G, Aramaki S, Tanaka K, Soh T, Yamauchi N, Hattori MA.

J Reprod Dev. 2010 Mar 24. 2010.3

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Up-regulation of circadian clock gene Period 2 in the prostate mesenchymal cells during flutamide-induced apoptosis. Reviewed International journal

Yoshida K, He PJ, Yamauchi N, Hashimoto S, Hattori MA.

Mol Cell Biochem. 2010 Feb;335(1-2):37-45. Epub 2009 Aug 28. 2010.2

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Monitor of the myostatin autocrine action during differentiation of embryonic chicken myoblasts into myotubes: effect of IGF-I. Reviewed International journal

Kurokawa M, Sato F, Aramaki S, Soh T, Yamauchi N, Hattori MA.

Mol Cell Biochem. 2009 Nov;331(1-2):193-9. Epub 2009 May 24. 2009.11

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
顆粒膜細胞の分化と黄体細胞のアポトーシスにリンクするペースメーカーの発振． Reviewed

吉田薫，楢原佐由子，賀培建，平田雅美，山内伸彦，橋本誠一，服部眞彰．

Jpn J Reprod End. 2009; 14: 29-34. 14 29 - 34 2009.3

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Language：Japanese Publishing type：Research paper (scientific journal)
Chicken Dead End Homologue Protein is a Nucleoprotein of Germ Cells Including Primordial Germ Cells. Reviewed International journal

Aramaki S, Kubota K, Soh T, Yamauchi N, Hattori MA.

J Reprod Dev. 2009 Feb 5. 2009.2

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Progesterone, but not estradiol, synchronizes circadian oscillator in the uterus endometrial stromal cells. Reviewed International journal

Hirata M, He PJ, Shibuya N, Uchikawa M, Yamauchi N, Hashimoto S, Hattori MA.

Mol Cell Biochem. 2009 Apr;324(1-2):31-8. Epub 2008 Dec 20. 2008.12

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Ubiquitous expression of myostatin in chicken embryonic tissues: its high expression in testis and ovary Reviewed International journal

Kubota K, Sato F, Aramaki S, Soh T, Yamauchi N, Hattori M A

Comp Biochem Physiol A Mol Integr Physiol 2007.11

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Up-regulation of Per1 expression by estradiol and progesterone in the rat uterus Reviewed International journal

He PJ, Hirata M, Yamauchi N, Hattori MA.

J Endocrinol 2007.9

　More details

Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Gonadotropic regulation of circadian clockwork in rat granulosa cells. Reviewed International journal

He PJ, Hirata M, Yamauchi N, Hashimoto S, Hattori MA.

Mol Cell Biochem 2007.8

　More details

Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Development of multidrug resistance type I Cmdr1 expression in chicken embryonic gonads. Reviewed International journal

Yamada K, Shibuya N, Aramaki S, Okuno S, Soh T, Yamauchi N, Hattori MA.

Comp Biochem Physiol A Mol Integr Physiol 2007.8

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
The disruption of circadian clockwork in differentiating cells from rat reproductive tissues as identified by in vitro real-time monitoring system Reviewed International journal

He PJ, Hirata M, Yamauchi N, Hashimoto S, Hattori MA.

J Endocrinol 2007.6

　More details

Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Progesterone-dependent and -independent expression of the multidrug resistance type I gene in porcine granulosa cells. Reviewed International journal

Fukuda H, He PJ, Yokota K, Soh T, Yamauchi N, Hattori MA.

Mol Cell Biochem 2007.4

　More details

Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Real-time monitoring of cAMP response element binding protein signaling in porcine granulosa cells modulated by ovarian factors. Reviewed International journal

He PJ, Fujimoto Y, Yamauchi N, Hattori MA.

Mol Cell Biochem 2006.10

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Gene silencing of myostatin in differentiation of chicken embryonic myoblasts by small interfering RNA. Reviewed International journal

Sato F, Kurokawa M, Yamauchi N, Hattori MA.

Am J Physiol Cell Physiol 2006.9

　More details

Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Progesterone regulation of the expression and function of multidrug resistance type I in porcine granulosa cells. Reviewed International journal

Fukuda H, Arai M, Soh T, Yamauchi N, Hattori MA.

Reprod Toxicol 2006.7

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Development of multidrug resistance type I P-glycoprotein function during in vitro maturation of porcine oocyte. Reviewed International journal

Arai M, Yamauchi N, Fukuda H, Soh T, Hattori MA.

Reprod Toxicol 2006.1

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Differential expression sites of TGF-βisoforms in chicken leg buds during morphogenesis. Reviewed International journal

Aramaki S, Sato F, Soh T, Yamauchi N, Hattori M-A.

Canadian J Zool. 2005;83:620-625. 83 620 - 625 2005.10

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
Temporal and spatial expression of TGF-beta2 in chicken somites during early embryonic development. Reviewed International journal

Aramaki S, Sato F, Soh T, Yamauchi N, Sakai T, Hattori MA.

J Exp Zoolog A Comp Exp Biol 303A ( 5 ) 323 - 330 2005.5

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)

DOI： 10.1002/jez.a.148
Evaluation of RNA interference in developing porcine granulosa cells using fluorescence reporter genes. Reviewed International journal

Hirano T, Yamauchi N, Sato F, Soh T, Hattori MA.

J Reprod Dev 50 ( 5 ) 599 - 603 2004.10

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)

DOI： 10.1262/jrd.50.599
Influence of meiotic inhibition by butyrolactone-I during germinal vesicle stage on the ability of porcine oocytes to be activated by electric stimulation after nuclear maturation. Reviewed International journal

Hirao Y, Nishimoto N, Kure_bayashi S, Takenouchi N, Yamauchi N, Masuda H, Nagai T

Zygote 2003.8

　More details

Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)

Influence of meiotic inhibition by butyrolactone-I during germinal vesicle stage on the ability of porcine oocytes to be activated by electric stimulation after nuclear maturation.
Hirao Y, Nishimoto N, Kure_bayashi S, Takenouchi N, Yamauchi N, Masuda H, Nagai T.
Zygote 11(2003), 191-7.
Functional changes and motility characteristics of Japanese Black bull spermatozoa separated by Percoll. Reviewed International journal

Suzuki K, Geshi M, Yamauchi N, Nagai T

Anim Reprod Sci 2003.7

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)

Functional changes and motility characteristics of Japanese Black bull spermatozoa separated by Percoll.
Suzuki K, Geshi M, Yamauchi N, Nagai T.
Anim Reprod Sci 77(2003), 57-72.
Possible mechanism for acceleration of meiotic progression of bovine follicular oocytes by growth factors in vitro. Reviewed International journal

M Sakaguchi, T Dominko, N Yamauchi, ML Leibfried-Rutledge, T Nagai, N First

Reproduction 2001.9

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)

Possible mechanism for acceleration of meiotic progression of bovine follicular oocytes by growth factors in vitro.
M Sakaguchi, T Dominko, N Yamauchi, ML Leibfried-Rutledge, T Nagai, N First.
Reproduction 123(2002), 135-142.
Nuclear and cytoplasmic maturation in vitro of porcine oocytes. Reviewed International journal

T Nagai, N Yamauchi, K Kikuchi

Journal of Reproduction and Development 2001.4

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)

Nuclear and cytoplasmic maturation in vitro of porcine oocytes.
T Nagai, N Yamauchi, K Kikuchi.
Journal of Reproduction and Development 47 (2001), S55-S62.
Effects of sodium pyruvate in nonserum maturation medium on maturation, fertilization, and subsequent development of bovine oocytes with or without cumulus cells. Reviewed International journal

M Geshi, N Takenouchi, N Yamauchi, T Nagai

Biology of Reproduction 2000.7

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)

Effects of sodium pyruvate in nonserum maturation medium on maturation, fertilization, and subsequent development of bovine oocytes with or without cumulus cells.
M Geshi, N Takenouchi, N Yamauchi, T Nagai
Biology of Reproduction 63(2000), 1730-1734. 2000 Jul
Male pronucleus formation in denuded porine oocytes after in vitro maturation in the presence of cysteamine. Reviewed International journal

N Yamauchi, T Nagai

Biology of Reproduction 1999.4

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)

Male pronucleus formation in denuded porine oocytes after in vitro maturation in the presence of cysteamine.
N Yamauchi, T Nagai.
Biology of Reproduction 61(1999), 823-833.
Cytoplasmic maturation for oocyte activation of porcine follicular oocytes cultured and arrested at Metaphase-I. Reviewed International journal

K Kikuchi, T Nagai, J Ding, N Yamauchi, J Noguchi, Y Izaike

Journal of Reproduction and Fertility 1999.1

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)

Cytoplasmic maturation for oocyte activation of porcine follicular oocytes cultured and arrested at Metaphase-I.
K Kikuchi, T Nagai, J Ding, N Yamauchi, J Noguchi, Y Izaike.
Journal of Reproduction and Fertility 116, 143-156.
Effect of hormones and osmolarity in the culture medium on germinal vesicle breakdown of porcine oocytes. Reviewed International journal

N Yamauchi, H Sasada, E Soloy, T Dominko, K Kikuchi, T Nagai

Theriogenology 1998.11

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)

Effect of hormones and osmolarity in the culture medium on germinal vesicle breakdown of porcine oocytes.
N Yamauchi, H Sasada, E Soloy, T Dominko, K Kikuchi, T Nagai.
Theriogenology 52 (1999), 153-162.
Effect of culture conditions on artifitial activation of porcine oocytes matured in vitro. Reviewed International journal

N Yamauchi, H Sasada, S Sugawara, T Nagai.

Reprod Fertil Dev. 8 1153 - 1156 1996.1

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
In vitro maturation of porcine follicular oocytes using Medium-II.

N Yamauchi, H Sasada, S Sugawara.

Tohoku Journal of Agricultural Research 45 55 - 60 1995.4

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Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)

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Books

繁殖生物学　改訂版

【編纂委員】＠西原真杉、＠眞鍋　昇、＠前多敬一郎、＠内藤邦彦、＠小倉淳郎山内伸彦（第５章生殖各期の生理　２．性周期）（Role：Joint author）

interzoo 2020.6

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Language：Japanese Book type：Scholarly book

Presentations

子宮内膜三次元培養モデルの構築による胚―子宮間相互作用の解明

山内伸彦

第117回日本繁殖生物学会　名古屋大会 2024.9

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Event date： 2024.9

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：名古屋大学　野依記念学術交流館・シンポジオン Country：Japan
ウシ胚伸長に対する子宮内細胞外小胞の影響

池田光陽1，齋藤悠々1，諫早怜士1，Islam MR1，Amir SALAMA1，林武司2，木崎景一郎3，宮本圭1，山内伸彦1

第117回日本繁殖生物学会　名古屋大会 2024.9

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Event date： 2024.9

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：名古屋大学　野依記念学術交流館・シンポジオン Country：Japan
ウシ子宮内細胞外小胞におけるmiRNA内部標準遺伝子の検索

諌早怜士1，齋藤悠々1，ラフィクイスラム1，アミーロサラマ1，林武司2，木崎景一郎3，宮本圭1，山内伸彦1

第117回日本繁殖生物学会　名古屋大会 2024.9

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Event date： 2024.9

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：名古屋大学　野依記念学術交流館・シンポジオン Country：Japan
Development of a three-dimensional culture model of endometrium to study embryo-endometrial interactions Invited International conference

Nobuhiko Yamauchi

15th International Symposium 2024 On Digital Transformation for Sustainable Development 2024.2

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Event date： 2024.2

Language：English Presentation type：Symposium, workshop panel (public)

Venue：Bangabandhu Sheikh Mujibur Rahman Agricultural University Country：Bangladesh

Importance of the in vitro model of tissues or organs is now evident in tissue engineering and cell biology research. Till now, two-dimensional culture systems have been using for in vitro cell culture, and have contributed to cell function studies despite their limitations. Three-dimensional (3D) culture has been utilized in cell biology research because it appears to mimic morphology and physiology of cells in living tissues and organs, unlike conventional monolayer cell culture. We developed 3D culture systems of endometrial cells as a tool for the analysis of uterine endometrial functions. This lecture will introduce different culture system for endometrial cells and the development of an in vitro implantation model using them.
1. Matrigel culture; Matrigel is a solubilized basement membrane extracted derived from EHS mouse sarcoma cells. The bovine endometrial epithelial cells (BEE) cultured in 15% Matrigel formed a circular or elliptical gland-like structure. Gene expressions of glandular epithelial specific factors (SERPINA14 and GRP) were significantly high in the Matrigel, compared to the monolayer cultured cells. Further, SERPINA14 expression was affected by neither P4 nor IFN. However, when BEE in Matrigel were co-culture with bovine endometrial stromal cells (BES), SERPINA14 expression increased significantly in the treatment of both P4 and IFN. These results suggested that BEE cultured in Matrigel show properties similar to the glandular epithelial cells in vivo, and regulated by the factors produced by BES.
2. Spheroid culture; Spheroids are a spherical mass composed of cells and extracellular matrices (ECMs). We have regenerated multicellular spheroids composed of BES and BEE using ascorbate. Expression of MMPs, which are key enzymes for the tissue remodeling of the endometrium, were analyzed using the spheroid. E2, P4 and type-I IFN did not affect the gene expression of MMPs in the spheroid. However, treatment of type-I IFN increased the clearance of MMPs in the supernatant. These results suggest that IFN indirectly regulates endometrial tissue remodeling through clearance of MMPs.
3. In vitro model; In vitro models are necessary to analyze the embryo-endometrial interaction in vitro. We have developed in vitro implantation models using rat and bovine endometrial cells.
a. Rat uterine explants; Cultured rat uterine explants have a structure similar to the spheroid, with the inner stromal cells surrounded by the outermost layer of epithelial cells. Artificial decidualization treatment of the explants increased the expression of the marker genes, Prl8a2 and Bmp2. When the explants were co-cultured with hatched blastocysts, stable attachment was observed for 35.5% after 48 h. Steroid hormone treatment revealed that the rate of attachment of embryo to the explant was significantly increased in P4 treated group (63.6%) and decreased in E2 treated group (0.0%). The results suggested that the cultured rat uterine explants can be a useful in vitro model to study uterine functions and early implantation.
b. Bovine trophoblastic cells (BT); The BT is a cultured trophoblast cell derived from bovine blastocysts and is unique in forming a 3D vesicular structure. We analyzed the function of CCL2 in the bovine implantation process using BT vesicles and BEE. Treatment of CCL2 significantly increased the amount of PCNA and IFNt in BT. Also, CCL2 significantly increased the attachment rate of BT vesicles to BEE in in vitro co-culture system. The expression of OPN and ICAM-1 increased in BEE, and ICAM-1 increased in BT by the CCL2 treatment, respectively. The present results indicate that CCL2 has the possibility to regulate the process of bovine embryo attachment to the endometrium by modulation of binding molecules expression.
時期特異的なウシ子宮内膜miRNAの発現解析

#諌早怜士，#齋藤悠々，#小川紗良，#カニクドラトゥラ，＠山内伸彦

第116回日本繁殖生物学会　神戸大会 2023.9

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Event date： 2023.9

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：神戸大学　農学部学舎 Country：Japan
ウシ子宮内膜組織におけるmiRNAの網羅的解析

#諌早怜士，#齋藤悠々，#竹之内学睦，＠林武司，＠山内伸彦

第115回日本繁殖生物学会　東京大会 2022.9

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Event date： 2022.9

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：東京大学弥生キャンパス Country：Japan

【目的】近年miRNAがエクソソームを介して細胞機能を制御することが注目されており，子宮内膜で発現するmiRNAが胚の伸長や着床過程で重要な役割を担うことが示唆している。しかし，ウシ子宮内膜で発現するmiRNAの種類や発現量などの全体像は明らかにされていない。そこで本研究では，ウシ子宮内膜で発現するmiRNAの着床過程における機能解析を最終目的とし，卵胞期，黄体期および着床期のウシ子宮内膜組織に含まれるmiRNAを網羅的に解析した。【方法】卵胞期，黄体期および着床期のウシ子宮内膜組織からRNAを抽出し，miRNA sequence解析によってそれぞれのステージ間のmiRNA発現を網羅的に解析した。さらにmiRNA sequence解析の結果をもとに，in silico解析により着床過程の制御機構に関与すると考えられるmiRNAの探索および特定を行った。その結果をもとに，miRNAのターゲット遺伝子およびその遺伝子が関与するウシ子宮内膜の制御機能の探索を行った。【結果】各ステージ間における既知miRNAおよび新規miRNAの数は卵胞期で297個および77個，黄体期では317個および81個，着床期では293個および435個確認された。GO機能エンリッチメント解析の結果，それぞれのステージで発現が上昇したmiRNAのターゲット遺伝子の多くは細胞構成成分，中でも細胞質，細胞膜，膜貫通型タンパク質の機能に関与するものであった。また，そのヒストグラム解析ではコラーゲン含有細胞外マトリックスに関与する遺伝子が最も高い値を示した。さらに，黄体期と着床期で変化倍率が1.5倍以上かつ片方のステージで1000リードを越えるmiRNAは合計35個確認された。その内、黄体期で発現が上昇したmiRNAは既知が14個、着床期で上昇したものは既知が19個、新規が2個であった。これらのmiRNAは胚性因子によって制御されている可能性が示唆された。
ウシ栄養膜細胞に対する子宮内エクソソームの影響

#齋藤悠々，#諫早怜士，#竹之内学睦，@林武司，＠木崎景一郎，＠高橋透，＠山内伸彦

第115回日本繁殖生物学会　東京大会 2022.9

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Event date： 2022.9

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：東京大学弥生キャンパス Country：Japan

【目的】ウシ胚は着床前に細長く伸長するとともに妊娠認識物質であるIFNtを産生する。胚伸長期は妊娠の律速段階であり、子宮内膜因子の制御下で促進されることが報告されている。一方、エクソソーム（Exo）がこの過程においてどのような作用を及ぼすかは明らかにされていない。本研究では、子宮内に存在するExoが胚伸長およびIFNtの産生に与える影響を明らかにすることを目的とし、ウシ胚由来の培養栄養膜細胞(BT細胞)を用いてその影響を解析した。【方法】Exoは黄体期(L)および妊娠8日目(P8)のウシ子宮灌流液からアフィニティー法によって単離した。BT細胞は5%FBS添加DMEM/F12培地を基礎培地とし、コラーゲンコート処理ディッシュで培養した。Exoの細胞への取り込みを確認するため、膜染色色素を用いてExoを蛍光標識し、培地へ添加4h後にヘキスト染色を行い、蛍光顕微鏡下で観察した。また、Exo添加によるBT細胞の形態的変化について観察した。さらに、無血清培地へL-ExoまたはP8-Exoを添加し、BT細胞の細胞増殖関連遺伝子(PCNA,CCND1)およびIFNt遺伝子の発現量をqPCRにより測定し、Exo無添加区と比較した。【結果】蛍光顕微鏡下で観察した結果、蛍光標識されたExoが栄養膜細胞に取り込まれていることが確認された。また、Exo無添加区では小胞が消失していたのに対し、Exo添加区では小胞構造が維持されていた。qPCRの結果、Exo無添加区、L-Exo添加区と比較して、P8-Exo添加区においてPCNA,CCND1およびIFNt遺伝子の発現量が有意高い値を示した（P<0.05）。以上の結果から、子宮内に存在するExoの特性は時期特異的に変化し、妊娠初期のExoは胚細胞の遺伝子発現を変化させることが明らかとなった。これらの結果は、妊娠初期の子宮内Exoが着床の成立を促進する可能性を示唆するものである。
ウシ栄養膜細胞のIFNt発現制御因子の検索

#小川紗良，#谷口楓果，#齋藤悠々，#西野大地，＠木崎景一郎，＠高橋透，＠山内伸彦

第115回日本繁殖生物学会　東京大会 2022.9

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Event date： 2022.9

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：東京大学弥生キャンパス Country：Japan

【目的】ウシを含む反芻動物の胚は伸長過程において栄養膜細胞より妊娠認識物質であるインターフェロンタウ(IFNt)を産生する。しかし，その具体的な制御因子は未だ明らかにされていない。反芻動物の妊娠成立におけるIFNtの重要性を考えると，その制御機構の解明は受胎率の向上において大きな意義を有する。本研究では，ウシ胚盤胞期胚由来の栄養膜細胞(BT細胞)を用い，そのIFNt発現に対する子宮内膜産生因子の影響を調べた。【方法】BT細胞の培養には5%ウシ胎子血清含有DMEM/F12を基礎培地として用いた。IFNt発現を制御する因子の候補として子宮内膜で産生されるBetacellulin(BTC)，Heparin-binding EGF-like growth factor(HB-EGF)，Insulin-like growth factor 1 (IGF1)およびC-C Motif chemokine ligand 2(CCL2)の影響を解析した。それぞれの因子の受容体遺伝子の発現をRT-PCRによって，IFNtの遺伝子発現をqPCRによって解析した。また，Western blottingによってIFNtタンパク質の発現を解析した。【結果】RT-PCRの結果，BT細胞においてそれぞれの因子の受容体遺伝子が検出された。qPCRの結果，100ng/mlの濃度でそれぞれの因子を添加したBT細胞におけるIFNt遺伝子の発現は，それぞれ1ng/mlの濃度で添加したBT細胞よりも高くなっていた。Western blottingの結果，BT細胞におけるIFNtタンパク質の発現は，無添加区よりも高かった。本研究の結果，子宮内膜で産生されるBTC，HB-EGF，IGF1およびCCL2を高い濃度でBT細胞に添加するとIFNtの発現が促進されることが示された。
Regulation mechanism of β-catenin in Bovine Endometrium

#Tao Pan、#CHISUN YUN、@Nobuhiko Yamauchi

第1１４回日本繁殖生物学会 2021.9

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Event date： 2021.9

Language：English Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：京都大学（オンライン開催） Country：Japan

[Introduction] The elevation of β-catenin in the endometrium is reported in several mammalian species, including cattle. It has been considered that accumulated β-catenin acts as a transcription factor to regulate endometrial remodeling and implantation. It is generally known that the WNT induces the accumulation of β-catenin, but in some cases, other factors such as IGF1 also have a similar function. Each ligand involves phosphorylation of different proteins in the process of its signal transduction, LRP6 (WNT pathway) or GSK3β (IGF1 pathway), respectively. The present study aimed to clarify the regulation mechanism of β-catenin in the bovine endometrium. [Methods] Bovine endometrial epithelial cells (BEE) were treated without or with LiCl (positive control), WNT agonist AMBMP, and recombinant IGF1, respectively. The levels of β-catenin, phosphorylated LRP6 (pLRP6), and phosphorylated GSK3β (pGSK3β) were measured by western blotting. The potential downstream genes of the β-catenin (SLC2A1, MYC, and CCND1) were analyzed by qPCR. [Results] The treatment of LiCl, AMBMP, and IGF1 increased the levels of β-catenin and downstream genes in BEE. The levels of pLRP6 and pGSK3β in endometrial tissues were significantly high at luteal and implantation stages compared to the follicular stage. [Conclusions] The elevations of pGSK3β and pLRP6 suggested that both WNT and IGF1 pathways might exist in the bovine endometrium. Analysis of downstream genes in BEE showed that its expression pattern could be similar regardless of the ligand and its pathway. Collectively, these results imply that in the bovine endometrium, WNT and IGF1 pathways may contribute together to the regulation of β-catenin.
CCL2 regulates prostaglandin circulation and embryo attachment of the bovine endometrium during implantation

#CHISUN YUN、#Tao Pan、@Nobuhiko Yamauchi

第1１４回日本繁殖生物学会 2021.9

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Event date： 2021.9

Language：English Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：京都大学（オンライン開催） Country：Japan

[Introduction] CCL2 (C-C motif chemokine ligand 2), which is known to recruit immune cells to the sites of inflammation, has been reported to be expressed in the bovine endometrium. We have reported that CCL2 induced proliferation and stimulated the expression of prostaglandin (PG) synthases in cultured endometrial cells. However, the details of how CCL2 involved in the implantation mechanism are still unclear. The purpose of present study is to analyze the functional properties of CCL2 in the bovine endometrium and embryo. [Materials and Methods] Bovine endometrial tissue, epithelial (BEE) and stromal (BES) cells, and bovine blastocyst-derived trophoblastic (BT) cells were used for the analysis. Gene expressions were analyzed by RT-PCR or qPCR. [Results] Since the previous results showed that both expressions of PGESs and PGFSs were high, we focused on the analysis of PG transporter genes (MRP4 and PGT). The amount of MRP4 and PGT were significantly high in CCL2 treated BEE and BES in vitro. The mRNA of chemokine receptors (CCR1, CCR2 and CXCR3) were detected in BT. The amount of PCNA and IFNt were significantly high in BT treated with CCL2. CCL2 significantly increased the attachment rate of BT vesicles to BEE in in vitro co-culture system. The amount of OPN increased in BEE, and ICAM-1 increased both in BEE and BT by CCL2 treatment. These results indicated that CCL2 has the potential to regulate the circulation of PGs in bovine endometrium and embryo growth. In addition, CCL2 has a possibility of regulating the process of bovine embryo attachment to endometrium by modulating expression of binding molecules.
Expression and Function of Chemokines in Bovine Endometrium and Embryos

#CHISUN YUN、#Daichi Nishino、#Shutaro Horaku、@Nobuhiko Yamauchi

第128回日本畜産学会 2021.3

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Event date： 2021.3

Language：English Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：九州大学（オンライン開催） Country：Japan

Chemokines, which mainly regulate immune cells, also involve the cellular remodeling in endometrium of human and rodents during pregnancy. However, the expression and function of chemokines in the bovine uterus remains still unclear. The purpose of this study is to analyze the expression pattern and functional properties of chemokines in the bovine endometrium and embryos. The qPCR analysis of the tissue showed that the amount of CCL2, CCL8 and CXCL10 transcripts were high at the implantation stage. The amount of CCL2 transcripts was significantly high in IFNa treated bovine endometrial stromal (BES) cells in vitro. In bovine endometrial epithelial (BEE) cells, however, the amount of CCL8 and CXCL10 were significantly high in the treatment group, but not for CCL2. The mRNA of each chemokine receptors was detected in the endometrial tissues and embryos by RT-PCR. Cellular proliferation of BEE and BES significantly increased by the CCL2 treatment. These results indicate that the expression of chemokines increased in endometrium during implantation and possible to regulate the proliferation of both endometrium and embryos.
Analysis of WNT/β-catenin pathway in Bovine Endometrial Cells In Vitro

#潘韜、#尹治善、#西野大地、#寶楽修太郎、@山内伸彦

第128回日本畜産学会 2021.3

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Event date： 2021.3

Language：English Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：九州大学（オンライン開催） Country：Japan

It is reported that the WNT/β-catenin pathway is important for endometrial remodeling and embryo implantation. The present study aimed to analyze the WNT/β-catenin pathway in the bovine endometrial cells. Gene expression of potential WNT/β-catenin pathway components in bovine endometrial epithelial cells (BEE) and stromal cells (BES) were analyzed by RT-PCR. Then, BEE was treated with WNT/β-catenin pathway agonist AMBMP in vitro. The β-catenin protein level was measured by western blotting and the amounts of downstream genes were analyzed by qPCR. WNT/β-catenin pathway ligands Wnt2 was detected in both BEE and BES, Wnt3 was not detected in both types of cells, and Wnt7A was only detected in BEE. WNT/β-catenin pathway receptors LRP5, LRP6, FZD1, FZD4, and FZD7 were detected in both cells. The mRNA for the potential WNT7A-specific receptor FZD5 was expressed only in BEE. Treatment of AMBMP significantly increased the amount of β-catenin protein in BEE. In conclusion, it was demonstrated that the BEE process a functional WNT/β-catenin pathway in vitro. The amounts of downstream genes in the WNT/β-catenin pathway are currently being analyzed.
MMP3 mediates E2-induced endometrial cell proliferation by releasing

#Al-Nur Md. Iftekhar Rahman, @Toru Takahashi, @Nobuhiko Yamauchi

第113回日本繁殖生物学会 2020.9

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Event date： 2020.9

Language：English Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：東北大学（Web開催） Country：Japan

【Introduction】Cyclic cell proliferation and endometrial remodeling during the estrous cycle is important to maintain normal endometrial function. It has been reported that endometrial cells are actively proliferating at the follicular stage in cattle. However, the control mechanism of this cell proliferation has not yet been clarified. Recently it has been reported the possibility that protease enzyme matrix metalloproteinase-3 (MMP3) can regulate the cell proliferation. In the present study, the function of MMP3 on the proliferation of endometrial cells was analyzed.【Materials and Methods】Bovine endometrial stroma (BES) and epithelial (BEE) cells were cultured in DMEM/F12 containing 10%FBS. Gene expression was analyzed by qPCR. Protein expression of MMP3 and HB-EGF were analyzed by casein zymography and western bottling, respectively. Cell proliferation was analyzed by automated cell counter.【Results】 MMP3 highly expressed at follicle stage compared to luteal and implantation stage. E2 increased the gene expression and clearance of MMP3 in BES in vitro, but P4 and IFNα decreased the expression. E2 also increased the cell proliferation of BES, but the inhibitor of MMP3 and EGFR inhibited the proliferation induced by E2. Further, E2 increased the HB-EGF release in BES but MMP3 inhibitor suppressed this release. There was no direct effect of E2 on BEE cell proliferation. However, the condition medium of BES treated with E2 increased the BEE proliferation, but was inhibited by EGFR inhibitor. It was shown that E2 induces MMP3 expression and promotes HB-EGF release from BES. These results suggested that MMP3 is involved in the proliferation mechanism of endometrial cells in the follicular stage.
マトリゲル内培養におけるウシ子宮内膜上皮細胞の遺伝子発現解析

#松宮敦史，#高武亜衣，#黒木優美，#西野大地，@山内伸彦

第12回日本日本暖地畜産学会　大分大会 2019.10

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Event date： 2019.10

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：ホルトホール大分 Country：Japan

【目的】子宮腺上皮は反芻動物の胚伸長に必須の因子を産生することが報告されている．本研究では，腺上皮様構造を再構築できるマトリゲル内培養を用いてウシ子宮内膜上皮（BEE）を培養し，腺上皮特異的遺伝子の発現解析を行った．【方法】培養4日目のマトリゲル内培養下のBEEを用いて以下の実験を行った．①単層BEEと比較し、腺上皮特異的遺伝子（SERPINA14、GRP，FOXA2）の発現を解析した。②単層培養間質細胞の上部で①と同様のBEEのマトリゲル内培養を行い，P4 (10-6M)，IFNα（100IU/ml）およびP4＋IFNα処理後にSERPINA14，および妊娠13日目の子宮内膜で発現する分泌性因子であるBTC, PDGHB, MSTN, FGF13の発現を解析した．【結果】①単層培養BEEと比較し，マトリゲル内培養下BEEにおいてFOXA2の発現に変化は認められなかったが，SERPINA14およびGRPの発現は有意に高い値を示した(P<0.05)．②BEEと間質細胞の共培養では，無処理区と比較してP4＋IFNα処理区においてSERPINA14およびFGF13の発現が有意に高い値を示した(P<0.05)．以上の結果より，BEEのマトリゲル内培養では腺上皮特異的遺伝子の発現が高く，間質細胞との共培養により生体における生理作用を反映し得るモデルであることが示された．
ウシ子宮内膜におけるP4の間接的制御とIGF1の役割

#竹之内学睦，#高橋凛，#山口勇人，#寳樂修太郎，@山内伸彦

第12回日本日本暖地畜産学会　大分大会 2019.10

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Event date： 2019.10

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：ホルトホール大分 Country：Japan

【目的】子宮内膜は主に間質細胞（BES）と上皮細胞（BEE）から構成されており，卵巣ステロイドホルモンや胚性因子だけではなく，細胞間同士の相互作用によってもその機能は制御されている．本研究では，P4によるBEE機能の制御機構の解明を目的とし，BESにおけるIGF1の発現とそのBEEに対する影響を解析した．【方法】BESのホモスフェロイドを用いてIGF1の発現に対するP4(1μM)の効果を解析した．ついで，リコンビナントIGF1（rIGF1）を用いてBEEの遺伝子発現に与える影響を解析した．さらに，BESとBEEのヘテロスフェロイドを用いた解析を行った．P4とIGF1阻害剤（AG1024）の共添加を行い，BEEで発現する遺伝子に対する影響を解析した．【結果】P4処理によりホモスフェロイドにおいてIGF1遺伝子の発現が有意に上昇した(P＜0.05)．rIGF1処理によりBEEにおけるBCL2およびSLC2A1の発現が有意に上昇した(P＜0.05)．さらに，ヘテロスフェロイドにおいてP4処理によりSLC2A1の発現が有意に上昇した(P＜0.05)．一方，AG1024とP4の共処理区ではSLC2A1の発現上昇は認められなかった．以上の結果から，P4がBES由来のIGF1を介してBEEにおけるSLC2A1の発現を制御している可能性が示唆された．
Expression and regulation of MMP3 in bovine endometrial cells in vitro

#Al-Nur Md. Iftekhar Rahman, #Hayato Yamaguchi, #Shutaro Horaku, #Daichi Nishino, #Qudratullah Qani, @Toru Takahashi, @Nobuhiko Yamauchi

第126回日本畜産学会 2019.9

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Event date： 2019.9

Language：English Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：岩手大学 Country：Japan

Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3) plays an important role in endometrial remodeling as well as for successful implantation in bovine. There are few information for MMP3 production and its regulation in bovine endometrium till now. Therefore, this study aimed to characterize MMP3 expression in bovine endometrial cells in vitro. Bovine endometrial stroma (BES) and epithelial (BEE) cells were cultured without or with E2, P4 and IFNα (type-I interferon) for gene and zymographic analysis, respectively. The results of qPCR showed that gene expression of MMP3 was significantly high for E2 treated BES cells compared with the other groups. BEE cells had no effects in either of these treatments for MMP3 gene expression. Casein zymography showed that BES cells secrete MMP3 after 48 h of culture, where as BEE did not show any zymographic activity. Furthermore, MMP3 clearance was significantly high when BES was treated with E2. Secretion of MMP3 was significantly decreased when treated with P4 or IFNα. These results indicate that BES release MMP3 and the expression was regulated by E2, P4 and type-I interferon.
ウシ子宮内膜上皮細胞におけるOTRおよびPGRの遺伝子発現

#寳樂修太郎、#山口勇人、#西野大地、@山内伸彦

第126回日本畜産学会 2019.9

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Event date： 2019.9

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：岩手大学 Country：Japan

【目的】黄体の退行は，子宮内膜上皮細胞におけるオキシトシンレセプター（OTR)の急激な発現上昇が引き金となって誘起されると考えられているが，その制御機構はいまだ不明な点が多く残されている．そこで本研究ではOTRとP4レセプター（PGR）の関係に着目し，培養ウシ子宮内膜上皮細胞（BEE）におけるそれぞれの遺伝子発現を解析した．【方法】培地にE2(100nM)，P4(1mM)またはⅠ型IFN（IFNa，100IU/ml）をそれぞれ添加し，BEEのOTRおよびPGRの発現に対する影響をqPCRによって調べた．ついで，P4長期暴露の効果を調べるため，培地にP4(1μM)を添加し6，12および18日培養後のOTRおよびPGRの発現を調べた．【結果および考察】E2添加区では培養24hでOTRおよびPGRの発現が対照区と比較して有意に高い値を示した（P<0.05）．しかし，P4およびⅠ型IFNの影響は認められなかった．P4長期暴露では，培養BEEのOTR発現がP4添加後18日において12日と比較して有意に高い値を示した．また，PGRの発現は12および18日において有意に低い値を示した（P<0.05）．これらの結果は，本BEE培養系においてOTRおよびPGRの発現が生体のステロイドホルモンに対する反応と同様に再現され，P4長期暴露によってその関係に相関がある可能性が示唆された．
Gene expression of IRFs in bovine endometrial epithelial and stromal cells in vitro

#Qudratullah Qani, #Al-Nur Md. Iftekhar Rahman, #Hayato Yamaguchi, #Daichi Nishino, #Shutaro Horaku, @Nobuhiko Yamauchi

第126回日本畜産学会 2019.9

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Event date： 2019.9

Language：English Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：岩手大学 Country：Japan

Interferon regulatory factors (IRFs) have a key role in IFN signaling for ISGs expression in the endometrium of ruminants including bovine. However, bovine endometrial cell types are not characterized for the expression of IRFs. The aim of this study was to characterize bovine endometrial epithelial (BEE) and stromal (BES) cells for the expression of the IRFs in vitro. Both types of cells were cultured without or with E2, P4 and IFNα for 24 h. Gene expression of IRF1, 4, 6 and 9 was analyzed. The result of RT-PCR showed that BEE expressed IRF1 and 6, and BES expressed only IRF1. IRF4 and 9 was not detected in both cell types. However, IRF9 was expressed in both cell types treated with IFNα. RT-qPCR results showed that IFNα significantly increased the expression of IRF9 for BEE, and IRF1 and 9 for BES (P<0.05). There was no difference in the expression of IRF6 in BEE. The present study revealed that IRF expression differs between BEE and BES in vitro. Furthermore, it was shown that IRF1 and 9 are promoted by IFNα, which is type-I IFN as IFNτ. This study provides useful information to elucidate the signaling mechanism of type-I IFN in bovine endometrium.
Analysis of Bovine Endometrial Functions Using Three-dimensional Cultured Cells Invited International conference

Nobuhiko Yamauchi

The 18th International Symposium on Developmental Biology 2018.11

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Event date： 2018.11

Language：English Presentation type：Symposium, workshop panel (public)

Venue：Seoul National University Country：Korea, Republic of

Importance of the in vitro model of tissues or organs is now evident in tissue engineering and cell biology research. Till now, two-dimensional culture systems have been using for in vitro cell culture, and have contributed to cell function studies despite their limitations. Three-dimensional (3D) culture has been utilized in cell biology research because it appears to mimic morphology and physiology of cells in living tissues and organs, unlike conventional monolayer cell culture. In our laboratory, we are developing 3D culture systems of bovine endometrial cells as a tool for the analysis of uterine endometrial functions. Among them, this lecture introduces spheroid culture and Matrigel culture.
1. Spheroid culture; Spheroids are a spherical mass composed of cells and extracellular matrices (ECMs). We have regenerated multicellular spheroids composed of bovine endometrial stromal and epithelial cells using ascorbate (1). Expression of MMPs, which are key enzymes for the tissue remodeling of the endometrium, were analyzed using the spheroid. E2, P4 and type-I IFN did not affect the gene expression of MMPs in the spheroid. However, treatment of type-I IFN increased the clearance of MMPs in the supernatant. These results suggest that IFN indirectly regulates endometrial tissue remodeling through clearance of MMPs.
2. Matrigel culture; It is reported that cells form lumens automatically by culturing cells in Matrigel (2). Matrigel is a solubilized basement membrane extracted derived from EHS mouse sarcoma cells. The bovine endometrial epithelial cells cultured in 15% Matrigel formed a circular or elliptical gland-like structure. Gene expressions of glandular epithelial specific factors (FOXA2, SERPINA14 and GRP) were significantly high in the Matrigel, compared to the monolayer cultured cells, except FOXA2. Further, SERPINA14 expression was affected by neither P4 nor IFN. However, when epithelial cells in Matrigel were co-culture with stromal cells, SERPINA14 expression increased significantly in the treatment of both P4 and IFN. These results suggest that bovine endometrial epithelial cells cultured in Matrigel show properties similar to the glandular epithelial cells in vivo, and regulated by the factors produced by the stromal cells.
Finally, by using these 3D culture systems, it becomes possible to clarify not only factors regulating embryo elongation and implantation but also regulation of their expression. It will be able to reveal the mechanism of the embryo elongation and implantation to contribute to the improvement of the embryo transplantation technique.
ウシ胚の伸長に関わる子宮内膜産生因子の遺伝子探索

#西野大地，#深田簡子，#高橋凛，#政家裕典，@山内伸彦

第11回日本日本暖地畜産学会　長崎大会 2018.10

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Event date： 2018.10

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：長崎ウエスレヤン大学　ウエスレー館 Country：Japan

【目的】ウシ胚は透明帯脱出後に細長い紐状へと伸長し，その後着床に至る．胚の伸長期はウシの妊娠成立における最も大きな律速段階であることが報告されている（Diskin et al., 2008）．しかし，そのメカニズムおよび関連因子は依然明らかにされていない．本研究では，ウシ胚の伸長を促進し得る子宮内膜産生因子の探索を目的とした．
【方法】妊娠13日目のウシ子宮内膜におけるRNAseq解析の結果から，発現遺伝子において細胞外に分泌され機能的に作用するサイトカインをGO解析によって特定した．ついで，伸長期胚の発現遺伝子を解析し，特定したサイトカインの受容体の発現について検索した．子宮内膜で発現し，かつ伸長期胚でその受容体が発現している遺伝子に関して，培養系を用いてウシ子宮内膜上皮細胞における遺伝子発現をRT-PCRにより解析した．
【結果】RNAseq解析の結果より，妊娠13日目のウシ子宮内膜組織では56個のサイトカイン遺伝子が発現していた．そのうち胚にその受容体遺伝子が発現し，子宮内膜に特異的に発現していたものは7遺伝子であった．さらに，培養上皮細胞で発現が確認されたのは，BTC，MSTN，TGFB2およびPDGFBの4遺伝子であった．56遺伝子のうち，未だ受容体が明らかにされていない因子も存在し、そのうち子宮内膜に特異的に発現していた遺伝子はIGFBP5，MIAおよびOGNの3遺伝子であった．本研究において，遺伝子の網羅的な解析により伸長期胚に作用し得る遺伝子を特定した．
着床期ウシ子宮内膜におけるGALNSの発現解析

#山口勇人、#藤原泰佑、@山内伸彦

第111回日本繁殖生物学会 2018.9

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Event date： 2018.9

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：信州大学　上田キャンパス Country：Japan

【目的】妊娠初期のウシ子宮内膜の組織改変は着床や胎盤形成に必須な過程である。組織改変は細胞外マトリックス(ECM)の分解および再編成に基づいており、ECM分解酵素であるMMP(Matrix Metallopoteinase)が中心的に機能する事が報告されている。我々は、着床期の組織改変が伸長期胚から分泌されるインターフェロンタウ(IFNτ)の制御下にある可能性を報告している。既報では、I型IFNがウシ子宮内膜組織中に貯蓄されているMMPの放出を誘導することを報告した。また、MMPがグリコサミノグリカン鎖(GAG鎖)に結合して貯蓄されていると想定してGAG分解酵素の発現を解析し、スルファターゼであるN-アセチルガラクトサミン-6-スルファターゼ(GALNS)遺伝子の発現が着床期で上昇することを示した。これらの結果は、GALNSを介してIFNτがMMPの放出を制御している事を示唆するものである。本研究ではGALNSのタンパクレベルでの発現動態を明らかにすることを目的とした。【方法】黄体期および着床期のウシ子宮内膜におけるGALNSの局在を免疫組織化学的に検索し、ウェスタンブロット法により発現量を解析した。また、単層培養のウシ子宮内膜上皮細胞(BEE)と間質細胞(BES)を、IFNαで処理し、GALNSの発現量に対する影響を調べた。【結果及び考察】免疫組織化学的検索の結果、黄体期および着床期でGALNSの発現が認められ、BEEとBESにGALNSが局在していた。一方、タンパクの発現は黄体期と比較して着床期において有意に高い値を示した(P<0.05)。培養細胞を用いた解析結果から、BEEでは無添加区とIFNα添加区の間に発現量の変化は認められなかったが、BESではIFNα添加区でGALNSの発現が有意に上昇した(P<0.05)。このことから、BESにおいてGALNSはI型IFNにより発現が促進され、着床期に発現が上昇することがタンパクレベルで明らかとなった。
マトリゲルを用いたウシ子宮腺生体外モデルの構築

#黒木優美、#高武亜衣、#髙橋凛、@山内伸彦

第111回日本繁殖生物学会 2018.9

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Event date： 2018.9

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：信州大学　上田キャンパス Country：Japan

【背景と目的】反芻動物の伸長期胚の成長と生存には腺上皮産生因子が不可欠である事が示唆されているが、その具体的な機能や発現制御機構は未解明である。一方で、子宮腺機能を生体外で再現できる培養系は未だ確立されていない。そこで本研究では、腺上皮様構造を再構築できるマトリゲル内培養を用いてウシ子宮内膜上皮(BEE)の培養系を確立し、子宮腺産生因子の解析を行った。【方法】培養4日目のマトリゲル内培養下のBEEを用いて以下の実験を行った。①単層BEEと比較し、子宮腺特異的因子（SERPINA14、GRPおよびFOXA2）の遺伝子発現を解析した。②P4 (10-6M)、IFNα（100IU/ml）およびP4＋IFNα処理を行い、SERPINA14の遺伝子発現を解析した。③子宮内膜の機能発現には間質細胞とBEEの相互作用が重要であると報告されていることから、単層間質細胞の上に①と同様のBEEのマトリゲル内培養を行い、P4、IFNα及びP4＋IFNα処理後にSERPINA14の遺伝子発現を解析した。【結果】①単層培養BEEと比較し、マトリゲル内培養下BEEにおいてSERPINA14及びGRPの遺伝子発現が有意に高い値を示した(P<0.05)。②全ての処理区において、マトリゲル三次元培養下BEEのSERPINA14遺伝子の発現に変化は認められなかった。③BEEと間質細胞の共培養では、無処理区と比較してP4＋IFNα処理区においてSERPINA14遺伝子の発現が有意に上昇した(P<0.05)。以上の結果より、マトリゲル内培養下のBEEは腺上皮特異的因子の発現が高く、間質細胞との共培養により生体での生理作用を反映し得るモデルであることが示された。よって、BEEのマトリゲル内共培養は子宮腺の生体外モデルとして有用であることが示唆された。
小型野生ネコの保全を目的としたネコの尿および糞由来細胞の採取とその特性

#佐藤耀介， #野澤大志， @宗知紀、@山内伸彦

第2回野生動物保全繁殖研究大会 2018.7

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Event date： 2018.7

Language：Japanese Presentation type：Symposium, workshop panel (public)

Venue：福岡朝日ビル Country：Japan

小型野生ネコは希少種が多く、日本固有種であるツシマヤマネコ（Prionailurus bengalensis euptilurus）やイリオモテヤマネコ（Prionailurus bengalensis iriomotensis）も絶滅危惧種に指定されている。これらの種の保護・繁殖の取り組みは重要であるが、飼育下繁殖は難航しているのが現状である。そこで新たな人工繁殖の方法として体細胞クローン技術が期待されるが、絶滅危惧種においてはドナー細胞採取が非侵襲的に行われる必要がある。非侵襲的に採取したドナー細胞を用いた体細胞クローン動物の作出例として、尿由来細胞（Urine-derived cell、以下UDC）による体細胞クローンスイギュウ（Bubalus bubali）およびマウス（Mus musculus）の作出が報告されている。本研究では、UDCに加えて糞由来細胞（Fecal-derived cell、以下FDC）をドナー細胞の候補とし、近縁種のイエネコ（Felis catus）を用いてその基本的な特性を明らかにすることを目的とした。
福岡市動物愛護管理センターにてイエネコの去勢・避妊手術の際に尿および糞を採取した。生細胞数はトリパンブルー染色により計測した。尿サンプルは運搬時の温度を4℃または37℃に設定し、運搬後の生存率を調べた。UDCは採取した尿を遠心分離して回収した。FDCについては、糞の凍結切片を作製してHE染色を行い、まず糞中に細胞が含まれている事を確認した。さらに、糞をPBS/PVA中で静かに攪拌した後、遠心分離を行い上清を除去した。沈殿からDNAを抽出し、イエネコDNAの特異的配列に対するプライマーを用いてPCRを行った。
ネコ尿中に移行上皮細胞と扁平上皮細胞が確認でき、生細胞数の尿中平均濃度は移行上皮細胞が約337.8cells/ml、扁平上皮細胞が約6252.1cells/mlであった。輸送の温度条件は4℃における生存率が43.2％であったのに対し、37℃では66.1％であり、37℃の輸送における生存率が有意に高かった（p<0.05）。HE染色の結果、糞表面に細胞が存在することが確認された。また、糞由来のDNAにおけるPCRによってイエネコ特異的な配列が検出されたことから、本採取法で糞からFDCを採取出来る事が示唆された。さらに、トリパンブルー染色によって、遠心後の沈殿からFDCの生細胞が存在することが確認され、糞１gあたりから採取できる生細胞数は平均約329.4個であった。
これらの結果から、ネコの尿および糞から生細胞を採取できることが示された。今後は密度勾配遠心分離による生細胞の分離法を検討する。また、実際にイエネコ卵子を用いて体細胞核移植を行い、これらの細胞がクローン作製のドナー細胞として使用できる可能性を検証する。
ウシ子宮内膜上皮細胞の機能に対するIGF-1の効果

#西野要、#高橋凛、#政家裕典、#山内伸彦

第124回日本畜産学会 2018.3

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Event date： 2018.3

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：東京大学 Country：Japan

【【目的】我々は第122・123回日本畜産学会において、P4がウシ子宮内膜間質細胞のIGF-1遺伝子発現を促進し、さらにIGF-1がβカテニン（CTNNB）の発現を増加させる事を報告した。しかしながら、IGF-1の上皮細胞に対する効果は未だ不明な点が多く残されている。本研究では、ウシ子宮内膜上皮細胞（BEE）の機能に対するIGF-1の効果を明らかにすることを目的に、増殖活性および黄体期特異的遺伝子の発現に対する効果を調べた。
【方法】IGF-1は100ng/mlの濃度で添加した。細胞増殖活性は培養3日後の細胞数を測定し対照区と比較した。また、CTNNBの発現とその上流因子であるGSK3βのリン酸化状態をウエスタンブロッティングにて調べた。さらに、黄体期で特異的に発現する遺伝子であるALDOA、TXN、SLC2A1およびBCL2の発現に対する効果をRT-qPCRによって調べた。
【結果】BEEの増殖活性はIGF-1添加により有意に増加した。また、CTNNBの発現が有意に増加するとともに、GSK3βのリン酸化も促進された。さらに、SLC2A1およびBCL2の発現を促進した。これらの結果はIGF-1がBEEのCTNNB発現を増加させるだけでなく、増殖活性および黄体期特異的遺伝子の発現を制御している可能性を示唆するものである。
胚性分泌因子 MIF による着床期ウシ子宮内膜の遺伝子発現制御

#政家裕典、#西野要、#高橋凛、#高橋秀之、#山内伸彦

第124回日本畜産学会 2018.3

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Event date： 2018.3

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：東京大学 Country：Japan

【目的】反芻動物の妊娠成立にはIFNtが妊娠認識物質として大きな役割を担っていることが報告されている。一方で、IFNtとは異なる他の胚性分泌因子が遺伝子機能を制御する可能性が示唆されている。本研究では、ウシ伸長期胚が産生する因子の同定とその受容体および下流因子の遺伝子発現制御について解析を行った。【方法】ウシ伸長期胚培養上清のLC-MS/MS解析および着床期子宮内膜発現遺伝子のRNA-Seq解析の結果から、IFNt以外の胚性分泌因子としてマクロファージ遊走阻止因子(MIF)に着目した。まず、MIF受容体の遺伝子発現と、その発現に対するI型IFNの効果を解析した。次に、MIFの下流因子として推定された遺伝子(ARG1、CCL2、IL7、IL23A)の発現に対するIFNおよびMIFの効果を解析した。【結論】MIF受容体は胚では発現していなかったが、子宮内膜上皮細胞(BEE)、単核球(PBMC)および多形核白血球(PMN)における発現が認められた。また、BEEおよびPMNにおいてIFNによりMIF受容体の遺伝子発現が上昇し(P＜0.05)、下流因子のCCL2はIFN+MIFにより遺伝子発現が上昇した(P＜0.05)。本研究において新たな胚性分泌因子としてMIFを特定した。また、MIF単独では遺伝子発現に対する効果が認められなかったことから、IFNtとの共作用により着床期に重要な機能を持つことが示唆された。
Regulation of MMPs via type I interferon in the bovine endometrium during implantation stage International conference

#Taisuke Fujihara, #Seiya Yamashita, #Kaname Nishino, #Md. Rashedul Islam, #Nobuhiko Yamauchi

4th World Congress of Reproductive Biology 2017.9

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Event date： 2017.9

Language：English Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：Okinawa Convention Center, Okinawa, Japan Country：Japan

Introduction
Evidence suggests that matrix metalloproteinases (MMPs) play important role in bovine endometrium tissue remodeling. Previous studies in our laboratory reported that type I interferon (IFN) encourages the release of accumulated MMPs in the endometrium. However, the detail of its regulatory mechanism is still unknown. Recent findings revealed that MMPs bind to glycosaminoglycan (GAG) and accumulate in tissues. Therefore, in our study we focused on GAG degrading enzymes whose expression is fostered in the endometrium by type I IFN.
Materials and Methods
GAG degrading enzymes with significantly higher gene expression at implantation stage were analyzed using RNA-sequence data obtained from bovine endometrium. The effect of GAG degrading enzymes (heparitinase and hyalronidase) on release of MMPs was analyzed by zymography. Further, gene expression in stromal cells, epithelial cells and hetero spheroids was analyzed by real time quantitative polymerase chain reaction.
Results and Discussion

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We found that galactosamine (N-acetyl)-6-sulfatase (GALNS) gene significantly increased at implantation stage. Likewise IFN alpha, both the GAG degrading enzymes upheld the MMPs release from the hetero spheroids. IFN alphaα promoted the GALNS gene expression in hetero spheroids and stromal cells. These results suggest that MMPs binds to GAGs and accumulated in tissues are released by GALNS whose expression is induced by type I IFN and resulted in tissue remodeling of the bovine endometrium during implantation stage.
ネコ卵子の体外成熟および単為発生に及ぼす要因の検索

#野澤大志,#佐藤耀介,#宗知紀,#山内伸彦

第123回日本畜産学会 2017.9

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Event date： 2017.9

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：信州大学伊那キャンパス Country：Japan

イエネコ卵子は実験動物や家畜の卵子に比べて基礎的な生理学的特性に関する情報が非常に少ない。またネコ卵巣のドナーは年齢や生育環境が様々であり、卵巣ドナーとなるネコを選択することは難しい。そこで本研究では、ネコ卵子についての基礎的な情報を得る事を目的に、様々な要因が卵子の成熟培養に及ぼす影響、およびその後の単為発生の条件検討を行った。　避妊手術の際に得られた卵巣を4℃または35℃で保存し実験室まで輸送した。卵巣切開法によって卵丘卵子複合体を採取し成熟培地中で24時間培養(38℃, 5%CO2)した。培養後卵丘細胞を除去し、第二減数分裂中期に達した卵子に電気刺激による単為発生処理を行い、電圧の強さと刺激回数が分割率に及ぼす影響について検証した。　ネコ卵巣輸送時の温度は、4℃の冷却条件における卵子の成熟率が有意に高い値を示した(48.5% vs 18.5%)。ネコは5ヵ月頃から性成熟を開始するため、4ヵ月齢以下の未成熟ネコと5か月齢以上の成熟ネコ、それぞれの卵巣由来卵子の成熟率を比較したところ、成熟ネコ由来卵子の成熟率が有意に高い値を示した(68.2% vs 13.5%)。単為発生処理では、200V×1回および50V×3回の条件で電気刺激を行う事で約70%の分割率が得られた。以上の結果はネコ卵子の基本的な生理的特性を明らかにするものであり、ネコクローン胚の効率的な作製に寄与するものである。
マトリゲル内培養におけるウシ子宮内膜上皮細胞の子宮セルピン発現

#高武亜衣,@諌山慧士朗,#山内伸彦

第123回日本畜産学会 2017.9

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Event date： 2017.9

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：信州大学伊那キャンパス Country：Japan

【目的】伸長期胚の成長と生存には腺上皮細胞が産生する子宮セルピン（SERPINA14）の発現が重要である事が示唆されている。しかし、その発現制御機構や具体的な機能は未だ不明な点が多く残されている。本研究では、腺上皮様構造を再構築できるマトリゲル内培養を用いてウシ子宮内膜上皮（BEE）の培養系を確立し、SERPINA14の発現制御機構の解明を目的とする。【方法】ウシ子宮内膜のRNASeq解析よりSERPINA14の発現は着床期において有意に高い値を示した。この結果から、SERPINA14の発現はプロジェステロン(P4)およびインターフェロン・タウ(IFNτ)の制御下にあることが想定された。よって、培養5日目のゲル内培養下BEEにP4 (10-6M)24ｈ処理、およびIFNα（100IU/ml）6ｈ処理を行い、SERPINA14の遺伝子発現をreal time-qPCRにて解析した。【結果】ウシ小丘間組織におけるreal time-qPCR解析結果より、SERPINA14は黄体期と比較し着床期で有意に高い値を示した(P= 0.0008)。マトリゲル内培養の全ての実験区においてBEEは楕円形の腺様構造を形成した。しかし、SERPINA14遺伝子の発現はP4処理(P=0.91)およびIFNα処理（P=0.53）において対照区と比較し有意な差は認められなかった。子宮内膜の機能発現には間質細胞とBEEの相互作用が重要であると報告されていることから、BEEは間質細胞との共培養を行う必要が示唆された。
ウシ子宮内膜におけるβカテニンの局在と制御機構の解明

#西野要,#政家裕典,#高橋凛,#山内伸彦

第123回日本畜産学会 2017.9

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Event date： 2017.9

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：信州大学伊那キャンパス Country：Japan

【目的】βカテニン（CTNNB）は細胞間接着と遺伝子の転写活性に関与する細胞内タンパク質であり、子宮機能において重要な役割を担うと考えられている。しかし、ウシ子宮内膜における時期特異的な局在、およびその機能を制御する上流因子については未だ明らかでない。本研究では、ウシ子宮内膜におけるCTNNBの局在と制御機構を解明することを目的とした。【方法】卵胞期、黄体期および着床期の子宮小丘の凍結切片を作成し、CTNNBの局在を免疫組織化学的手法により解析した。また、間質細胞で制御因子が産生されると想定し、培養ウシ子宮内膜間質細胞におけるCTNNBの上流因子候補（IGF1、WNT2、FZD1およびLRP6）の遺伝子発現をRT-qPCRにより解析した。さらにリコンビナントIGF1をウシ子宮内膜上皮細胞に添加し、CTNNBのタンパク質量と細胞内局在をウェスタンブロッティングと免疫染色を用いてそれぞれ解析した。【結果】CTNNBは卵胞期では細胞膜および細胞質に局在していたが、黄体期と着床期では核内にも局在していた。この結果から、黄体期および着床期においてCTNNBが転写活性に関与する可能性が示唆された。また、上流因子の遺伝子発現解析では、P4添加によりIGF1遺伝子の発現のみが有意に上昇した（P＜0.05）。リコンビナントIGF1を用いた解析結果も併せて報告する。
Separation and Characterization of Bovine Placental Mesenchymal Cells In Vitro International conference

Nobuhiko Yamauchi, Kouichi Ushizawa, Toshihiro Konno, Chandana B Herath, Kazuyoshi Hashizume

Society for the Study of Reproduction, 36th Annual Meeting 2003.6

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Venue：Cincinnati, Ohio Country：United States
ラット子宮内膜由来細胞の分離と特性

蒲生徹・西村享平・小島リンコン幹児・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

第97回日本繁殖生物学会 2004.9

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：静岡 Country：Japan
ラット子宮内膜間質細胞に対するTumor Necrosis Factor-αの影響

蒲生徹・西村享平・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

第104回日本畜産学会 2005.3

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：東京大学農学部 Country：Japan
ラット子宮における一酸化窒素合成酵素の発現

西村享平・蒲生徹・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

第104回日本畜産学会 2005.3

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：東京大学農学部 Country：Japan
Changes of Nitric Oxide Synthases Expression In Rat Uterus Correlated With Estrous Cycle And Pregnancy International conference

Kyohei Nishimura, Toru Gamo, Tomoki Soh, Nobuhiko Yamauchi, Masa-aki Hattori

Society for the Study of Reproduction, 38th Annual Meeting 2005.7

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Venue：Quebec Country：Canada
Characterization of Rat Endometrial Stromal Cells Cultured In Vitro International conference

Toru Gamo, Kyohei Nishimura, Tomoki Soh, Nobuhiko Yamauchi, Masa-aki Hattori

Society for the Study of Reproduction, 38th Annual Meeting 2005.7

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Venue：Quebec Country：Canada
ブタ卵丘−卵子複合体における一酸化窒素合成酵素の発現と一酸化窒素産生

柴田典子・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

第98回日本繁殖生物学会 2005.9

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：静岡 Country：Japan
海洋性フィブリゲルを用いたラット子宮内膜細胞の三次元構築

西村享平・大薗慎二・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

第106回日本畜産学会 2006.3

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：九州大学六本松キャンパス Country：Japan
ラット子宮における着床期セリンプロテアーゼの発現

大薗慎二・浦田博揮・西村享平・佐藤文規・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

第106回日本畜産学会 2006.3

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：九州大学六本松キャンパス Country：Japan
Spheroidal Bovine Blastocyst-derived Trophoblast Cell Stimulates Blastocyst Development and Estrous Cycle in Bovine International conference

Kazuhiro Hashizume, Keiichiro Kizaki, Nobuhiko Yamauchi, Kei Imai, Kouichi Ushizawa, Toru Takahashi

Society for the Study of Reproduction, 39th Annual Meeting 2006.7

　More details

Venue：Omaha, Nebraska Country：United States
The expression of implantation serine protease in the rat uterus International conference

Shinji Ozono, Hiroki Urata, Kyouhei Nishimura, Pei-Jian He, Fuminori Sato, Tomoki Soh, Nobuhiko Yamauchi and Masa-aki Hattori

The XIIth AAAP Animal Science Congress 2006 2006.9

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Venue：Busan Country：Korea, Republic of
Development of spheroidal model using aterocollagen for the analysis of rat endometrial functions International conference

K Nishimura, S Ozono, H Urata, T Soh, N Yamauchi and M-A Hattori

The XIIth AAAP Animal Science Congress 2006 2006.9

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Venue：Busan Country：Korea, Republic of
生体外におけるラット子宮内膜スフェロイドの脱落膜化

西村享平、大園慎二、宗知紀、山内伸彦、服部眞彰

第99回日本繁殖生物学会 2006.9

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：名古屋大学 Country：Japan
胎盤および胎子における着床期セリンプロテアーゼの発現

大薗慎二・浦田博揮・西村享平・佐藤文規・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

第99回日本繁殖生物学会 2006.9

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：名古屋大学 Country：Japan
生体外におけるラット子宮間質細胞の脱落膜化誘導

松本健二、西村享平、大園慎二、宗知紀、山内伸彦、服部眞彰

第57回西日本畜産学会 2006.10

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：九州東海大学・熊本校舎本館 Country：Japan
ラット子宮内膜間質細胞のMMP産生に対するインターロイキン-11の影響

渡辺諒、松本健二、西村享平、大園慎二、宗知紀、山内伸彦、服部眞彰

第57回西日本畜産学会 2006.10

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：九州東海大学・熊本校舎本館 Country：Japan
Development of rat endometrial spheroid as a model for the analysis of endometrial functions International conference

Kyohei Nishimura, Shinji Oozono, Hiroki Urata, Peijian He, Tomoki Soh, and Nobuhiko Yamauchi Masa-aki Hattori

International Embryo Transfer Society 33ed Annual Conference 2007.1

　More details

Venue：Kyoto Country：Japan
生体外におけるラット子宮内膜間質細胞の脱落膜化

松本健二・西村享平・大薗慎二・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

第107回日本畜産学会 2007.3

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：麻布大学 Country：Japan
ラット子宮内膜スフェロイドを用いた生体外着床モデルの構築

山内伸彦、渡辺諒、西村享平、松本健二、大薗慎二、久保田海雄、宗知紀、、服部眞彰

第25回日本受精着床学会 2007.8

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：仙台国際センター Country：Japan
妊娠初期ラット子宮における形態形成因子Hedgehogの発現

久保田海雄・大薗慎二・松本健二・渡辺諒・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

第100回日本繁殖生物学会 2007.10

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：東京大学 Country：Japan
妊娠ラット子宮における着床期セリンプロテアーゼ発現の局在

大薗慎二・久保田海雄・松本健二・渡辺諒・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

第100回日本繁殖生物学会 2007.10

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：東京大学 Country：Japan
着床期ラット子宮におけるMMPの発現動態

渡辺諒・松本健二・大薗慎二・久保田海雄・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

第100回日本繁殖生物学会 2007.10

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：東京大学 Country：Japan
Expression of three Hedgehog genes in rat uterus during early pregnancy International conference

Kaiyu Kubota, Shinji Ozono, Kenji Matsumoto, Ryo Watanabe, Tomoki Soh, Nobuhiko Yamauchi, Masa-aki Hattori

World Congress on Reproductive Biology 2008.5

　More details

Venue：Hawaii Country：United States
In Vitro Decidualization of Rat Endometrial Stromal Cells International conference

Kenji Matsumoto, Ryo Watanabe, Shinji Oozono, Kaiyu Kubota, Kyouhei Nishimura, Tomoki Soh, Nobuhiko Yamauchi, Masa-aki Hattori

World Congress on Reproductive Biology 2008.5

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Venue：Hawaii Country：United States
Expression of Matrix Metalloproteinases in Rat Uterus During Implantation Phase International conference

Ryo Watanabe, Kenji Matsumoto, Shinji Oozono, Kaiyu Kubota, Kyouhei Nishimura, Tomoki Soh, Nobuhiko Yamauchi, Masa-aki Hattori

World Congress on Reproductive Biology 2008.5

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Venue：Hawaii Country：United States
ラット子宮内膜スフェロイドと受精胚の相互作用

渡辺諒・西村享平・松本健二・久保田海雄・山上一樹・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

第101回日本繁殖生物学会 2008.9

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：九州大学 Country：Japan
着床期においてラット受精胚に応答する子宮内膜因子の検索

松本健二・渡辺諒・久保田海雄・山上一樹・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

第101回日本繁殖生物学会 2008.9

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：九州大学 Country：Japan
妊娠初期ラット子宮におけるIndian hedgehogによる子宮内膜間質細胞の制御

久保田海雄・松本健二・渡辺諒・山上一樹・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

第101回日本繁殖生物学会 2008.9

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：九州大学 Country：Japan
ラット子宮内膜上皮細胞の培養とその特性

山上一樹、松本健二、渡辺諒、久保田海雄、宗知紀、山内伸彦、服部眞彰

第59回西日本畜産学会 2008.10

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：佐賀大学 Country：Japan
妊娠初期ラット子宮におけるIndian hedgehogによる子宮内膜の制御

久保田海雄、松本健二、渡辺諒、山上一樹、宗知紀、山内伸彦、高橋昌志、服部眞彰

第110回日本畜産学会 2009.3

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：日本大学生物資源科学部（神奈川県藤沢市） Country：Japan
ラット子宮におけるIndian hedgehogの発現制御機構

久保田海雄，山上一樹，山中賢一，高橋昌志，宗知己，山内伸彦，服部眞彰

第102回日本繁殖生物学会 2009.9

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：近畿大学（奈良） Country：Japan
着床期ラット子宮におけるFoxa2の発現

山上一樹，久保田海雄，宗知紀，山内伸彦，服部眞彰

第102回日本繁殖生物学会 2009.9

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：近畿大学（奈良） Country：Japan
Steroidal regulation of Indian hedgehog gene expression in the rat uterus during the implantation period International conference

Kaiyu Kubota, Nobuhiko Yamauchi, Kazuki Yamagami, Takafumi Gohbaru, Ken-ichi Yamanaka, Masashi Takahashi, Tomoki Soh, Masa-aki Hattori

6th Annual Conference of Asian Reproductive Biotechnology Society 2009.11

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：Borei Angkor Hotel, Siem Reap City Country：Cambodia
ウシ子宮内膜におけるインディアンヘッジホッグ遺伝子の発現

久保田　海雄・合原　崇文・西村　翔・宗　知己・山中賢一・木崎　景一郎・山内　伸彦・高橋　昌志・橋爪　一善・服部　眞彰

第112回日本畜産学会 2010.3

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：明治大学駿河台キャンパス Country：Japan
ウシ子宮内膜由来細胞におけるI型IFN受容体遺伝子の発現

西村　翔・諌山　慧士郎・久保田　海雄・山中　賢一・高橋　ひとみ・宗　知紀・木崎　景一郎・山内　伸彦・高橋　昌志・橋爪　一善・服部　眞彰

第112回日本畜産学会 2010.3

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：明治大学駿河台キャンパス Country：Japan
ラット子宮におけるFoxa2の時期特異的な発現および局在

山上一樹、合原崇文、西村翔、久保田海雄、宗知紀、山内伸彦、服部眞彰

第103回日本繁殖生物学会 2010.9

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：北里大学（十和田） Country：Japan
Development of the Endometrial Spheroids as a Model for Implantation In Vitro Invited International conference

Nobuhiko Yamauchi, Kazuyoshi Hashizume, Masa-aki Hattori

International Meeting for Evolution of Reproductive Biology and Task of Frontiers 2011.9

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：AIINA hall, Morioka Country：Japan
ウシ子宮内膜スフェロイドを用いた生体外着床モデルの構築

西村翔，中村暢寿，諌山慧士朗，山内伸彦，服部眞彰

第104回日本繁殖生物学会 2011.9

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：アイーナホール（盛岡） Country：Japan
ウシ子宮内膜におけるIndian Hedgehog の発現

中村暢寿，諌山慧士朗，合原崇文，山内啓介，田崎広天，山内伸彦，服部眞彰

第４回日本暖地畜産学会 2011.10

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：沖縄産業支援センター（那覇） Country：Japan
ウシ子宮内膜におけるIndian Hedgehogの発現とその制御

中村暢久・諌山慧士朗・山内啓介・山内伸彦・服部眞彰

第115回日本畜産学会 2012.3

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：名古屋大学東山キャンパス Country：Japan
マイクロスフェアアレイを用いたウシ子宮内膜スフェロイドの構築とその特性

山内啓介, 中村暢寿, 山下聖世, 田村朋子, 八尋寛司, 山内伸彦, 服部眞彰

第105回日本繁殖生物学会 2012.9

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Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：筑波大学　大学会館（つくば） Country：Japan
Expression and Regulation of Indian Hedgehog in the Bovine Endometrium International conference

N. Nakamura, K. Isayama, K. Yamauchi, S. Yamashita, K. Yamagami, K. Kubota, 山内伸彦, 服部眞彰

The 15th AAAP Animal Science Congress 2012.11

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Language：English

Venue：Thammasart University (Rangsit Campus), Bangkok Country：Thailand
Expression and Regulation of Foxa2 in the Rat Uterus International conference

K. Yamagami, N. Nakamura, K. Yamauchi, S. Yamashita, K. Kubota, 山内伸彦, 服部眞彰

The 15th AAAP Animal Science Congress 2012.11

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Language：English

Venue：Thammasart University (Rangsit Campus), Bangkok Country：Thailand
ウシ子宮内膜におけるFoxa2の局在と発現動態

細迫　岳人, 山上　一樹, 中村　暢久, 山内　啓介, 山下　聖世, 山内伸彦, 服部眞彰

第116回日本畜産学会 2013.3

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：安田女子大学キャンパス（広島市） Country：Japan
ウシ子宮内膜組織片の培養とその特性

山内啓介, 山上一樹, 山下聖世, 田中綾, 山内伸彦, 服部眞彰

第117回日本畜産学会 2013.9

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Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：新潟大学五十嵐キャンパス（新潟市） Country：Japan
ウシ子宮内膜ヘテロスフェロイドを用いたMMPの発現解析

山下聖世, 山内　啓介, 山上　一樹, 藤江周一朗, 山内伸彦, 服部眞彰

第117回日本畜産学会 2013.9

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Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：新潟大学五十嵐キャンパス（新潟市） Country：Japan
着床期ラット子宮内膜の遺伝子発現における胚の影響

山上一樹, 山内啓介, 山下聖世, 山内伸彦, 服部眞彰

第106回日本繁殖生物学会 2013.9

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Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：東京農工大学農学部府中キャンパス（府中） Country：Japan
プロラクチンは卵巣顆粒膜細胞の時計遺伝子Per2の振動的な発現を低下させプロジェステロン生成を抑制する

熊澤真琴, 陳華濤, 山内伸彦, 服部眞彰

第106回日本繁殖生物学会 2013.9

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Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：東京農工大学農学部府中キャンパス（府中） Country：Japan
ウシ子宮内膜細胞におけるPTGS2発現は時計遺伝子NR1D1によって抑制される

諌山慧士郎, 趙立佳, 田崎広天, 山内伸彦, 服部眞彰

第118回日本畜産学会 2014.3

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Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：つくば国際会議場（つくば） Country：Japan
着床遅延ラット子宮における胚性シグナル応答遺伝子の網羅的検索

山上一樹, 山内啓介, 山下聖世, 山内伸彦, 服部眞彰

第118回日本畜産学会 2014.3

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Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：つくば国際会議場（つくば） Country：Japan
ウシ子宮内膜におけるIndian Hedgehogの発現とその制御

藤江周一朗, 山下聖世, 中村暢寿, 山内伸彦, 服部眞彰

第107回日本繁殖生物学会 2014.8

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Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：帯広畜産大学 Country：Japan
マウス胎仔線維芽細胞における染色体分配制御因子 Kid および Cdc42 の発現と機能解析

田中愛咲実, 山上一樹, 江頭昭義, 蔵本武志, 山内伸彦, 服部眞彰

第107回日本繁殖生物学会 2014.8

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Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：帯広畜産大学 Country：Japan
ウシ子宮内膜におけるプロジェステロン誘導性分泌性因子の検索

田中綾, 山下聖也, 藤江周一郎, 藤原泰佑, 山内伸彦, 服部眞彰

第７回日本暖地畜産学会 2014.10

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：宮崎観光ホテル Country：Japan
Development of an in vitro model for the analysis of bovine endometrium using Micro Sphere Array International conference

K. Yamauchi, 山内伸彦, K. Yamagami, S. Yamashita, M. R. Islam, Shoji Tabata, K. Yahiro, T. Tamura, 服部眞彰

The 16th AAAP Animal Science Congress 2014.11

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Language：English

Venue：Gadjah Mada University, Yagoyakarta Country：Indonesia

ABSTRACT: The present study was conducted to develop an in vitro model for the analysis of bovine endometrial functions in a simple and easy method. We developed the hetero-spheroid as a model, consisting of bovine endometrial epithelial cells (BEE) and stromal cells (BES) using Micro Sphere Array® (MSA). MSA (STEM Biomethod Corporation, Kitakyushu, Japan) is a three-dimensional cell culture device, which has non-adherent cell culture wells.
BEE and BES were mixed in an appropriate density and were seeded immediately on a MSA. Followed by seeding cells were cultured for 3 days and it was noticed that the cells in each well of the MSA gradually aggregated and finally formed a multicellular mass. After 4 days of the culture, transparent cells covered the outer layer of the cell mass and finally formed a hetero-spheroid. Immunocytochemical analysis showed that the outer layers of the spheroids were covered with epithelial cells and stromal cells were positioned in the inner part of the spheroids. The hetero-spheroids expressed ERα, PR, IFNR-1 and IFNR-2 mRNA, detected by RT-PCR. Reactivity to steroid hormones was investigated by the addition of E2 and P4 to each culture medium. Results of real-time RT-PCR showed that PR and Oxytocin R mRNA were increased by the addition of E2, and HGF mRNA was increased by P4. Gelatin zymography showed that MMP production was suppressed in the hetero-spheroids.
In conclusion, we developed an in vitro model of the bovine endometrium, which could easily make in a short period. Since hormonal reaction and MMP production were similar to the character of endometrium in vivo, it was suggested that both models are effective for analysis of the endometrial functions in vitro. Thus, the hetero-spheroids developed in the present study provide a new platform for the bovine endometrial function research.
Effects of Epidermal Growth Factor and Hepatocyte Growth Factor on Rat Endometrial Epithelial Cells Proliferation, Migration and Lumen Formation In Vitro International conference

M. R. Islam, K. Yamagami, Y. Yoshii, 山内伸彦, 服部眞彰

The 16th AAAP Animal Science Congress 2014.11

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Language：English

Venue：Gadjah Mada University, Yagoyakarta Country：Indonesia

ABSTRACT: Several growth factors such as epidermal growth factor (EGF) and hepatocyte growth factor (HGF) modulate the function of the rat endometrium and are reportedly acts on various epithelial cells. The present study examined the expression of each receptors, EGFR and c-Met mRNA in cultured rat endometrial epithelial cells (REE) as well as investigated the biological effects of EGF and HGF on REE. Furthermore the effects of EGF and HGF on cell cycle regulation (emphasizing on p53 and cyclin D) were also investigated.
The isolated and cultured REE were characterized by immunocytochemistry using endometrial epithelial cell specific antibodies. The expression of EGFR and c-Met mRNA in cultured REE were observed by isolation and purification of total mRNA followed by RT-PCR. Furthermore, the biological role of EGF and HGF on the regeneration of the endometrium was also studied in REE in their proliferative stage by using MTT assay. In the proliferation assay, the addition of EGF and HGF showed mitogenic effect in a dose dependent manner. Additionally, in vitro cell migration assay revealed that cell migration stimulated with the doses of EGF and HGF. The REE formed cell clusters followed by epithelial lumen formation were also prompted by EGF and HGF which were further investigated using a three-dimensional cell culture system. Furthermore the effect of EGF and HGF on cell cycle regulation (emphasizing on p53 and cyclin D) investigated by using real time quantitative PCR revealed that the cell cycle regulation was influenced by the EGF and HGF as did earlier.
Thus the current study suggest that the EGF and HGF deserve the stimulatory function as well as trigger the cell cycle regulation and thus both have the role in proliferation, migration and lumen formation of rat endometrial epithelial cells in primary culture in vitro.
ウシ子宮内膜ヘテロスフェロイドを用いたMMP制御機構の解明

山下聖世, 山上一樹, 田中綾, 藤原泰佑, 山内伸彦, 服部眞彰

第118回日本畜産学会 2015.3

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Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：宇都宮大学峰キャンパス Country：Japan

【目的】着床期ウシ子宮内膜における組織改変にMMPsが関与していることが示唆されているが、その制御機構については未だ解明されていない。本研究では、MMPsの制御メカニズムに対するI型インターフェロン（IFN）の影響を調べるため、三次元培養塊であるウシ子宮内膜ヘテロスフェロイドを用いた解析を行った。【方法】E2、P4、IFNαおよび伸長期胚培養上清を添加した培地でヘテロスフェロイドを24時間培養後、培養上清およびスフェロイドをゼラチンザイモグラフィーにて解析し、MMP2およびMMP9の発現を無添加の対照区とそれぞれ比較した。また、数種類のプロテアーゼ阻害剤を用いて、MMPs放出に関与する因子をスクリーニングした。【結果】IFNτを含有すると考えられる伸長期胚の上清添加によりMMP発現が増加した。さらにIFNα添加により同様の結果が得られたことから、Ⅰ型IFNが着床期におけるMMPの制御を行っていることが示唆された。また、セリンプロテアーゼ阻害剤により、これらMMPsの発現が抑制された。これらの結果から、着床期ウシ子宮内膜における組織改変にMMP2およびMMP9が関与し、I型IFNがセリンプロテアーゼを介して子宮内膜組織内部のMMPs動態を制御していることが示唆された。
ウシ子宮内膜上皮細胞に対するFGF9の影響

田中綾, 山下聖世, 藤江周一郎, 藤原泰佑, 山内伸彦, 服部眞彰

第118回日本畜産学会 2015.3

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Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：宇都宮大学峰キャンパス Country：Japan

【目的】ウシ子宮内膜上皮細胞（BEE）はエストロジェン（E2）の直接的な影響下にあることが知られているが、プロジェステロン（P4）濃度が高い黄体期や妊娠期においても子宮機能に重要な役割を持っている。しかしながら、黄体期や着床期ではBEEでP4レセプターの発現が減少することから、P4が直接BEEへ作用するのでなく、子宮内膜間質細胞（BES）で産生された分泌性因子によって間接的に制御されることが考えられる。我々は第7回日本暖地畜産学会宮崎大会において、P4がBESにおけるFGF9の発現を誘導することを報告した。そこで本研究では、BEEに対するFGF9の影響を明らかにするために、その遺伝子発現について解析を行った。【方法】血中P4濃度が低い卵胞期と、高い黄体期および着床期のウシ子宮小丘からmRNAを抽出し、定量RT-PCR法を用いて各時期におけるFGF9下流候補因子の遺伝子発現を比較した。またBEEの培養上清中にリコンビナント FGF9を添加し、候補因子の遺伝子発現を同様に解析した。【結果】卵胞期と比較し、黄体期および着床期ではFGF9下流候補因子であるTIMP2、ITGB5およびLGMNの遺伝子発現が有意に高かった（P＜0.05）。培養系におけるBEEに対するFGF9の影響についての解析結果も併せて報告する。
Type I interferon regulates Matrix Metalloproteinases (MMPs) expression of the bovine endometrial cells in vitro. International conference

山下聖世, 藤原泰佑, 田中綾, Md. Rashedul Islam, 山内伸彦

Society for the Study of Reproduction, 48th Annual Meeting 2015.6

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Language：English Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：Puerto Rico Convention Center Country：Puerto Rico
Preimplantation embryo-secreted factors modulate maternal gene expression in rat uterus. International conference

山上一樹, Md. Rashedul Islam, 吉井裕香, 山内伸彦

Society for the Study of Reproduction, 48th Annual Meeting 2015.6

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Language：English Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：Puerto Rico Convention Center Country：Puerto Rico
ウシ子宮内膜におけるカテプシン遺伝子の発現解析

藤原泰佑, 山下聖世, 山上一樹, 田中綾, 山内伸彦

第120回日本畜産学会 2015.9

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Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：酪農学園キャンパス Country：Japan

【目的】着床や胎盤形成の際に生ずる子宮内膜の組織改変には、様々なプロテアーゼが関与している。カテプシン(CTS)はECMや細胞内のタンパクの分解に機能し、げっ歯類やヒツジにおいて着床前の子宮内膜で発現していることが報告されているが、その詳細は未だ明らかでない。本研究では、ウシ子宮内膜におけるCTSの遺伝子発現とその機能を調べることを目的とした。【方法】卵胞期、黄体期、着床期のウシ子宮内膜小丘組織におけるCTS A、B、G、KおよびLの遺伝子発現をRT-qPCRによって調べた。また、ウシ子宮内膜ヘテロスフェ
In Vitro Culture of Rat Uterine Explants: Characterization, Hormonal Regulation and In Vitro Decidualization

Md. Rashedul Islam, 山上一樹, 吉井裕香, 山内伸彦

第108回日本繁殖生物学会 2015.9

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Language：English Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：宮崎大学木花キャンパス Country：Japan
染色体制御因子KidおよびCdc42抑制による多核化とアポトーシス誘導の関係

陶山晃, 田中愛咲実, 山上一樹, 江頭昭善, 蔵本武志, 山内伸彦

第108回日本繁殖生物学会 2015.9

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Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：宮崎大学木花キャンパス Country：Japan
ラット子宮におけるSulf1の発現および局在の解析

吉井裕香, 山上一樹, Md. Rashedul Islam, 山内伸彦

第108回日本繁殖生物学会 2015.9

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Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：宮崎大学木花キャンパス Country：Japan
胚由来因子による着床期ラット子宮遺伝子の発現調節

山上一樹, 吉井裕香, Md. Rashedul Islam, 山内伸彦

第33回日本受精着床会 2015.11

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Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：TFTホール（東京都江東区有明） Country：Japan
マウスの胎仔線維芽細胞および卵母細胞に対するCdc42抑制の影響

田中愛咲実, 陶山晃, 山上一樹, 江頭昭義, 蔵本武志, 山内伸彦

第33回日本受精着床会 2015.11

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Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：TFTホール（東京都江東区有明） Country：Japan
ウシ子宮内膜上皮細胞におけるRNA干渉法を用いたFOXA2の機能解析

諫山慧志郎, 高武亜衣, 山内伸彦

第121回日本畜産学会 2016.3

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Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：日本獣医生命科学大学キャンパス Country：Japan

子宮内膜上皮細胞はその局在から腔上皮と腺上皮(GE）に分別され、それぞれが子宮機能に重要な役割を持つ。GEは妊娠および胚発生に重要な子宮乳を分泌することが報告されている。げっ歯類子宮では転写因子Forkhead box A2(FOXA2）がGE特異的に発現し、子宮腺の形成・機能に必要な因子であると考えられている。我々はウシFOXA2について、GE特異的に発現すること、また発情周期・着床期における発現動態を報告した。しかしながら、ウシFOXA2の上皮細胞における機能は不明である。
ウシ子宮内膜上皮細胞のマトリゲル三次元培養

高武亜衣, 諫山慧志郎, Md. Rashedul Islam, 藤原泰佑, 山内伸彦

第121回日本畜産学会 2016.3

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Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：日本獣医生命科学大学キャンパス Country：Japan

【目的】子宮内膜上皮細胞はその局在から腔上皮と腺上皮（GE）に分けることができ、それぞれが子宮機能に重要な役割を担っていることが報告されている。GEは妊娠の確立と維持を担う子宮分泌物の主要な産生組織であり、ウシでは胚の伸長と着床において重要な役割を果たすと考えられている。着床におけるGEの機能解析は、着床メカニズムの解析に必要であると考えられる。そこで本研究では、ウシ子宮内膜上皮細胞(BEE)のゲル内三次元培養を行い、GEの生体外モデルの確立を試みた。
ウシ子宮内膜におけるβ-cateninの発現解析

西野要, 藤原泰佑, Md. Rashedul Islam, 山内伸彦

第121回日本畜産学会 2016.3

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Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：日本獣医生命科学大学キャンパス Country：Japan

【目的】β-catenin（CTNNB1）はカドヘリンと複合体を形成して細胞接着に関与するとともに、核内へ移行して転写制御に関わることで、子宮機能に重要な役割を担うと考えられている。しかしながら、ウシ子宮内膜におけるCTNNB1の発現動態およびその制御については未だ明らかでない。我々は日本畜産学会第119回大会においてFGF9がウシ子宮内膜上皮細胞（BEE）のCTNNB1 mRNA発現を促進することを報告した。
Screening of embryo secreted factors using bovine elongated embryos International conference

H. Masaka, S. A. A. Musavi, M. R. Islam, 山内伸彦

The 17th AAAP Animal Science Congress 2016.8

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Language：English Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：Kyushu Sangyo University, Fukuoka Country：Japan

It is suggested that some embryo-derived factors modulate the endometrial functions and play pivotal role in acquiring uterine receptivity. Thus the present was aimed to analyze proteins secreted from bovine elongated embryos to identify embryo-derived factors, those regulate endometrial function at implantation stage.
Bovine elongated embryos at day 18 of pregnancy were cultured in DMEM/Ham’s F12 containing 1μM P4 and 1% PVA for 24 hours. Then, harvested supernatants were analyzed by LC-MS/MS. A total of 1091 proteins were identified and out of those 1069 proteins were converted to genes by protein database in NCBI. Annotated 904 genes were analyzed by GO analysis and observed that proteins coded by these genes contain the factors; those were not secreted outside the cells, such as cytoskeleton. Therefore, the factors with signal peptide were searched again for the genes, and 159 factors were identified as secretory factors. In reference to gene database in NCBI, secretory factors were categorized for enzyme, cell adhesion molecules, proteinase, protein regulators, proteinase inhibitors, molecule transporters, receptors, cytokines, growth factors, transcriptional factors and others. Identified cytokines (IFNT, FAM3C) and growth factors (MANF, GRN, MYDGF) were focused, as they have the possibility to become functional in signaling between embryo and endometrium. The gene expression of cytokines and growth factors in embryos and endometrium at the day 18 of pregnancy was analyzed by RT-PCR. The result showed that IFNT was expressed only in embryos (as observed in previous studies), while other genes were expressed both in embryos and endometrium.
However, no remarkable number of embryo specific factors could screen except IFNT,　but the remaining genes might be a promising pool to screen the embryo specific factors. Thus, further study is necessary to analyze the factors by using IPA to sum up the embryo specific factors.
Development of an in vitro model to study uterine functions using in vitro cultured rat uterine explants International conference

M. R. Islam, Yuka Yoshii, Yuko Ikeguchi, 山内伸彦

The 17th AAAP Animal Science Congress 2016.8

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Language：English Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：Kyushu Sangyo University, Fukuoka Country：Japan

Uterine functions reflect on implantation and further placentation is mediated by a variety of factors produced by the endometrium and the blastocyst. Hence, it is important to investigate the uterine characters to understand the complex process of uterine functions. In this regard, an in vitro model would be a promising alternative. Considering the above perspectives, the present study was aimed to develop an in vitro model using rat uterine explants to explore complex uterine functions.
Rat uterine explants (1-2 mm) were isolated, cultured and further characterized by phase contrast microscopy, histological analysis and indirect immunofluorescence staining. Then explants were treated with steroid hormones and the regulation of MUC1, PR, AREG and IGFBP1 were investigated. RT-qPCR data revealed that MUC1 and PR was upregulated significantly (P<0.05) by E2. On the other hand, AREG was upregulated significantly (P<0.05) by P4. Surprisingly, IGFBP1 was upregulated significantly (P<0.05) by E2 and P4, although in rat IGFBP1 is E2 dependent. Furthermore, the remodeling ability of the uterine explants in terms of in vitro decidualization was also investigated emphasizing on PRL8a2 and BMP2. RT-qPCR data revealed that the PRL8a2 and BMP2 were significantly (P<0.05) up regulated in treated explants compared to non-treated explants. Then, the cultured explants were co-cultured with the hatched blastocyst and the attachments of embryos to the explants were examined by phase contrast microscopy and histological analysis. Additionally, the steroid hormones reflects on attachment rates were also investigated, where progesterone induce the embryo attachment but estrogen prevent it compared to the control. .
The study revealed that the cultured uterine explants exhibited comparable characters of the in vivo uterine conditions, which suppose to mimic the morphology and physiology of the uterus. In conclusion, despite the necessity of comprehensive investigation, still the cultured rat uterine explants can be a useful in vitro model to explore endometrial functions.
Differential gene expression analysis in bovine uterus at follicular, luteal and implantation stage International conference

S.A.A. Musavi, H. Masaka, M. R. Islam, 山内伸彦, KOSUKE TASHIRO

The 17th AAAP Animal Science Congress 2016.8

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Language：English Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：Kyushu Sangyo University, Fukuoka Country：Japan

In mammalian reproduction, uterine modulation is important for embryonic development, implantation and further placentation. This uterine modulation triggered by genes is not only steroids dependent but also the embryonic factors are critical during early pregnancy. Although the gene expression in uterus differs according to the reproductive cycles, the profiles of the functional genes yet to be identified. Therefore, the study was aimed to compare gene expressions of three different reproductive stages namely follicular, luteal and implantation in the bovine uterus. Bovine uteri were collected from the slaughterhouse and the follicular (n=5) and luteal stages (n=5) were defined by the morphology of the ovaries. For the uterus of implantation stages (n=5), cows were slaughtered on day 18 of pregnancy representing the conceptus elongation. Then the total RNA was extracted from endometrium tissues by using standard protocols of our laboratory and the quality was assessed by spectrophotometric UV absorbance at 260/280 nm. RNA was purified and used to prepare amplified cDNA, which was then subjected to high-throughput sequencing using HiSeq 2500 sequencer (Illumina). Genes were selected by the criteria of fold change, considering >2 and <0.37. Genes according to their biological functions were clustered using gene ontology (GO). Then the gene clusters were compared as follicle vs luteal and luteal vs implantation stage. The results showed that 565 genes of 70 categories were highly expressed in implantation stages compared to luteal stages, whereas 188 genes of 30 categories showed reverse expression. On the other hand, in follicular stages 435 genes of 56 categories showed higher expression than luteal stages and 350 genes of 55 categories showed reverse expression pattern. The results showed that the implantation stages compared to follicular and luteal stages expressed higher number of genes reflects on biological functions that can be direct to utilize the genes to better understand the implantation mechanism.
Effect of Cdc42 inhibitor on maturation rate of mouse cumulus and denuded oocytes during in vitro maturation International conference

Mohamed El-Sharawy, Asami Tanaka, Hikaru Suyama, M. R. Islam, 山内伸彦

The 17th AAAP Animal Science Congress 2016.8

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Language：English Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：Kyushu Sangyo University, Fukuoka Country：Japan

Recent studies demonstrated that Cdc42 participated in asymmetric spindle orientation before polar body emission in mouse oocytes. Therefore, the study was aimed to investigate the effect of Cdc42 inhibitor (ML141) on maturation rate (MR) of mouse oocytes during in vitro maturation (IVM). Female mice (8–10 weeks old) were sacrificed by cervical dislocation after 46 hours of equine Chorionic Gonadotrophin (eCG; 5 IU) administration and ovaries were placed in M2 medium supplemented with 5 mg/ml bovine serum albumin. Cumulus and denuded oocytes (COC and DO) were collected and placed in M2 medium. Germinal vesicle (GV) oocytes were cultured in M16 media with 5μl/ml DMSO as control and 100μM from ML141 as treatment under mineral oil at 37°C with 5% CO2. ML141 was dissolved in 0.5% v/v DMSO and added to maturation medium to give a final concentration of 100 μM. For the analysis of MR, oocytes were observed to determine different stages of oocytes as GV, germinal vesicle breakdown, metaphase I, metaphase II, oocytes with big polar body (BPB) and degenerated oocytes.
Results of this study showed a significant difference (P<0.05) in MR and GV % of the COC oocytes (MR; 65.22 and 46.82%, GV; 7.47 and 16.94 %) in CNT and ML141 group, respectively. MR for DO oocyte was decreased in CNT and ML141 group (54.13 and 40.64%), respectively, but no significant differences were observed between COC and DO oocytes. In addition, the ratio of COC and DO oocytes, which had BPB was higher in ML141 group (3.92 and 9.36 %) than in CNT group (1.56 and 1.78%), respectively. From these results, it was supposed that Cdc42 was required for achievement of normal oocyte maturation. Also, Cdc42 deficient oocytes causing loss of polar body emission and contractile ring formation and resulted in inhibition of oocyte maturation.
ラット子宮における線維芽細胞増殖因子受容体の発現解析

池口祐子, Md. Rashedul Islam, 山内伸彦

第109回日本繁殖生物学会 2016.9

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Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：麻布大学 Country：Japan

線維芽細胞増殖因子(FGF)は分化、増殖、血管新生などに関与する増殖因子のひとつであり、子宮においてもいくつかのFGFの発現が報告されている。FGF受容体(FGFR)は4種類から構成され、子宮内膜上皮-間質の細胞間相互作用に関与していると考えられている。子宮におけるFGFの機能を解明する上でFGFRの解析が必須となるが、これまでにその発現に関する報告は少ない。そこで本研究では、子宮におけるFGFシグナル系列の解明を目的にFGFRの発現動態の解析を行った。【方法】初めに子宮組織、培養子宮内膜上皮および間質細胞、培養子宮組織片それぞれにおけるFGFRの発現をRT-PCRにて解析した。次に子宮内膜で発現が確認されたFGFRについての解析を行った。性周期および妊娠初期の子宮におけるFGFRの発現動態を調べるために、子宮組織を用いReal-time qPCRにて解析を行った。【結果】RT-PCRの結果、妊娠3.5日子宮組織および培養子宮組織片では全てのFGFRの遺伝子発現が認められたが、培養子宮内膜上皮および間質細胞ではFGFR4の発現は認められなかった。これらの結果から子宮内膜の細胞間相互作用にはFGFR1,2,3が重要であり、FGFR4は筋層や血管内皮などで発現していることが示唆された。Real-time qPCRの結果、FGFR1 mRNAの発現は発情前期において有意に高い値を示し、その後の発情後期および初期妊娠期では発現が低下した。一方FGFR2 mRNAは着床前である妊娠3.5日に一過性の上昇を示し、以降は妊娠の進行とともに発現が減少した。FGFR3 mRNAは性周期および妊娠初期における発現の差は認められなかった。以上の結果からラット子宮では全てのFGFR遺伝子が発現しており、FGFR1およびR2のmRNAは性周期および初期妊娠期にその発現が変動することが明らかとなった。これらの結果は、子宮においてFGFRが時期特異的に発現して機能を有することを示唆するものである。
ウシ伸長期胚が分泌するサイトカインおよび成長因子の検索

政家裕典, 山内伸彦

第109回日本繁殖生物学会 2016.9

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Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：麻布大学 Country：Japan

胚の発生や着床は胚と子宮内膜の相互作用によって制御された子宮内膜環境が重要である。これまでに様々な動物種において胚性分泌因子が着床における子宮受容能獲得に機能している可能性が示唆されているが、その具体的な因子は未だ明らかにされていない。そこで本研究では、着床期の子宮内膜環境を制御する胚性分泌因子の探索を目的とし、妊娠18日目のウシ伸長期胚が分泌するサイトカインおよび成長因子の検索を行った。【方法】妊娠18日目のウシ伸長期胚を無血清培地で24時間培養し、回収した上清中のタンパク質をLC-MS/MSにより同定した。NCBIのタンパク質データベースを用いて同定されたタンパク質をコードする遺伝子に変換後、IPAを用いて子宮内膜機能を制御している可能性のあるサイトカインおよび成長因子を特定した。また、これら遺伝子の伸長期胚と子宮内膜組織における発現をRT-PCRにより解析した。【結果】LC-MS/MSによりウシ伸長期胚の培養上清から1091個のタンパク質が同定された。遺伝子情報からIPAによる解析を行った結果 1059個の解析が可能であり、これらの中には細胞内に局在する因子が多く認められたため、Extracellular Spaceに分類された62個の因子を分泌因子として特定した。これら分泌因子を機能別に分類したところ4個のサイトカイン(FAM3C, MYDGF, AIMP1, MIF)と2個の成長因子(GRN, HDGF)が特定された。IPAで解析できなかった32個の因子についてNCBIの遺伝子データベースを用いて機能別に分類したところ、2個のサイトカイン(IFNT, IFN-tau-c1)が特定された。これら因子の遺伝子発現をRT-PCRにより解析した結果、IFNTは従来の報告と同様に胚でのみ発現していたが、他の因子全てが胚と子宮内膜組織の両方で発現していることが示された。これらの結果から、今回同定された因子が着床期の胚または子宮内膜において機能を有する可能性が示唆された。
Early implantation in vitro as revealed by co-culture of embryos and cultured uterine explants

Md. Rashedul Islam, 吉井裕香, 池口祐子, 山内伸彦

第109回日本繁殖生物学会 2016.9

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Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：麻布大学 Country：Japan

Although a number of studies describe the in vitro co-culture model, still the positioning of embryos to the uterine lumen and examination of blastocysts attached to the endometrial tissue was not so easy due to the small size of blastocysts compared to the endometrial tissues. The current study was aimed to develop an in vitro co-culture system to study the early implantation. Rat uterine explants (1-2 mm) were isolated, cultured and further characterized. Then morphologically normal embryos were flushed from uterine horns and hatching was induced by Acidic Tyrode’s solution (pH-2.5) for 15-30 second to remove the zona pellucida. Individual hatched blastocyst and cultured explant was placed in a 96U well plate. Results showed that stable attachments were observed after 48 hours of co-culture, where embryos were stably attached to the explants and could not be dislodged after mild shaking and/or pipetting. Furthermore, steroid hormones are critical for endometrial receptivity and further implantation process. The steroid hormone treatment revealed that the rate of attachment of embryos to the explants were significantly increased in P4 treated group (63.63%) compared to the control or non-treated group (35.48%). On the other hand, attachments of embryos to the explants were significantly reduced in E2 treated group compared to the control group, where no stable attachments were observed in E2 treated group (0.0%). The study suggests that the co-culture model is suitable for the study of early implantation and steroid hormones influence the rate of attachment in this system.
ウシ伸長期胚が産生するサイトカインおよび成長因子の解析

政家裕典, 西野要, 高橋凛, 山内伸彦

第122回日本畜産学会 2017.3

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Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：神戸大学 Country：Japan

ウシ伸長期胚が産生する因子としてIFNTが母体の妊娠認識や着床過程に不可欠であることが報告されているが、他の因子の解析はほとんど行われていない。本研究では、着床期の子宮内膜機能を制御する因子の探索を目的として、伸長期胚が産生する因子の同定とその受容体の解析を行った。【方法】妊娠18日目のウシ伸長期胚培養上清中のタンパク質をLC-MS/MSにより同定した。これらのタンパク質の中からサイトカインおよび成長因子に着目し、胚と子宮内膜における遺伝子発現をRT-PCRにより解析した。次に、ウシ子宮内膜のRNA-Seq解析結果からIPA解析により着床期子宮内膜で発現が上昇する遺伝子の上流因子の解析を行った。【結論】ウシ伸長期胚培養上清から6個のサイトカイン（IFNT, IFN-tau-c1, FAM3C, MYDGF, AIMP1, MIF）と2個の成長因子（GRN, HDGF）が特定された。これらの因子は、IFNT以外の全ての因子の遺伝子が子宮内膜でも発現していた。IPA解析の結果、IFNT に加えてMIF（マクロファージ遊走阻止因子）が制御していると想定される遺伝子の発現が着床期子宮内膜で上昇した（P＜0.05）。MIFの受容体であるCD74の遺伝子は胚では発現しておらず、着床期子宮内膜で発現が上昇した（P＜0.05）。これらの結果から、IFNT の他に、胚の産生するMIFが着床期子宮内膜機能を制御している可能性が示唆された。
ウシ子宮内膜間質細胞におけるプロジェステロン誘導性因子の探索

高橋凛, 高武亜衣, 西野要, 政家裕典, 山内伸彦

第122回日本畜産学会 2017.3

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Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：神戸大学 Country：Japan

○髙橋凜, 髙武亜衣, 西野要, 政家裕典，山内伸彦(九大院農)
【目的】黄体期・着床期におけるウシ子宮内膜上皮細胞(BEE)の機能はプロジェステロン(P4)により制御されていると考えられている。一方で、BEEにおけるP4受容体の発現はP4自身によって抑制されており、P4によるBEE機能の制御機構は未だ不明な点が残されている。本研究では、P4がウシ子宮内膜間質細胞(BES)を介してBEEの機能を制御していると想定し、P4によるBEE機能制御機構の解明を目的にBESにおけるP4誘導性因子の探索を行った。【方法】ウシ子宮内膜RNA-seq解析の結果から黄体期で発現が上昇している因子に着目し、GO解析により細胞間コミュニケーションを担う可能性のあるサイトカインおよび成長因子を探索した。これらの因子について、培養BEEおよびBESにおける発現をRT-PCRにより解析した。【結果】ウシ子宮内膜において1671個の遺伝子が卵胞期より黄体期で有意に高い発現を示し、GO解析により2個のサイトカイン(GDF10, IL15)と6個の成長因子(BTC, FGF13, GDF10, IGF1, PDGFA, PGF)が同定された。BTCはBEE、IGF1はBES、 IL15, FGF13, PDGFAは BEEとBESの両方でそれぞれ遺伝子が発現していた。遺伝子発現に対するP4の影響についても併せて報告する。
着床期ウシ子宮内膜におけるI型IFNを介したMMPsの制御機構

藤原泰佑, 山下聖世, 山内伸彦

第122回日本畜産学会 2017.3

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Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：神戸大学 Country：Japan

【目的】着床期ウシ子宮内膜における組織改変にはMMPsが関与することが示唆されている。我々は第117回大会にて、MMPsが子宮内膜組織中に蓄積され、I型IFNによって組織からの放出が促進される事を報告したが、その制御機構の詳細は未だ不明である。MMPsは組織中のグリコサミノグリカン(GAG)に結合して蓄積されることが報告されている。そこで本研究では、I型IFNによって子宮内膜で発現が促進されるGAG 分解酵素の探索を行った。【方法】ウシ子宮内膜におけるRNA-Seq解析により、着床期で有意に遺伝子発現が上昇したGAG 分解酵素を探索した。さらに、間質細胞、上皮細胞およびヘテロスフェロイドにおける遺伝子発現をRT-qPCRにて解析した。また、GAG分解酵素であるヘパリチナーゼを用い、MMPの放出に対するGAG分解酵素の影響を解析した。【結果】RNA-Seq解析によりスルファターゼであるGALNSが着床期で有意に上昇し、IFNαによりヘテロスフェロイドと間質細胞において遺伝子発現が促進された。また、ヘテロスフェロイドのMMP放出に対するヘパリチナーゼの影響では、IFNα添加時と同様に培養上清中にMMPsが放出された。これらの結果から、組織中のGAGに蓄積されたMMPsはI型IFNにより発現が誘導されるGALNSによって放出され活性化し、着床期ウシ子宮内膜における組織改変を引き起こすことが示唆された。
卵抽出液によるマウス細胞の初期化誘導

西崎俊太朗1，新冨圭史2，井上明裕1，宮川靖基1，門野莉紗3，森龍之介3，山内伸彦1，宮本圭1

第117回日本繁殖生物学会　名古屋大会 2024.9

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Event date： 2024.9

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：名古屋大学　野依記念学術交流館・シンポジオン Country：Japan
胚の質にかかわる母性転写産物の同定と機械学習による胚発生能予測法の構築

井上明裕1，Nicole CHEUNG4，塚口智将2，山本真理2，佐藤英男2，西羅彩花2，山之内忠幸3，松田秀雄3，吉岡一3，的場理子3，西崎俊太朗1，宮川靖基1，門野莉沙2，森龍之介2，松本和也2，山内伸彦1，宮本圭1

第117回日本繁殖生物学会　名古屋大会 2024.9

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Event date： 2024.9

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：名古屋大学　野依記念学術交流館・シンポジオン Country：Japan
母性転写産物による胚質の評価とその応用

井上明裕、Nicole Nicole、塚口智将、山本真里、佐藤英男、西羅彩花、山之内忠行、吉岡一、的場理子、西崎俊太郎、宮川靖基、門野莉紗、森龍之介、松本和也、山内伸彦、宮本圭

第132回日本畜産学会 2024.9

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Event date： 2024.9

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：京都大学　吉田キャンパス Country：Japan
初期化技術を用いた体外での細胞状態の操作

西崎俊太郎、新富圭史、井上明裕、宮川靖基、森龍之介、門野莉紗、山内伸彦、宮本圭

第132回日本畜産学会 2024.9

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Event date： 2024.9

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：京都大学　吉田キャンパス Country：Japan
ニワトリ初期胚の性腺におけるMDR1遺伝子の発現

奥野慎一郎,荒牧伸弥,宗知紀,山内伸彦,服部眞彰

第103回日本畜産学会 2004.3

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：東京農工大学 Country：Japan
ニワトリ体節形成期の筋板におけるTGF-β2の発現推移

荒牧伸弥・佐藤文規・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

第97回日本繁殖生物学会 2004.9

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：静岡 Country：Japan
ニワトリ胚由来筋芽細胞の増殖・分化におけるGDF-8の機能に関するRNA干渉法による検討

佐藤文規・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

第97回日本繁殖生物学会 2004.9

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：静岡 Country：Japan
ブタ顆粒層細胞におけるRNAi有効性の検討

平野拓郎・山内伸彦・佐藤文規・宗知紀・服部眞彰

第97回日本繁殖生物学会 2004.9

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：静岡 Country：Japan
ニワトリ胚性腺におけるMDR1遺伝子の発現変動と発現細胞

山田佳奈穂・奥野慎一郎・荒牧伸弥・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

第97回日本繁殖生物学会 2004.9

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：静岡 Country：Japan
ブタ顆粒層細胞におけるMDR1遺伝子のホルモンによる発現調節

福田裕明・荒井学・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

第97回日本繁殖生物学会 2004.9

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：静岡 Country：Japan
ステロイドホルモンによるブタ顆粒層細胞MDR1遺伝子発現の調節

福田裕明・荒井学・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

第104回日本畜産学会 2005.3

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：東京大学農学部 Country：Japan
卵子のP糖タンパク質：卵成熟に伴う機能の発達

荒井学・山内伸彦・福田裕明・宗知紀・服部眞彰

第104回日本畜産学会 2005.3

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：東京大学農学部 Country：Japan
ニワトリ筋芽細胞におけるRNA干渉を用いたミオスタチン機能の解析

佐藤文規・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

第104回日本畜産学会 2005.3

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：東京大学農学部 Country：Japan
Expression of Multidrug Resistance Type I Gene In Porcine Granulosa Cells and Its Steroid Hormone Regulation International conference

Hiroaki Fukuda, Manabu Arai, Tomoki Soh, Nobuhiko Yamauchi, Masa-aki Hattori

Society for the Study of Reproduction, 38th Annual Meeting 2005.7

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Venue：Quebec Country：Canada
Growth Differentiation Factor-8 Function In Chicken Embryonic Myoblasts Analyzed by RNA Interference International conference

Fuminori Sato, Tomoki Soh, Nobuhiko Yamauchi, Masa-aki Hattori

Society for the Study of Reproduction, 38th Annual Meeting 2005.7

　More details

Venue：Quebec Country：Canada
Development of Multidrug Resistance Type I P-Glycoprotein Function During In Vitro Maturation of Porcine Oocyte International conference

Manabu Arai, Nobuhiko Yamauchi, Hiroaki Fukuda, Tomoki Soh, Masa-aki Hattori

Society for the Study of Reproduction, 38th Annual Meeting 2005.7

　More details

Venue：Quebec Country：Canada
ニワトリ胚盤葉由来胚様体の特性と分化制御

荒牧伸弥・佐藤文規・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

第98回日本繁殖生物学会 2005.9

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：静岡 Country：Japan
顆粒層細胞CREB転写活性リズムのリアルタイム計測の開発と応用

賀培建・藤本康文・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

第98回日本繁殖生物学会 2005.9

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：静岡 Country：Japan
ニワトリ胚筋芽細胞におけるミオスタチン機能の選択的阻害

佐藤文規・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

第98回日本繁殖生物学会 2005.9

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：静岡 Country：Japan
ニワトリ胚由来筋芽細胞の分化に伴う Smad 転写活性の変化と成長因子の影響

黒川雅俊・佐藤文規・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

日本家禽学会2006春季大会 2006.3

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：九州大学六本松キャンパス Country：Japan
dead end プローブを使った whole-mount in situ hybridization によるニワトリ初期胚における始原生殖細胞の観察

荒牧伸弥・佐藤文規・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

日本家禽学会2006春季大会 2006.3

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：九州大学六本松キャンパス Country：Japan
ブタ顆粒層細胞MDR-1遺伝子の発現におけるプロジェステロンの制御

福田裕明・横田加寿子・賀培建・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

第106回日本畜産学会 2006.3

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：九州大学六本松キャンパス Country：Japan
ラット精巣間質細胞における時計遺伝子Per2プロモーター活性の振動リズム

平田雅美・賀培建・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

第106回日本畜産学会 2006.3

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：九州大学六本松キャンパス Country：Japan
体外培養系におけるブタ卵丘−卵子複合体の一酸化窒素産生とその機能

柴田典子・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

第106回日本畜産学会 2006.3

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：九州大学六本松キャンパス Country：Japan
ニワトリ胚筋芽細胞におけるミオスタチンのジーンサイレンシング

佐藤文規・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

第106回日本畜産学会 2006.3

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：九州大学六本松キャンパス Country：Japan
培養ラット子宮内膜間質細胞における一酸化窒素合成酵素の発現および一酸化窒素産生

浦田博揮・西村享平・大薗慎二・宗　知紀・山内伸彦・服部眞彰

第106回日本畜産学会 2006.3

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Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：九州大学六本松キャンパス Country：Japan
ブタ卵子におけるP-糖タンパク質発現とプロジェステロンの関与

横田加寿子・荒井　学・宗　知紀・山内伸彦・服部眞彰

第106回日本畜産学会 2006.3

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：九州大学六本松キャンパス Country：Japan
Tracking of Chicken Primordial Germ Cell Migration Using Dead End Gene at Early Embryonic Stage International conference

Shinya Aramaki, Fuminori Satoh, Tomoki Soh, Nobuhiko Yamauchi, Masa-aki Hattori

Society for the Study of Reproduction, 39th Annual Meeting 2006.7

　More details

Venue：Omaha, Nebraska Country：United States
FSH Interference With the Circadian Circuit of Clock System in Granulosa Cells International conference

Pei-jian He, Masami Hirata, Nobuhiko Yamauchi, Masa-aki Hattori, Seiichi Hashimoto

Society for the Study of Reproduction, 39th Annual Meeting 2006.7

　More details

Venue：Omaha, Nebraska Country：United States
Progesterone Dependent and Independent Regulation of MDR1 Expression in Porcine Granulosa Cells International conference

Hiroaki Fukuda,　Pei-jian He, Tomoki Soh, Nobuhiko Yamauchi, Masa-aki Hattori

Society for the Study of Reproduction, 39th Annual Meeting 2006.8

　More details

Venue：Omaha, Nebraska Country：United States
Circadian clock is disrupted in the folllicles but operative in the corpoa lutea

Peijian He, Masami Hirata, Nobuhiko Yamauchi, Sheiichi Hashimoto, Masa-aki Hattori

第99回日本繁殖生物学会 2006.9

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：名古屋大学 Country：Japan
ニワトリ胚性腺におけるミオスタチンの発現とリコンビナント作製の試み

久保田海雄・佐藤文規・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

第99回日本繁殖生物学会 2006.9

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：名古屋大学 Country：Japan
ブタ卵子および顆粒層細胞におけるABCトランスポーターの発現調節

浦田奈留美・平野拓郎・横田加寿子・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

第107回日本畜産学会 2007.3

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：麻布大学 Country：Japan
ラット顆粒膜細胞および黄体細胞における時計遺伝子の振動リズムの内分泌調節

吉田薫・賀培建・平田雅美・山内伸彦・橋本誠一・服部眞彰

第100回日本繁殖生物学会 2007.10

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：東京大学 Country：Japan
ラット子宮内膜間質細胞における時計遺伝子の発現振動リズムと同調因子

平田雅美・賀培建・吉田薫・山内伸彦・橋本誠一・服部眞彰

第100回日本繁殖生物学会 2007.10

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：東京大学 Country：Japan
Steroid Hormone Regulation of Circadian Clockwork System in the Rat Uterus Stromal Cells International conference

Masami Hirata, Pei-jian He, Kaoru Yoshida, Shinya Aramaki, Nobuhiko Yamauchi, Seiichi Hashimoto, Masa-aki Hattori

World Congress on Reproductive Biology 2008.5

　More details

Venue：Hawaii Country：United States
Molecular Cloning and Expression of Dead End Homolog in Chicken Germ Cells International conference

Shinya Aramaki, Takako Kato, Tomoki Soh, Nobuhiko Yamauchi, Yukio Kato, Masa-aki Hattori

World Congress on Reproductive Biology 2008.5

　More details

Venue：Hawaii Country：United States
Synchronization of Circadian Clockwork System in the Rat Ovarian Follicular Cells During Folliculogenesis and Luteinization International conference

Kaoru Yoshida, Pei-jian He, Masami Hirata, Shinya Aramaki, Nobuhiko Yamauchi, Seiichi Hashimoto, Masa-aki Hattori

World Congress on Reproductive Biology 2008.5

　More details

Venue：Hawaii Country：United States
妊娠ラット子宮組織におけるペースメーカーの発生と制御

内川美穂・吉田薫・山内伸彦・橋本誠一・服部眞彰

第101回日本繁殖生物学会 2008.9

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：九州大学 Country：Japan
ニワトリ始原生殖細胞で発現する遺伝子のシングルセルサブトラクションクローニング

浦田奈留美・荒牧伸弥・黒川雅俊・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

第101回日本繁殖生物学会 2008.9

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：九州大学 Country：Japan
ラット卵胞発育に伴う時計遺伝子関連タンパク質発現の組織化学的検索

楢原佐由子・賀培建・山内伸彦・橋本誠一・服部眞彰

第101回日本繁殖生物学会 2008.9

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：九州大学 Country：Japan
ラット前立腺間質細胞におけるペースメーカーの発生と制御

吉田薫・賀培建・平田雅美・山内伸彦・橋本誠一・服部眞彰

第101回日本繁殖生物学会 2008.9

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：九州大学 Country：Japan
ニワトリdead endタンパクは生殖細胞の核タンパクである

荒牧伸弥・加藤たか子・宗知紀・山内伸彦・加藤幸雄・服部眞彰

第101回日本繁殖生物学会 2008.9

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：九州大学 Country：Japan
ニワトリ始原生殖細胞で発現するChicken Vasa Homologue (CVH)とDeleted in Azoospermia-Like (dazl)の抗体作製

木藤学士、荒牧伸弥、田中浩嗣、宗知紀、山内伸彦、服部眞彰

第59回西日本畜産学会 2008.10

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：佐賀大学 Country：Japan
妊娠ラット子宮組織におけるペースメーカーの発振とホルモンによる制御

内川美穂, 吉田　薫, 山内伸彦, 橋本誠一, 服部眞彰

第13回日本生殖内分泌学会 2008.11

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：大阪国際会議場 Country：Japan
顆粒膜細胞の分化と黄体細胞のアポトーシスにリンクするペースメーカーの発振

吉田　薫, 楢原佐由子, 賀培建, 平田雅美, 山内伸彦, 橋本誠一, 服部眞彰

第13回日本生殖内分泌学会 2008.11

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：大阪国際会議場 Country：Japan
ニワトリ生殖細胞の分化に伴うDAZLとCVHの発現比較

木藤学志，荒牧伸弥，田中浩嗣，宗知紀，山内伸彦，服部眞彰

第102回日本繁殖生物学会 2009.9

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：近畿大学（奈良） Country：Japan
ラット顆粒膜細胞の成熟に伴うコア時計遺伝子のプロモーター活性の変化

チュウグゥイヤン，楢原佐由子，内川美穂，河村円香，山内伸彦，橋本誠一，服部眞彰

第102回日本繁殖生物学会 2009.9

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：近畿大学（奈良） Country：Japan
妊娠ラット子宮組織におけるペースメーカーの発生と制御

内川美穂，山内伸彦，橋本誠一，服部眞彰

第102回日本繁殖生物学会 2009.9

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：近畿大学（奈良） Country：Japan
ニワトリ生殖細胞の発生・分化に伴う生殖系列特異的タンパク質の発現相違

木藤　学志・荒牧　伸弥・田中　浩嗣・宗　知紀・山内　伸彦・服部　眞彰

第112回日本畜産学会 2010.3

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：明治大学駿河台キャンパス Country：Japan
ラット顆粒膜細胞および黄体細胞の分化・アポトーシス誘導によるペースメーカーの発振の変化

Chu　Guiyan ・吉田　薫・楢原　佐由子・内川　美穂・河村円香・山内　伸彦・服部　眞彰

第112回日本畜産学会 2010.3

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：明治大学駿河台キャンパス Country：Japan
時計遺伝子を介したトリヨードチロニンによるニワトリ羽毛幹細胞の分化誘導

席　　咏梅・Chu　Guiyan ・内川　美穂・宗　知紀・山内　伸彦・服部　眞彰

第112回日本畜産学会 2010.3

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：明治大学駿河台キャンパス Country：Japan
ニワトリ生殖系列幹細胞における神経細胞増殖因子cNENFの発現と機能推定

木藤学志，荒牧伸弥，丹生聡，宗知紀，山内伸彦，服部眞彰

第103回日本繁殖生物学会 2010.9

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：北里大学（十和田） Country：Japan
T3 regulation of circadian oscillations in reproductive tissues

Chu　Guiyan 、河村円香、Yongmei Xi、山内　伸彦、　橋本　誠一、服部　眞彰

第103回日本繁殖生物学会 2010.9

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：北里大学（十和田） Country：Japan
ラット前立腺におけるコア時計遺伝子Per2の概日振動と制御

河村円香，三澤いずみ、吉田薫、山内伸彦，橋本誠一，服部眞彰

第103回日本繁殖生物学会 2010.9

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：北里大学（十和田） Country：Japan
ウシ子宮内膜間質細胞におけるペースメーカーの計測法開発とホルモン応答

諌山慧士朗、西村翔、合原崇文、山内伸彦、服部眞彰

第103回日本繁殖生物学会 2010.9

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：北里大学（十和田） Country：Japan
ニワトリ生殖系列幹細胞における神経細胞増殖因子の発現

丹生聡、木藤学士、荒牧伸弥、宗知紀、山内伸彦、服部眞彰

第3回日本暖地畜産学会 2010.10

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：別府亀の井ホテル Country：Japan
ウシ子宮内膜間質細胞および上皮細胞におけるペースメーカーの振動

諌山慧士朗，田崎広天，山内伸彦，服部眞彰

第104回日本繁殖生物学会 2011.9

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：アイーナホール（盛岡） Country：Japan
ニワトリ生殖細胞における神経細胞増殖因子cNENF の発現

丹生聡，木藤学志，田中宏明，宗知紀，山内伸彦，服部眞彰

第104回日本繁殖生物学会 2011.9

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：アイーナホール（盛岡） Country：Japan
ラット前立腺間質細胞におけるアポトーシスシグナルが時計遺伝子の振動に及ぼす影響

三澤いづみ，河村円香，CHU Guiyan，山内伸彦，服部眞彰

第104回日本繁殖生物学会 2011.9

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：アイーナホール（盛岡） Country：Japan
オートクリン性神経細胞増殖因子cNENFがニワトリ生殖系列幹細胞で発現する

木藤学志・丹生聡・荒牧伸弥・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

第115回日本畜産学会 2012.3

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：名古屋大学東山キャンパス Country：Japan
FSHが卵巣未成熟顆粒膜細胞の細胞時計を発達させる

服部眞彰・CHU Guiyan ・CHEN Huatao・三澤いずみ・山内伸彦

第115回日本畜産学会 2012.3

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：名古屋大学東山キャンパス Country：Japan
ラット成熟顆粒膜細胞における細胞時計の振動と下流遺伝子への影響

CHEN Huatao・CHU Guiyan ・ZHAO Lijia・山内伸彦・服部眞彰

第115回日本畜産学会 2012.3

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：名古屋大学東山キャンパス Country：Japan
ウシ子宮内膜の間質細胞と上皮細胞における細胞時計の特徴と卵巣ステロイドホルモンの影響

諌山慧士朗・中村暢久・田崎広天・山内伸彦・服部眞彰

第115回日本畜産学会 2012.3

　More details

Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：名古屋大学東山キャンパス Country：Japan
妊娠ラット子宮内膜間質細胞における時計遺伝子およびその下流遺伝子の発現に関する網羅的分析

田崎　広天, 諌山　慧士郎, 趙　立佳, 山内伸彦, 服部眞彰

第105回日本繁殖生物学会 2012.9

　More details

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：筑波大学　大学会館（つくば市） Country：Japan
ニワトリ生殖細胞の分化に伴う転写開始点上流域のメチル化の変化

木藤学志, 田中宏明, 宗知紀, 山内伸彦, 服部眞彰

第105回日本繁殖生物学会 2012.9

　More details

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：筑波大学　大学会館（つくば市） Country：Japan
プロジェステロンは妊娠ラット子宮内膜間質細胞の概日振動の位相を変化させる

趙　立佳, 陳華濤, 諌山　慧士郎, 山内伸彦, 服部眞彰

第105回日本繁殖生物学会 2012.9

　More details

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：筑波大学　大学会館（つくば市） Country：Japan
ニワトリ分泌性神経増殖因子cNENFによる生殖系列幹細胞の増殖

田中宏明, 木藤学士, 宮川愛美, Tomoki 　 Soh, 山内伸彦, 服部眞彰

第105回日本繁殖生物学会 2012.9

　More details

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：筑波大学　大学会館（つくば） Country：Japan
FSH regulates and induces maturation of circadian clock system in rat granulosa cells through gap junction pathway

Huatao CHEN, Lijia ZHAO, 山内伸彦, 服部眞彰

第105回日本繁殖生物学会 2012.9

　More details

Language：English Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：筑波大学　大学会館（つくば） Country：Japan
妊娠ラット子宮内膜間質細胞における時計遺伝子およびその下流遺伝子の発現に関する網羅的解析

田崎　広天, 諌山　慧士郎, 趙　立佳, 山内伸彦, 服部眞彰

第17回日本生殖内分泌学会学術集会 2012.12

　More details

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：東京ステーションコンファレンス（東京都千代田区丸の内） Country：Japan
Dissection of potential influence of ovarian oscillators on fertility using rat luteinizing granulosa cells

Huatao Chen, Lijia Zhao, Keishiro Isayama, 山内伸彦, 服部眞彰

リスクサイエンス研究フォーラム2013 2013.3

　More details

Language：English

Venue：福岡大学セミナーハウス（福岡市） Country：Japan
Altered levels of steroid hormones affect the generation of circadian rhythm in endometrial stromal cells of pregnant rats

Lijia Zhao, Huatao Chen, Keishiro Isayama, 山内伸彦, 服部眞彰

リスクサイエンス研究フォーラム2013 2013.3

　More details

Language：English

Venue：福岡大学セミナーハウス（福岡市） Country：Japan
子宮内膜のプロスタグランジン分泌制御における時計遺伝子の重要性

諌山　慧士朗, Huatao Chen, 山内伸彦, 服部眞彰

リスクサイエンス研究フォーラム2013 2013.3

　More details

Language：Japanese

Venue：福岡大学セミナーハウス（福岡市） Country：Japan
ニワトリ生殖細胞特異的遺伝子におけるプロモーター領域のメチル化と遺伝子発現との関連性

木藤学志, 田中宏明, 宗知紀, 山内伸彦, 服部眞彰

第106回日本繁殖生物学会 2013.9

　More details

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：東京農工大学農学部府中キャンパス（府中） Country：Japan
ウシ子宮内膜間質細胞および上皮細胞ではPtgs2（Cox2）発現は時計遺伝子Rev-erbαによって抑制的に制御されている

諌山慧士朗, 陳華濤, 山内伸彦, 服部眞彰

第106回日本繁殖生物学会 2013.9

　More details

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：東京農工大学農学部府中キャンパス（府中） Country：Japan
ラット子宮内膜間質細胞において時計遺伝子Rev-erbαはGdf15の発現を抑制的に制御する

田崎広天, 諌山慧士朗, 趙立佳, 山内伸彦, 服部眞彰

第106回日本繁殖生物学会 2013.9

　More details

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：東京農工大学農学部府中キャンパス（府中） Country：Japan
Rev-erb alpha, in conjunction with its ligands, regulates the expression of circadian clock genes in rat mature granulosa cells

Huatao CHEN, 諌山慧士朗, 趙立佳, 熊沢真琴, 山内伸彦, 服部眞彰

第106回日本繁殖生物学会 2013.9

　More details

Language：English Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：東京農工大学農学部府中キャンパス（府中） Country：Japan
分泌性神経増殖因子Neudesinがニワトリ胚性腺の生殖細胞に及ぼす増殖効果

宮川愛美, 木藤学志, 田中宏明, テインゾウ, Tomoki 　 Soh, 山内伸彦, 服部眞彰

第106回日本繁殖生物学会 2013.9

　More details

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：東京農工大学農学部府中キャンパス（府中） Country：Japan
ニワトリ分泌性神経増殖因子Neudesinによって誘導される生殖系列幹細胞の増殖とその特質

田中宏明, 木藤学志, 宮川愛美, テインゾウ, 宗知紀, 山内伸彦, 服部眞彰

第106回日本繁殖生物学会 2013.9

　More details

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：東京農工大学農学部府中キャンパス（府中） Country：Japan
Contribution of cellular clock to the Notch signaling pathway in uterus stromal cells of pregnant rats

趙立佳, 諌山慧士郎, 田崎広天, 山内伸彦, 服部眞彰

第118回日本畜産学会 2014.3

　More details

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：つくば国際会議場（つくば） Country：Japan
Effect of neudesin on the proliferation of chicken PGCs and their characterization

Thein Zaw, 木藤学志, 田中宏明, 宮川愛美, 山内伸彦, 服部眞彰

第118回日本畜産学会 2014.3

　More details

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：つくば国際会議場（つくば） Country：Japan
ニワトリ分泌性神経増殖因子Neudesinによって誘導される生殖細胞の増殖とその特質

宮川愛美, ティンゾウ, 田中宏明, 宗知紀, 山内伸彦, 服部眞彰

第107回日本繁殖生物学会 2014.8

　More details

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：帯広畜産大学 Country：Japan
プロラクチンは卵巣顆粒膜細胞の時計遺伝子Per2の振動的発現を抑制する

熊澤真琴, 陳華濤, 山内伸彦, 服部眞彰

第19回日本生殖内分泌学会 2015.1

　More details

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：大阪千里ライフサイエンスセンター Country：Japan
核内受容体REV-ERBαによる子宮プロスタグランジン合成酵素発現の抑制

諫山慧士朗, 趙立佳, 田崎　広天, 山内伸彦, 服部眞彰

第19回日本生殖内分泌学会 2015.1

　More details

Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)

Venue：大阪千里ライフサイエンスセンター Country：Japan
母性転写物による胚質の評価とその応用

井上明裕, Nicole Nicole, 塚口智将, 山本真理, 佐藤英男, 西羅彩花, 山之内忠行, 吉岡一, 的場理子, 西崎俊太朗, 宮川靖基, 門野莉紗, 森龍之介, 松本和也, 山内伸彦, 宮本圭

日本畜産学会大会講演要旨集 2024.9 (公社)日本畜産学会

　More details

Language：Japanese
初期化技術を用いた体外での細胞状態の操作

西崎俊太朗, 新冨圭史, 井上明, 宮川靖基, 森龍之介, 門野莉紗, 山内伸彦, 宮本圭

日本畜産学会大会講演要旨集 2024.9 (公社)日本畜産学会

　More details

Language：Japanese

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Professional Memberships

米国繁殖生物学会
日本暖地畜産学会
日本畜産学会
日本繁殖生物学会
米国繁殖生物学会

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日本繁殖生物学会

　 More details

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日本畜産学会

　 More details

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日本暖地畜産学会

　 More details

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Committee Memberships

西日本畜産学会 Organizer Domestic

2017.10 - 2019.9
西日本畜産学会庶務幹事 Domestic

2017.10 - 2019.9
日本繁殖生物学会 Councilor Domestic

2012.5 - Present
日本繁殖生物学会評議員

2012.5

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日本繁殖生物学会 Steering committee member Domestic

2006.9 - Present
日本繁殖生物学会運営委員

2006.9

　 More details

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西日本畜産学会 Organizer Domestic

2005.4 - 2007.3
西日本畜産学会編集幹事 Domestic

2005.4 - 2007.3

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Academic Activities

座長（Chairmanship）

第116回日本繁殖生物学会（ Japan ） 2023.9

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
Screening of academic papers

Role(s)： Peer review

2023

　More details

Type：Peer review

Number of peer-reviewed articles in foreign language journals：3

Number of peer-reviewed articles in Japanese journals：1
座長（Chairmanship）

第115回日本繁殖生物学会（ Japan ） 2022.9

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
Screening of academic papers

Role(s)： Peer review

2022

　More details

Type：Peer review

Number of peer-reviewed articles in foreign language journals：4
実行委員長

第14回日本暖地畜産学会（ Japan ） 2021.10

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
庶務、プログラム委員会（幹事）

第128回日本畜産学会（ Japan ） 2021.3

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
Screening of academic papers

Role(s)： Peer review

2021

　More details

Type：Peer review

Number of peer-reviewed articles in foreign language journals：5
Screening of academic papers

Role(s)： Peer review

2020

　More details

Type：Peer review

Number of peer-reviewed articles in foreign language journals：1
座長（Chairmanship）

第12回日本暖地畜産学会（ Japan ） 2019.10

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
座長

日本IVF学会（ Japan ） 2019.10

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
座長（Chairmanship）

第112回日本繁殖生物学会（ Japan ） 2019.9

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
Screening of academic papers

Role(s)： Peer review

2019

　More details

Type：Peer review

Number of peer-reviewed articles in foreign language journals：2

Number of peer-reviewed articles in Japanese journals：1
座長（Chairmanship）

第11回日本暖地畜産学会（ Japan ） 2018.10

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
座長（Chairmanship）

第111回日本繁殖生物学会（ Japan ） 2018.9

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
Screening of academic papers

Role(s)： Peer review

2018

　More details

Type：Peer review

Number of peer-reviewed articles in foreign language journals：4
座長（Chairmanship）

第122回日本畜産学会（ Japan ） 2017.3

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
Screening of academic papers

Role(s)： Peer review

2017

　More details

Type：Peer review

Number of peer-reviewed articles in foreign language journals：1
Committee Members International contribution

The 17th Asian-Australasian Association of Animal Production Societies Animal Science Congress （ Kyushu Sangyo University, Fukuoka Japan ） 2016.8

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
座長（Chairmanship）

第108回日本繁殖生物学会（ Japan ） 2015.9

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
座長（Chairmanship）

第107回日本繁殖生物学会（ Japan ） 2014.8 - Present

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
第107回日本繁殖生物学会

（帯広畜産大学 Japan ） 2014.8

　More details

Type：Competition, symposium, etc.

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座長（Chairmanship）

第119回日本畜産学会（ Japan ） 2014.3 - Present

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
第119回日本畜産学会

（宇都宮大学峰キャンパス Japan ） 2014.3

　More details

Type：Competition, symposium, etc.

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座長（Chairmanship）

第106回日本繁殖生物学会（ Japan ） 2013.9 - Present

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
第106回日本繁殖生物学会

（東工大農学部府中キャンパス Japan ） 2013.9

　More details

Type：Competition, symposium, etc.

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座長（Chairmanship）

第117回日本畜産学会（ Japan ） 2013.9 - Present

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
第117回日本畜産学会

（新潟大学五十嵐キャンパス Japan ） 2013.9

　More details

Type：Competition, symposium, etc.

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座長（Chairmanship）

第116回日本畜産学会（ Japan ） 2013.3 - Present

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
第116回日本畜産学会

（安田女子大学キャンパス（広島） Japan ） 2013.3

　More details

Type：Competition, symposium, etc.

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実行委員会：会計

第5回日本暖地畜産学会（ Japan ） 2012.11

　More details

Type：Competition, symposium, etc.

Number of participants：116
座長（Chairmanship）

第105回日本繁殖生物学会（ Japan ） 2012.9 - Present

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
第105回日本繁殖生物学会

（筑波大学大学会館 Japan ） 2012.9

　More details

Type：Competition, symposium, etc.

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日本繁殖生物学会

Role(s)： Review, evaluation

2012.5

　More details

Type：Peer review

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座長（Chairmanship）

第104回日本繁殖生物学会（ Japan ） 2011.9 - Present

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
第104回日本繁殖生物学会

（アイーナホール（盛岡） Japan ） 2011.9

　More details

Type：Competition, symposium, etc.

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座長（Chairmanship）

第3回日本暖地畜産学会（ Japan ） 2010.10 - Present

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
第3回日本暖地畜産学会

（別府亀の井ホテル Japan ） 2010.10

　More details

Type：Competition, symposium, etc.

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座長（Chairmanship）

第103回日本繁殖生物学会（ Japan ） 2010.9 - Present

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
第103回日本繁殖生物学会

（北里大学（十和田） Japan ） 2010.9

　More details

Type：Competition, symposium, etc.

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座長（Chairmanship）

第112回日本畜産学会（ Japan ） 2010.3 - Present

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
第112回日本畜産学会

（明治大学駿河台キャンパス Japan ） 2010.3

　More details

Type：Competition, symposium, etc.

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座長（Chairmanship）

第111回日本畜産学会（ Japan ） 2009.9 - Present

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
座長（Chairmanship）

第102回日本繁殖生物学会（ Japan ） 2009.9 - Present

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
第102回日本繁殖生物学会

（近畿大学 Japan ） 2009.9

　More details

Type：Competition, symposium, etc.

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第111回日本畜産学会

（琉球大学（沖縄） Japan ） 2009.9

　More details

Type：Competition, symposium, etc.

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座長（Chairmanship）

第110回日本畜産学会（ Japan ） 2009.3 - Present

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
第110回日本畜産学会

（日本大学（藤沢） Japan ） 2009.3

　More details

Type：Competition, symposium, etc.

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座長（Chairmanship）

第59回西日本畜産学会（ Japan ） 2008.10 - Present

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
第59回西日本畜産学会

（佐賀大学 Japan ） 2008.10

　More details

Type：Competition, symposium, etc.

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司会（Moderator）

第101回日本繁殖生物学会（ Japan ） 2008.9 - Present

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
事務局長

第101回日本繁殖生物学会（ Japan ） 2008.9 - Present

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
第101回日本繁殖生物学会

（九州大学医学部百年講堂 Japan ） 2008.9

　More details

Type：Competition, symposium, etc.

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第101回日本繁殖生物学会

（九州大学 Japan ） 2008.9

　More details

Type：Competition, symposium, etc.

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座長（Chairmanship）

第108回日本畜産学会（ Japan ） 2008.3 - Present

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
第108回日本畜産学会

（常磐大学（水戸） Japan ） 2008.3

　More details

Type：Competition, symposium, etc.

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座長（Chairmanship）

第58回西日本畜産学会（ Japan ） 2007.10 - Present

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
第58回西日本畜産学会

（山口大学 Japan ） 2007.10

　More details

Type：Competition, symposium, etc.

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座長（Chairmanship）

第100回日本繁殖生物学会（ Japan ） 2007.9 - Present

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
第100回日本繁殖生物学会

（東京大学 Japan ） 2007.9

　More details

Type：Competition, symposium, etc.

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座長（Chairmanship）

第107回日本畜産学会（ Japan ） 2007.3 - Present

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
第107回日本畜産学会

（麻布大学 Japan ） 2007.3

　More details

Type：Competition, symposium, etc.

researchmap
座長（Chairmanship）

第57回西日本畜産学会（ Japan ） 2006.10 - Present

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
第57回西日本畜産学会

（熊本 Japan ） 2006.10

　More details

Type：Competition, symposium, etc.

researchmap
座長（Chairmanship）

第106回日本畜産学会（ Japan ） 2006.3 - Present

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
編集

第106回日本畜産学会（ Japan ） 2006.3 - Present

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
第106回日本畜産学会

（九州大学六本松キャンパス Japan ） 2006.3

　More details

Type：Competition, symposium, etc.

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座長（Chairmanship）

第56回西日本畜産学会（ Japan ） 2005.10 - Present

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
第56回西日本畜産学会

（鹿児島 Japan ） 2005.10

　More details

Type：Competition, symposium, etc.

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座長（Chairmanship）

第98回日本繁殖生物学会（ Japan ） 2005.9 - Present

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
第98回日本繁殖生物学会

（九州大学 Japan ） 2005.9

　More details

Type：Competition, symposium, etc.

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西日本畜産学会誌

Role(s)： Review, evaluation

2005.4

　More details

Type：Peer review

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座長（Chairmanship）

第55回西日本畜産学会（ Japan ） 2004.10 - Present

　More details

Type：Competition, symposium, etc.
第55回西日本畜産学会

（宮崎 Japan ） 2004.10

　More details

Type：Competition, symposium, etc.

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Research Projects

令和5年度旗影会研究調査助成/ウシ子宮内膜細胞におけるmiRNA 産生制御機構の解明

2023

　 More details

Grant type：Donation
Comprehensive analysis of bovine endometrial miRNAs and its function in the embryo elongation.

Grant number：22K05970 2022 - 2024

Japan Society for the Promotion of Science Grants-in-Aid for Scientific Research Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

山内伸彦

　 More details

Authorship：Principal investigator Grant type：Scientific research funding

ウシの妊娠過程における胚の消失のほとんどは、胚伸長期に起こることが報告されている。本研究はウシの受胎率向上を最終目標とし、近年注目されているmiRNAに着目し、そのウシ胚の伸長に対する機能的役割を明らかにする。三次元培養系で産生されたウシ子宮内膜エクソソームを回収し、そのmiRNAについて子宮灌流液と比較検討する。また、ウシ胚盤胞期胚由来の栄養膜細胞に対する影響を解析することで、胚伸長に対する影響を明らかにする。本申請研究によって、ウシ胚の伸長を制御して促進させる子宮内膜miRNAが明らかとなる。さらに、生体外で目的とするエクソソームを産生するための基礎技術を提供する。

CiNii Research
令和3年度畜産ニューテック協会研究調査助成

2021

　 More details

Grant type：Donation
令和3年度旗影会研究調査助成/三次元培養系を用いたウシ子宮内膜エクソソームの解析

2021

　 More details

Grant type：Donation
Trial of non-invasive picking of donor cells and production of cloned embryos for conservation of small wild cats

Grant number：19K22311 2019 - 2021

Grants-in-Aid for Scientific Research Grant-in-Aid for challenging Exploratory Research

Soh Tomoki

　 More details

Authorship：Coinvestigator(s) Grant type：Scientific research funding

The purpose of this study is to collect basic information for developing somatic cell cloning technology as a means of conserving small wild cats. We investigated the use of feces or urine for non-invasive picking of donor cells. It was shown that somatic cells can be collected from feces and urine of cats or from urine of cows and can be obtained efficiently by the double filter method. Recipient oocytes were obtained from neutered discarded ovaries of cats at a veterinary hospital. It was confirmed that normal and good oocytes were matured and easily enucleated by drug treatment. Due to the corona crisis, I was able to improve my manipulator manipulation skills by substituting bovine ovaries. As a result, nuclear transfer was performed using cumulus cells as donor cells, and cleavage was observed.

CiNii Research
研究寄付金

2019

　 More details

Grant type：Donation
妊娠認識時のウシ子宮改編に果たすオートファジーリソソーム応答機構の解明と制御

Grant number：15H04579 2015 - 2017

Japan Society for the Promotion of Science Grants-in-Aid for Scientific Research Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

　 More details

Authorship：Coinvestigator(s) Grant type：Scientific research funding
ウシ子宮内膜スフェロイドを用いた胚性分泌因子の解明

Grant number：26292141 2014 - 2016

Japan Society for the Promotion of Science Grants-in-Aid for Scientific Research Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

　 More details

Authorship：Principal investigator Grant type：Scientific research funding
着床過程におけるIhhの制御機構と機能の解明:子宮内膜スフェロイドを用いた解析

Grant number：25660214 2013 - 2015

Grants-in-Aid for Scientific Research Grant-in-Aid for challenging Exploratory Research

　 More details

Authorship：Principal investigator Grant type：Scientific research funding
研究寄付金

2013

　 More details

Grant type：Donation
ＲＮＡ干渉による着床期特異的遺伝子の機能解析

Grant number：21580349 2009 - 2011

Japan Society for the Promotion of Science Grants-in-Aid for Scientific Research Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

　 More details

Authorship：Principal investigator Grant type：Scientific research funding
デッドエンド遺伝子を使ったニワトリ始原生殖細胞の発生メカニズムの解明

Grant number：19658099 2007 - 2009

Grants-in-Aid for Scientific Research Grant-in-Aid for Exploratory Research

　 More details

Authorship：Coinvestigator(s) Grant type：Scientific research funding
子宮内膜スフェロイドを用いた生体外着床モデルの構築

Grant number：18580282 2006 - 2007

Japan Society for the Promotion of Science Grants-in-Aid for Scientific Research Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

　 More details

Authorship：Principal investigator Grant type：Scientific research funding
細胞の時を刻む分子リズム計測のシステム構築

Grant number：17658131 2005 - 2006

Grants-in-Aid for Scientific Research Grant-in-Aid for Exploratory Research

　 More details

Authorship：Coinvestigator(s) Grant type：Scientific research funding
伊藤記念財団平成17年度研究助成

2005

　 More details

Grant type：Donation
転写活性を可視化した卵子バイオモジュレーター検出系の開発と応用

Grant number：16380200 2004 - 2006

Japan Society for the Promotion of Science Grants-in-Aid for Scientific Research Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

　 More details

Authorship：Coinvestigator(s) Grant type：Scientific research funding
組織工学的手法を用いた子宮内膜スフェロイドの構築

Grant number：16580232 2004 - 2005

Japan Society for the Promotion of Science Grants-in-Aid for Scientific Research Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

　 More details

Authorship：Principal investigator Grant type：Scientific research funding

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Class subject

動物生殖生理学特論

2023.10 - 2023.12 Fall quarter
動物遺伝育種学II

2023.6 - 2023.8 Summer quarter
動物繁殖生理学II

2023.6 - 2023.8 Summer quarter
動物生殖生理学実験

2023.4 - 2024.3 Full year
生殖生物学特論

2023.4 - 2023.6 Spring quarter
動物繁殖生理学I

2023.4 - 2023.6 Spring quarter
動物遺伝育種学I

2023.4 - 2023.6 Spring quarter
Animal and Marine Life Science

2023.4 - 2023.6 Spring quarter
動物生殖生理学特論

2022.10 - 2022.12 Fall quarter
基幹教育セミナー

2022.6 - 2022.8 Summer quarter
動物繁殖生理学II

2022.6 - 2022.8 Summer quarter
動物遺伝育種学II

2022.6 - 2022.8 Summer quarter
動物生殖生理学実験

2022.4 - 2023.3 Full year
生殖生物学特論

2022.4 - 2022.6 Spring quarter
動物繁殖生理学I

2022.4 - 2022.6 Spring quarter
動物遺伝育種学I

2022.4 - 2022.6 Spring quarter
Animal and Marine Life Science

2022.4 - 2022.6 Spring quarter
動物生殖生理学特論

2021.10 - 2021.12 Fall quarter
基幹教育セミナー

2021.6 - 2021.8 Summer quarter
動物生殖生理学実験

2021.4 - 2022.3 Full year
動物生殖生理学

2021.4 - 2021.9 First semester
動物遺伝育種学

2021.4 - 2021.9 First semester
Animal and Marine Life Science

2021.4 - 2021.6 Spring quarter
Master's Thesis

2021.4 - 2021.6 Spring quarter
Seminar in a Specified Field Ⅱ

2021.4 - 2021.6 Spring quarter
Master's Thesis Research Ⅱ

2021.4 - 2021.6 Spring quarter
生殖生物学特論

2021.4 - 2021.6 Spring quarter
動物生殖生理学演習

2020.10 - 2021.3 Second semester
動物生産科学概論

2020.10 - 2021.3 Second semester
動物生殖生理学特論

2020.10 - 2020.12 Fall quarter
動物生殖生理学実験

2020.4 - 2021.3 Full year
卒業研究

2020.4 - 2021.3 Full year
農学入門II

2020.4 - 2021.3 Full year
生殖生理学講究演習

2020.4 - 2021.3 Full year
生殖生理学講究

2020.4 - 2021.3 Full year
動物資源科学特別演習

2020.4 - 2021.3 Full year
動物資源科学特別研究第二

2020.4 - 2021.3 Full year
動物資源科学特別研究第一

2020.4 - 2021.3 Full year
動物資源科学輪講

2020.4 - 2021.3 Full year
動物遺伝育種学

2020.4 - 2020.9 First semester
Animal and Marine Life Science

2020.4 - 2020.9 First semester
科学英語II

2020.4 - 2020.9 First semester
動物生殖生理学

2020.4 - 2020.9 First semester
生殖生物学特論

2020.4 - 2020.6 Spring quarter
動物生殖生理学演習

2019.10 - 2020.3 Second semester
動物生産科学概論

2019.10 - 2020.3 Second semester
動物生殖生理学特論

2019.10 - 2019.12 Fall quarter
動物生殖生理学実験

2019.4 - 2020.3 Full year
卒業研究

2019.4 - 2020.3 Full year
農学入門II

2019.4 - 2020.3 Full year
生殖生理学講究演習

2019.4 - 2020.3 Full year
生殖生理学講究

2019.4 - 2020.3 Full year
動物資源科学特別演習

2019.4 - 2020.3 Full year
動物資源科学特別研究第二

2019.4 - 2020.3 Full year
動物資源科学特別研究第一

2019.4 - 2020.3 Full year
動物資源科学輪講

2019.4 - 2020.3 Full year
動物遺伝育種学

2019.4 - 2019.9 First semester
Animal and Marine Life Science

2019.4 - 2019.9 First semester
科学英語II

2019.4 - 2019.9 First semester
動物生殖生理学

2019.4 - 2019.9 First semester
生殖生物学特論

2019.4 - 2019.6 Spring quarter
動物生殖生理学演習

2018.10 - 2019.3 Second semester
動物生産科学概論

2018.10 - 2019.3 Second semester
動物生殖生理学特論

2018.10 - 2018.12 Fall quarter
基幹教育セミナー

2018.6 - 2018.8 Summer quarter
動物資源科学輪講

2018.4 - 2019.3 Full year
動物生殖生理学実験

2018.4 - 2019.3 Full year
卒業研究

2018.4 - 2019.3 Full year
農学入門II

2018.4 - 2019.3 Full year
生殖生理学講究演習

2018.4 - 2019.3 Full year
生殖生理学講究

2018.4 - 2019.3 Full year
動物資源科学特別演習

2018.4 - 2019.3 Full year
動物資源科学特別研究第二

2018.4 - 2019.3 Full year
動物資源科学特別研究第一

2018.4 - 2019.3 Full year
科学英語II

2018.4 - 2018.9 First semester
動物生殖生理学

2018.4 - 2018.9 First semester
動物遺伝育種学

2018.4 - 2018.9 First semester
実地見学（アニマルサイエンス分野）

2018.4 - 2018.9 First semester
生殖生物学特論

2018.4 - 2018.6 Spring quarter
Animal and Marine Life Science

2018.4 - 2018.6 Spring quarter
学術英語3･個別ﾃｰﾏ

2017.10 - 2018.3 Second semester
動物生産科学概論

2017.10 - 2018.3 Second semester
動物生殖生理学演習

2017.10 - 2018.3 Second semester
動物生殖生理学特論

2017.10 - 2018.3 Second semester
基幹教育セミナー

2017.6 - 2017.8 Summer quarter
動物生殖生理学実験

2017.4 - 2018.3 Full year
卒業研究

2017.4 - 2018.3 Full year
農学入門II

2017.4 - 2018.3 Full year
生殖生理学講究演習

2017.4 - 2018.3 Full year
生殖生理学講究

2017.4 - 2018.3 Full year
動物資源科学特別演習

2017.4 - 2018.3 Full year
動物資源科学特別研究第二

2017.4 - 2018.3 Full year
動物資源科学特別研究第一

2017.4 - 2018.3 Full year
動物資源科学輪講

2017.4 - 2018.3 Full year
動物生殖生理学

2017.4 - 2017.9 First semester
科学英語II

2017.4 - 2017.9 First semester
Animal and Marine Life Science

2017.4 - 2017.9 First semester
生殖生物学特論

2017.4 - 2017.9 First semester
動物遺伝育種学

2017.4 - 2017.9 First semester
動物生殖生理学特論

2016.10 - 2017.3 Second semester
動物生産科学概論

2016.10 - 2017.3 Second semester
動物資源科学特別研究第一

2016.4 - 2017.3 Full year
動物生殖生理学実験

2016.4 - 2017.3 Full year
卒業研究

2016.4 - 2017.3 Full year
農学入門II

2016.4 - 2017.3 Full year
生殖生理学講究演習

2016.4 - 2017.3 Full year
生殖生理学講究

2016.4 - 2017.3 Full year
生殖生理学演習

2016.4 - 2017.3 Full year
動物資源科学特別演習

2016.4 - 2017.3 Full year
動物資源科学特別研究第二

2016.4 - 2017.3 Full year
生殖生物学特論

2016.4 - 2016.9 First semester
科学英語II

2016.4 - 2016.9 First semester
動物生殖生理学

2016.4 - 2016.9 First semester
動物遺伝育種学

2016.4 - 2016.9 First semester
Animal and Marine Life Science

2016.4 - 2016.9 First semester
動物生殖生理学特論

2015.10 - 2016.3 Second semester
動物生産科学概論

2015.10 - 2016.3 Second semester
動物資源科学輪講

2015.4 - 2016.3 Full year
生殖生理学演習

2015.4 - 2016.3 Full year
動物資源科学特別演習

2015.4 - 2016.3 Full year
動物資源科学特別研究第二

2015.4 - 2016.3 Full year
動物資源科学特別研究第一

2015.4 - 2016.3 Full year
生殖生理学講究

2015.4 - 2016.3 Full year
動物生殖生理学実験

2015.4 - 2016.3 Full year
卒業研究

2015.4 - 2016.3 Full year
農学入門II

2015.4 - 2016.3 Full year
生殖生理学講究演習

2015.4 - 2016.3 Full year
生殖生物学特論

2015.4 - 2015.9 First semester
Animal and Marine Life Science

2015.4 - 2015.9 First semester
科学英語II

2015.4 - 2015.9 First semester
動物生殖生理学

2015.4 - 2015.9 First semester
動物遺伝育種学

2015.4 - 2015.9 First semester
動物生殖生理学特論

2014.10 - 2015.3 Second semester
動物生産科学概論

2014.10 - 2015.3 Second semester
動物資源科学輪講

2014.4 - 2015.3 Full year
動物生殖生理学実験

2014.4 - 2015.3 Full year
卒業研究

2014.4 - 2015.3 Full year
農学入門II

2014.4 - 2015.3 Full year
生殖生理学講究演習

2014.4 - 2015.3 Full year
生殖生理学講究

2014.4 - 2015.3 Full year
生殖生理学演習

2014.4 - 2015.3 Full year
動物資源科学特別演習

2014.4 - 2015.3 Full year
動物資源科学特別研究第二

2014.4 - 2015.3 Full year
動物資源科学特別研究第一

2014.4 - 2015.3 Full year
生殖生物学特論

2014.4 - 2014.9 First semester
科学英語II

2014.4 - 2014.9 First semester
動物生殖生理学

2014.4 - 2014.9 First semester
Animal and Marine Life Science

2014.4 - 2014.9 First semester
動物生殖生理学特論

2013.10 - 2014.3 Second semester
動物生産科学概論

2013.10 - 2014.3 Second semester
動物資源科学輪講

2013.4 - 2014.3 Full year
家畜繁殖学実験

2013.4 - 2014.3 Full year
卒業研究

2013.4 - 2014.3 Full year
生殖生理学講究演習

2013.4 - 2014.3 Full year
生殖生理学講究

2013.4 - 2014.3 Full year
生殖生理学演習

2013.4 - 2014.3 Full year
動物資源科学特別演習

2013.4 - 2014.3 Full year
動物資源科学特別研究第二

2013.4 - 2014.3 Full year
動物資源科学特別研究第一

2013.4 - 2014.3 Full year
生殖生物学特論

2013.4 - 2013.9 First semester
科学英語II

2013.4 - 2013.9 First semester
動物生殖生理学

2013.4 - 2013.9 First semester
Animal and Marine Life Science

2013.4 - 2013.9 First semester
科学英語I

2012.10 - 2013.3 Second semester
動物生産科学概論

2012.10 - 2013.3 Second semester
動物生殖生理学特論

2012.10 - 2013.3 Second semester
動物資源科学輪講

2012.4 - 2013.3 Full year
家畜繁殖学実験

2012.4 - 2013.3 Full year
卒業研究

2012.4 - 2013.3 Full year
動物生産科学概要

2012.4 - 2013.3 Full year
生殖生理学講究演習

2012.4 - 2013.3 Full year
生殖生理学講究

2012.4 - 2013.3 Full year
生殖生理学演習

2012.4 - 2013.3 Full year
動物資源科学特別演習

2012.4 - 2013.3 Full year
動物資源科学特別研究第二

2012.4 - 2013.3 Full year
動物資源科学特別研究第一

2012.4 - 2013.3 Full year
生殖生物学特論

2012.4 - 2012.9 First semester
科学英語II

2012.4 - 2012.9 First semester
動物生殖生理学

2012.4 - 2012.9 First semester
動物生殖生理学特論

2011.10 - 2012.3 Second semester
動物生産科学概論

2011.10 - 2012.3 Second semester
動物資源科学輪講

2011.4 - 2012.3 Full year
家畜繁殖学実験

2011.4 - 2012.3 Full year
卒業研究

2011.4 - 2012.3 Full year
生殖生理学講究演習

2011.4 - 2012.3 Full year
生殖生理学講究

2011.4 - 2012.3 Full year
生殖生理学演習

2011.4 - 2012.3 Full year
動物資源科学特別演習

2011.4 - 2012.3 Full year
動物資源科学特別研究第二

2011.4 - 2012.3 Full year
動物資源科学特別研究第一

2011.4 - 2012.3 Full year
生殖生物学特論

2011.4 - 2011.9 First semester
科学英語II

2011.4 - 2011.9 First semester
動物生殖生理学

2011.4 - 2011.9 First semester
動物生殖生理学特論

2010.10 - 2011.3 Second semester
動物資源科学輪講

2010.4 - 2011.3 Full year
家畜繁殖学実験

2010.4 - 2011.3 Full year
卒業研究

2010.4 - 2011.3 Full year
動物生産科学概要

2010.4 - 2011.3 Full year
生殖生理学講究演習

2010.4 - 2011.3 Full year
生殖生理学講究

2010.4 - 2011.3 Full year
生殖生理学演習

2010.4 - 2011.3 Full year
動物生理学演習

2010.4 - 2011.3 Full year
動物資源科学特別演習

2010.4 - 2011.3 Full year
動物資源科学特別研究第二

2010.4 - 2011.3 Full year
動物資源科学特別研究第一

2010.4 - 2011.3 Full year
生殖生物学特論

2010.4 - 2010.9 First semester
科学英語II

2010.4 - 2010.9 First semester
動物生殖生理学

2010.4 - 2010.9 First semester
生殖生理学特論

2009.10 - 2010.3 Second semester
動物生産科学概論

2009.10 - 2010.3 Second semester
動物資源科学輪講

2009.4 - 2010.3 Full year
家畜繁殖学実験

2009.4 - 2010.3 Full year
卒業研究

2009.4 - 2010.3 Full year
生殖生理学講究演習

2009.4 - 2010.3 Full year
生殖生理学講究

2009.4 - 2010.3 Full year
生殖生理学演習

2009.4 - 2010.3 Full year
動物生理学演習

2009.4 - 2010.3 Full year
動物資源科学特別演習

2009.4 - 2010.3 Full year
動物資源科学特別研究第二

2009.4 - 2010.3 Full year
動物資源科学特別研究第一

2009.4 - 2010.3 Full year
動物生理学特論

2009.4 - 2009.9 First semester
科学英語II

2009.4 - 2009.9 First semester
動物生殖生理学

2009.4 - 2009.9 First semester
生殖生理学特論

2008.10 - 2009.3 Second semester
動物資源科学輪講

2008.4 - 2009.3 Full year
家畜繁殖学実験

2008.4 - 2009.3 Full year
動物生産科学概要

2008.4 - 2009.3 Full year
動物生理学特論

2008.4 - 2008.9 First semester
科学英語II

2008.4 - 2008.9 First semester
動物生殖生理学

2008.4 - 2008.9 First semester
コアセミナー

2008.4 - 2008.9 First semester
科学英語I

2007.10 - 2008.3 Second semester
生殖生理学特論

2007.10 - 2008.3 Second semester
動物生産科学概論

2007.10 - 2008.3 Second semester
家畜繁殖学実験

2007.4 - 2008.3 Full year
動物資源科学輪講

2007.4 - 2008.3 Full year
科学英語II

2007.4 - 2007.9 First semester
家畜繁殖学

2007.4 - 2007.9 First semester
生殖生理学特論

2006.10 - 2007.3 Second semester
基礎動物学

2006.4 - 2007.3 Full year
家畜繁殖学実験

2006.4 - 2007.3 Full year
動物資源科学輪講

2006.4 - 2007.3 Full year
家畜繁殖学

2006.4 - 2006.9 First semester
科学英語II

2006.4 - 2006.9 First semester
生殖生理学特論

2005.10 - 2006.3 Second semester
動物資源科学輪講

2005.4 - 2006.3 Full year
家畜繁殖学実験

2005.4 - 2006.3 Full year
基礎動物学

2005.4 - 2006.3 Full year
科学英語II

2005.4 - 2005.9 First semester
家畜繁殖学

2005.4 - 2005.9 First semester
家畜繁殖学実験

2004.4 - 2005.3 Full year
基礎動物学

2004.4 - 2005.3 Full year
科学英語II

2004.4 - 2004.9 First semester
家畜繁殖学実験

2003.4 - 2004.3 Full year
基礎動物学

2003.4 - 2004.3 Full year
科学英語II

2003.4 - 2003.9 First semester

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FD Participation

2018.2 Role：Participation Title：科研費「特設分野研究」について

Organizer：[Undergraduate school/graduate school/graduate faculty]
2014.7 Role：Participation Title：ハラスメント防止の要点

Organizer：[Undergraduate school/graduate school/graduate faculty]
2013.11 Role：Participation Title：平成25年度博士課程教育リーディングプログラム「持続可能な社会を開く決断科学大学院プログラム」について

Organizer：[Undergraduate school/graduate school/graduate faculty]
2012.3 Role：Participation Title：農学部国際コースの専攻教育に付いて

Organizer：[Undergraduate school/graduate school/graduate faculty]
2011.8 Role：Participation Title：科研費および省庁大型研究費のヒアリングの準備に向けて

Organizer：[Undergraduate school/graduate school/graduate faculty]
2011.7 Role：Participation Title：こころが不調になった学生の理解と接し方 −メンタルヘルスの基礎知識−

Organizer：[Undergraduate school/graduate school/graduate faculty]
2011.3 Role：Participation Title：ポストIPAAEに向けて

Organizer：[Undergraduate school/graduate school/graduate faculty]
2010.9 Role：Participation Title：G30農学部国際コースについて

Organizer：[Undergraduate school/graduate school/graduate faculty]
2010.7 Role：Participation Title：農学研究院サバティカル（特別研究期間）の運用について

Organizer：[Undergraduate school/graduate school/graduate faculty]
2010.4 Role：Participation Title：学府再編に伴うカリキュラムの改正について

Organizer：[Undergraduate school/graduate school/graduate faculty]
2010.2 Role：Participation Title：九州大学農学部における管理下に無い放射性同位元素等に関する一斉点検の実施についての説明会

Organizer：[Undergraduate school/graduate school/graduate faculty]
2009.9 Role：Participation Title：動物実験における麻薬・向精神約等の使用について

Organizer：[Undergraduate school/graduate school/graduate faculty]
2009.8 Role：Participation Title：農学研究院部門組織再編の基本方針等について

Organizer：[Undergraduate school/graduate school/graduate faculty]
2009.4 Role：Participation Title：ＧＰＡ制度について

Organizer：[Undergraduate school/graduate school/graduate faculty]
2008.12 Role：Participation Title：九州大学大学院生物資源環境科学府の改組

Organizer：[Undergraduate school/graduate school/graduate faculty]
2008.6 Role：Participation Title：男女共同参画社会の推進とセクシャル・ハラスメント

Organizer：[Undergraduate school/graduate school/graduate faculty]
2008.5 Role：Participation Title：「九州大学の教育研究と学生生活に関する大学院生アンケート」の分析

Organizer：[Undergraduate school/graduate school/graduate faculty]
2007.12 Role：Participation Title：学習指導法（ファシリテーション）について

Organizer：[Undergraduate school/graduate school/graduate faculty]
2007.9 Role：Participation Title：大学における安全衛生管理について

Organizer：[Undergraduate school/graduate school/graduate faculty]
2007.6 Role：Participation Title：安心して学び・働けるキャンパスをつくるために

Organizer：[Undergraduate school/graduate school/graduate faculty]
2006.7 Role：Participation Title：安全管理について、ｅ−ラーニングについて

Organizer：[Undergraduate school/graduate school/graduate faculty]
2006.5 Role：Participation Title：学生指導について

Organizer：[Undergraduate school/graduate school/graduate faculty]
2006.3 Role：Participation Title：ＧＰＡ制度について

Organizer：[Undergraduate school/graduate school/graduate faculty]
2004.7 Role：Participation Title：学生のメンタルヘルスに関する最近の話題−健康相談室か

Organizer：[Undergraduate school/graduate school/graduate faculty]

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Participation in international educational events, etc.

2018.11

Korean Society of Embryo Transfer

The 18th International Symposium on Developmental Biotechnology

　 More details

Venue：Seoul National University, Korea
2017.9

The Society of Reproduction and Development

Fourth World Congress of Reproductive Biology

　 More details

Venue：Okinawa, Japan
2016.8

The 17th Animal Science Congress of the AAAP (Japan, 2016) National Organizing Committee for Technical Program (NOC-TEP)

The 17th AAAP Animal Science Congress

　 More details

Venue：Fukuoka, Japan
2016.3

九州大学農学部

九州大学と北アリゾナ大学との交換留学に関する会議に出席するため現地を訪問した

　 More details

Venue：米国、アリゾナ、フラッグスタッフ

Number of participants：20
2015.6

Biology of Reproduction

Society for the Study of Reproduction, 48th Annual Meeting

　 More details

Venue：San Juan, Perto Rico
2014.11

The 16th Animal Science Congress of the AAAP (Indonesia, 2014) National Organizing Committee for Technical Program (NOC-TEP)

The 16th AAAP Animal Science Congress

　 More details

Venue：Yogyakarta, Indonesia
2013.11

Ｇ３０推進事務局

Ｇ３０推進事務局が主催した米国サンフランシスコ及びバークレーでの日本留学説明会に参加し、セッション参加やブース対応等を行った。

　 More details

Venue：米国、サンフランシスコ、バークレー

Number of participants：150
2012.11

The 15th Animal Science Congress of the AAAP (Thailand, 2012) National Organizing Committee for Technical Program (NOC-TEP)

The 15th AAAP Animal Science Congress

　 More details

Venue：Bangkok, Thailand
2009.11

Borei Angkor Hotel

The 6th Annual Conference of the Asian Reproductive Biotechnology Society

　 More details

Venue：Siem Reap, Cambodia
2008.9

Cheju National Unversity

Asia Pacific Region Environmental Agriculture Symposium

　 More details

Venue：Jeju, Korea
2006.10

Kangwon National Unversity

The 3rd International Joint Symposium between Korea and Japan

　 More details

Venue：Chun Cheon, Korea
2006.9

Korean Society of Animal Science & Technology, Federation of Korean Societies of Animal Sciences

XIIth AAAP Animal Science Congress

　 More details

Venue：Busan, Korea
2005.7

Biology of Reproduction

Society for the Study of Reproduction, 33th Annual Meeting

　 More details

Venue：Quebec, Canada
2004.11

Chungnam National Unversity

International Joint Symposium between Korea and Japan

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Venue：Daejeon, Korea
2003.7

Biology of Reproduction

Society for the Study of Reproduction, 33th Annual Meeting

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Venue：Cincinati, Ohio, USA

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Other educational activity and Special note

2022 Coaching of Students' Association 九州大学馬術部

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部長
2021 Coaching of Students' Association 九州大学馬術部

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部長
2020 Coaching of Students' Association 九州大学馬術部

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部長
2019 Coaching of Students' Association 九州大学馬術部

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部長
2018 Coaching of Students' Association 九州大学馬術部

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部長
2017 Coaching of Students' Association 九州大学馬術部

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部長
2016 Coaching of Students' Association 九州大学馬術部

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部長
2015 Coaching of Students' Association 九州大学馬術部

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部長
2014 Coaching of Students' Association 九州大学馬術部

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部長
2013 Class Teacher 学部
2005 Class Teacher 学部

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Outline of Social Contribution and International Cooperation activities

特になし

Acceptance of Foreign Researchers, etc.

バングラディッシュ農業大学・動物繁殖遺伝学分野

Acceptance period： 2022.9 （Period）：1 month or more

Nationality：Bangladesh
Fac. of Agric., Kafrelsheikh Univ.

Acceptance period： 2015.4 - 2016.9 （Period）：1 month or more

Nationality：Egypt

Travel Abroad

2019.8

Staying countory name 1：Korea, Republic of Staying institution name 1：忠南大学
2018.12

Staying countory name 1：China Staying institution name 1：西北農林技術大学（中国陝西省楊凌）
2018.11

Staying countory name 1：Korea, Republic of Staying institution name 1：Korean EmbryoTransfers
2018.3

Staying countory name 1：China Staying institution name 1：西北農林技術大学（中国陝西省楊凌）
2018.2

Staying countory name 1：Korea, Republic of Staying institution name 1：忠南大学
2012.9

Staying countory name 1：Bangladesh Staying institution name 1：Chiang Mai University Demonstration School, Prince Royal’s College, Amnuay Silpa School, Satriwithaya School、Suankularb Wittayalai School、Wattana Wittaya Academy

Staying countory name 2：Thailand
2011.9

Staying countory name 1：Bangladesh Staying institution name 1：バングラディッシュ農業大学

Staying countory name 2：Other

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