九州大学 研究者情報
発表一覧
藤田 弘毅(ふじた こうき) データ更新日:2024.04.02

助教 /  農学研究院 環境農学部門 サスティナブル資源科学講座


学会発表等
1. 松久 直文、藤田 弘毅、堤 祐司, rCWPO-Cを用いた人工細胞壁上でのシリンギル型リグニンの成長反応促進因子の探索 , 第74回日本木材学会(京都), 2024.03.
2. 伊佐 亜希子、藤田 弘毅、井倉 則之、藤本 登留、清水 邦義、谷 和樹2、小藤田 久義、光永 徹、芦谷 竜矢、須原 弘登6、加藤 政和, 単一試験室および室間共同試験によるスギ材抽出成分(テルペン類)分析法の妥当性確認 , 第74回日本木材学会(京都), 2024.03.
3. 周子堯 、坂井志帆 、山本怜奈 、藤田弘毅 、重藤潤 、堤祐司, CWPO-Cオーソログ、シロイヌナズナAtPrx71の植物成長調節機能 , 第74回日本木材学会(京都), 2024.03, ポプラ(Populus alba L.)由来の万能ペルオキシダーゼ、CWPO-C は成長旺盛な茎先端部や若い葉において強く発現する。また、シロイヌナズナの CWPO-C 過剰発現体はオーキシン欠乏性の表現型を示し、内生 IAA 量は野生型の約 1/10 に低下したこと、ならに in vitro 条件でリコンビナント CWPO-C はインドール-3-酢酸(IAA)を不活性な化合物へ代謝することが確認された[1]。これらのことから、CWPO-C はオーキシン不活性化を介して植物の成長を制御する可能性が示唆さ
れた。シロイヌナズナ AtPrx71 は CWPO-C とアミノ酸配列の相同性が高く、リコンビナント AtPrx71の基質反応特性は CWPO-C と非常に類似していることから、AtPrx71 は CWPO-C のオーソログだと考えられる。従って、AtPrx71 も CWPO-C と同様にオーキシンの不活性化を介し、分化や成長に対して抑制的に働いている可能性が予想された。そこで本研究では、AtPrx71 に注目し、シロイヌナズナ野生型(以降 WT)、AtPrx71 欠損変異体(以降、KO)と AtPrx71 過剰発現体(以降、OE)について、主茎の成長や重力応答屈性についてCWPO-C 過剰発現体との比較を行うとともに、主茎基部切片染色と GUS 染色を行い、AtPrx71 ならびに CWPO-C の植物成長における機能を明らかにすることを目的とした。.
4. 周子堯 、坂井志帆 、山本怜奈 、藤田弘毅 、重藤潤 、堤祐司, 欠損変異体および過剰発現体を用いた CWPO-C オーソログ、AtPrx71 の成長調節機能解析, 第29回日本木材学会九州支部大会, 2023.09, モデル植物であるシロイヌナズナのAtPrx71 に注目し、シロイヌナズナ野生型(以降WT)、AtPrx71 欠損変異体(以降、KO)とAtPrx71 過剰発現体(以降、OE)について、主茎の成長や重力応答による屈性試験を行い、CWPO-C 過剰発現体との比較を行うことで、AtPrx71 ならびにCWPO-C の植物成長における機能を明らかにすることを目的とした。.
5. 谷 和樹、伊佐 亜希子、藤田 弘毅、藤本 登留、芦谷 竜矢、清水 邦義 , 機能性表示無垢スギ材創出を目指したスギ含有抽出成分(セスキテルペン類)の分析JAS法開発への取り組み, 第73回日本木材学会福岡大会, 2023.04, 近年、内装・建築材として使われるスギ材が含有している揮発成分(セスキテルペン類)は人に対し、良好な生理・心理応答、さらに、抗菌・抗シロアリ・抗ダニ効果等を示す事が明らかになった。一方で、スギ材の機能性について述べる際に重要なセスキテルペン量に着目した、規格化されたセスキテルペン類の分析方法は、現時点で存在しない。当研究室では、これまで、スギ材の更なる需要を高めるために、スギ材に含有される機能性成分であるセスキテルペン類の分析法の確立に取り組んできた。本研究では、JAS化を目指すべく確立したGC-MSを用いた分析方法の妥当性を確認するために、単一試験室による各種妥当性確認試験を行った。その結果から、スギ含有成分を定量的に検出する分析方法は、単一試験室においては妥当であると考えられた。.
6. 宮田 宗史朗、山本 怜奈、重藤 潤、坂井 志帆、松井 友里、藤田 弘毅、堤 祐司1, CWPO-CオーソログであるAtPrx2、AtPrx25、AtPrx71をノックアウトしたシロイヌナズナ欠損体の成長とその制御作用, 第73回日本木材学会福岡大会, 2023.04, CWPO-Cはオーキシン代謝不活性化を介して植物の成長を制御する可能性が示唆されている。CWPO-Cのオーソログと考えられているシロイヌナズナAtPrx2、AtPrx25、AtPrx71の欠損体を用いた表現型観察および部位別相対発現定量においてAtPrx71欠損体は主茎が3,4週齢で野生型よりも有意に長く、AtPrx71の発現量は4,6週齢の主茎頂端部で最も多かった。加えてAtPrx25欠損体は根が野生型よりも有意に長く、AtPrx25の発現量は根で著しく多いことがわかった。これらの結果はCWPO-Cと酸化における基質特性が類似しているAtPrx71、AtPrx25がそれぞれ茎と根という異なる器官において、オーキシン代謝不活性化を介した成長の抑制的制御というCWPO-Cと同様の機能を持つ可能性を示唆した。.
7. 松久 直文、田村 剛、川口 なつみ、藤田 弘毅、堤 祐司, rCWPO-Cを用いた人工細胞壁形成におけるシリンギル型モノリグノールの重合と凝集形態解析, 第73回日本木材学会福岡大会, 2023.04.
8. Diego Yoshikay, Kaori Ohira, Koki Fujita, Jun Shigeto, Yuji Tsutsumi, The cationic cell-wall-bound peroxidase (CWPO-C) involved in plant growth and lignification in Poplar, 第73回日本木材学会福岡大会, 2023.04, Previously, our reports demonstrated that the cationic cell-wall-bound Prx (CWPO-C) from Populus alba can efficiently oxidize lignin monomers in vitro, including sinapyl alcohol, and high molecular weight lignin polymers. Then, we characterized the possible in vivo function of CWPO-C on the basis of localization of gene expression and heterologous expression system in Arabidopsis thaliana. The results showed that CWPO-C contributed to differentiation of early growth and was involved in auxin catabolism. In this study, the physiological function of CWPO-C in Populus alba was also characterized on the basis of localization of gene expression using transgenic plants expressing β-glucuronidase (GUS) under the control of the CWPO-C promoter. As well, the phenotypic traits of CWPO-C-overexpressing (OE) and CWPO-C-suppressing (RNAi) in transgenic poplar lines were investigated. By, Real time PCR analysis and observed promoter activity of CWPO-C, it was revealed that CWPO-C was strongly expressed in immature tissues such as the apical bud, axillary buds and young leaves. In OE1 line, the stem growth was enhanced, as well as, the gravitropic bending time was accelerated in comparison to wild-type (WT). These results suggest that CWPO-C possibly affects auxin accumulation in poplar. On the other hand, the lignin content in RNAi1 was significantly lower, by 45%, than in the WT and OE1. Moreover, the syringyl/guaiacyl (S/G) ratio determined by the DFRC monomers was also decreased in RNAi1. These results indicated that CWPO-C plays a role in differentiation and plant growth in early stage, as well as in lignin polymerization..
9. 岸田 文、中島 大輔、谷 和樹、伊佐 亜希子、吉野 紀美香、藤田 弘毅、藤本 登留、渡邉 雄一郎、安成 信次、清水 邦義, スギ内装材量の違いが心理的・生理的反応に及ぼす影響, 第73回日本木材学会福岡大会, 2023.03, 本研究では、健康な男女大学生10名を対象とし、無垢のスギ材を内装材として用いた場合のスギ板材の枚数を変化させ、木材量が生理心理反応に及ぼす影響を検討した。試験室内に無垢のスギ材と木目調のビニルクロスを貼った樹脂系建材の2種を壁面に設置した。試験室内のスギ材量を変化させ(スギ板材パネルの枚数:0,5,7,9枚)、その際の生理心理反応を測定した。被験者は試験室内で視覚刺激弁別課題を行った。その結果、試験室のスギ内装材が0, 5, 7枚の時には、課題時とその前後の安静時における生理反応に有意な差がなかった。しかし、9枚条件にすると、課題時と比べてその前後の安静時の方が、RR間隔が有意に延長していることが分かった。このことから、スギ内装材の量により生理心理反応は異なり、特にRR間隔を生理的反応の指標とした場合には、一定のスギ材由来揮発成分が存在する場合にリラックス効果が有意に亢進することが示唆された。.
10. 岸田文,中島大輔,土山真未,孫良昊,谷和樹,伊佐亜希子,東房健一,藤田弘毅,藤本登留,清水邦義, スギ材内装由来の揮発性成分総量が心理的・生理的反応に及ぼす影響, 第28回日本木材学会九州支部大会, 2022.11, スギ材(Cryptomeria japonica)を内装材として用いた場合の木材量を変化させることで揮発性成分量を変化させ、木材量がヒトの心理・生理反応に及ぼす影響を検討した。.
11. 谷和樹、伊佐亜希子、東房健一、藤田弘毅、藤本登留、清水邦義, 機能性表示無垢スギ材創出を目指したスギ含有抽出成分(テルペン類)の分析 JAS法開発への取り組み, 第28回日本木材学会九州支部大会, 2022.11, JAS制度を活用し、スギ材の更なる需要を高めるために、JAS化を目指したスギに含有される機能性成分であるテルペン類の分析法について報告する。.
12. Diego Alonso Yoshikay-Benitez, Yusuke Yokoyama, Kaori Ohira, Koki Fujita, Azusa Tomiie, Yoshio Kijidani, Jun Shigeto, Yuji Tsutsumi, Indole-3-acetic acid (IAA) auxin catabolized by Class III CWPO-C peroxidase, 第28回日本木材学会九州支部大会, 2022.11, Our results demonstrated that the overexpression of CWPO-C, decreased the IAA content in Arabidopsis and resulted in the phenotype that is consistent with the typical traits of the auxin deficiency. This strongly suggests that CWPO-C plays a role in the regulation of plant growth through the catabolizing IAA..
13. 田丸 寛, 林 純也, 藤田 弘毅, 堤 裕司, タケアルカリリグニン分解物の抗酸化活性およびα-グルコシダーゼ阻害活性, 第72回日本木材学会大会(名古屋・岐阜大会), 2022.03, タケ材の有効利用とタケリグニンの効果的な活用に向けて、タケ由来のアルカリリグニンから抗酸化活性物質およびα-グルコシダーゼ阻害活性物質の探索を行った。タケアルカリリグニンから酸不溶性の沈殿画分を除いた上清画分に対して合成樹脂HP20を用いてエタノールグラディエントによる分画を行い、得られた各画分の両活性を測定した。その結果、ポジティブコントロールとして用いたジブチルヒドロキシトルエンより高い抗酸化活性を有する画分およびアカルボースよりも高いα-グルコシダーゼ阻害活性を有する画分が得られた。また、GC/MSによりタケアルカリリグニン分解物に含まれる主要な抗酸化活性物質はシリンガ酸であることが明らかとなった。さらに、高いα-グルコシダーゼ阻害活性を示した画分は、ダイマー以上の分子サイズを有するリグニン画分であることが明らかとなった。.
14. 松久 直文, 田村 剛, 川口 なつみ, 藤田 弘毅, 堤 裕司, rCWPO-Cを用いたフェルラ酸を足場とするシリンギルリグニンセルロース複合体フィルムの創製, 第72回日本木材学会大会(名古屋・岐阜大会), 2022.03, 本研究では細胞二次壁の構造を模倣した新規リグノセルロースフィルムの創製を目的としている。そこで今回NOCフィルム上にリグニン重合の起点となるフェルラ酸(FA)の量を変動させた2種類のFAエステル化キシログルカン(XG)を吸着させた。次いで一般的なペルオキシダーゼでは酸化することのできないシナピルアルコール(SA)やリグニンポリマーを酸化できるCWPO-Cのリコンビナント酵素(rCWPO-C)によりFAを起点としてSAをフィルム上で脱水素重合させ、シリンギルリグニンセルロース複合体フィルム(SLCF)を創製した。SLCFではFA量が増えるほどに、脱水素重合物(DHP)量が増加した。また接触角はNOCでは68度、SLCFでは118度になり、DHPの結合による疎水性の向上が確認された。.
15. 宮田 宗史朗, 藤田 弘毅, 堤 裕司, 雉子谷 佳男, CWPO-CによるIAA代謝を介した植物の成長制御, 第72回日本木材学会大会(名古屋・岐阜大会), 2022.03, CWPO-C過剰発現シロイヌナズナはインドール-3-酢酸(IAA)欠乏性の表現型を示す。またrCWPO-CはIAAを、一般的な代謝物である2-オキソインドール-3-酢酸(OxIAA)とは異なる2つの化合物に変換する。これらの知見から「CWPO-CがIAAを代謝し、オーキシン量を調整することで植物の成長を制御している」という仮説が立てられた。本研究では、IAA代謝物を単離し、NMR分析に供した。結果、IAAの直接の代謝物を3-ヒドロキシメチルオキソインドール(HMO)、最終生成物を3-メチレンオキソインドール(MO)と同定した。また、野生型シロイヌナズナの抽出物中にこれらの代謝物が検出され、CWPO-CによるIAA代謝と同じ反応が植物体内でも行われている可能性を示唆した。.
16. 春田 黎暉, 藤田 弘毅, 堤 裕司, 化学、物理的刺激に対するCupressus lusitanica無菌発芽実生の防御機能, 第72回日本木材学会大会(名古屋・岐阜大会), 2022.03, Cupressus lusitanica培養細胞は、ストレス情報伝達経路かつ心材成分で抗菌性を持つhinokitiolの生成を促すテルペン放出カスケードを持つ。一方、実生での情報伝達や防御物質に関する情報は少ないため、本研究では実生を対象に刺激に対する気中及び抽出物分析を行った。
結果、実生では培養細胞と同一のシグナル伝達経路は一部存在しているが機能していないと思われた。また、hinokitiolは検討したすべての条件で生産されなかった。一方、caryophylleneの気相への放出が酵母抽出物滴下及び葉または根を切断した個体ではみられたが、コントロール類及びテルペン類ではほぼ確認されなかった。抽出物の分析では全ての条件でcaryophylleneの存在が確認された。よって、実生はcaryophylleneを常に蓄積し、エリシター及び物理的刺激に対し防御物質として気相へ放出すると思われる。.
17. 林 純也, 廣島 将大, 清水 邦義, 藤田 弘毅, 堤 裕司, タケアルカリリグニン分解物のα-グルコシダーゼ阻害活性, 第65回リグニン討論会, 2020.11.
18. 河野陽平, 福永史, 藤田弘毅, 堤 祐司, アルカリ蒸解タケリグニン由来カーボンファイバーの調製, 第68回日本木材学会大会(京都), 2018.03, 新たにアルカリ蒸解法で得られたタケリグニン(アルカリタケリグニン)を原料として、 CA を添加した CF の調製を行い、PEG・バイサルファイト法で調製した CF と比較した。.
19. 河野 陽平, 福永 史, 藤田 弘毅, 堤 祐司, PEG・バイサルファイト法タケ液化物を用いたエレクトロスピニング処理によるカーボンファイバーの調製, 第62回リグニン討論会(名古屋), 2017.10, Liquefaction of whole bamboo and bamboo-lignin had been successfully performed by PEG-bisulfite method. We tried production of carbon fiber (CF) from liquefied bamboo with cellulose acetate or cellulose triacetate by electrospinning and carbonization treatment. The CF products were analyzed with field emission-type scanning electron microscopy (FE-SEM) and Raman spectrometry. FE-SEM micrographs showed the fibrous structures with average diameters ca. 30 nm from cellulose triacetate and liquefied bamboo-lignin cooked at 200°C for 60 min. As the results of Raman spectrometry, this CF indicated the highest degree of graphite among the other samples. This PEG-bisulfite liquefaction can be used for preparation of the CF from bamboo and bamboo lignin..
20. 福永 史, 河野 陽平, 藤田 弘毅, 堤 祐司, 酢酸セルロースを添加したPEG・バイサルファイト法タケ液化物からのカーボンファイバーの調製, 第24回日本木材学会九州支部大会(福岡), 2017.09, PEG・バイサルファイト法で得られた液化物に酢酸セルロースもしくは三酢酸セルロースを添加してエレクトロスピニングおよび炭化処理を行い、カーボンファイバーの調製を試みた。.
21. 河野 陽平, 藤田 弘毅, 堤 祐司, PEG・バイサルファイト法による液化したタケリグニンを原料とするカーボン材料, 第84回紙パルプ研究発表会(東京), 2017.06, PEG・バイサルファイト法によるタケの液化によって、リグニンの選択的液化あるいは多糖画分を含めて高い液化条件を前回報告した。今回は、タケリグニンの高付加価値化として、各液化物を炭化処理し、カーボン材料の調製を試みたので分光学的特性と共に報告する。.
22. 羽明 駿, 藤田 弘毅, 堤 祐司, モノテルペンを媒体とした連鎖的シグナリング スギ・ヒノキ・メキシコイトスギ各培養細胞での比較, 第67回日本木材学会大会(福岡), 2017.03, 植物は揮発性有機化合物(VOC)を放出し,シグナルとして利用する。我々はメキシコイトスギ培養細胞が4種のモノテルペンを気相に放出,感知し,連鎖的なシグナル伝達を行うことを明らかにしているが,このような連鎖的シグナリングについて他樹種での知見はほとんど得られていない。モノテルペンによるシグナル伝達の普遍性や樹種間コミュニケーションの可能性についての議論を目標とし,本研究では,スギ,ヒノキの培養細胞のシグナル伝達経路について調べた。今回,ヒノキおよびスギ培養細胞が外因性のモノテルペン暴露に対して示した反応について報告する。実験の結果,メキシコイトスギ培養細胞のシグナル伝達経路は,ヒノキ培養細胞の経路と大部分が共通しており,スギ培養細胞の経路とは一部のみが共通であることが明らかになった。.
23. 西條裕美, 吉村友里, 本傳晃義, 藤田 弘毅, 藤本 登留, 清水邦義, 永野 純, 山田祐樹, 岡本 剛, 大貫宏一郎, 石川洋哉, スギ材を使用した建物の室内空間における揮発性成分の分析およびその季節変動Ⅱ, 第67回日本木材学会大会(福岡), 2017.03, スギの無垢材を内装に用いた建物と表面が塗装やビニールクロスで覆われた内装材を用いた建物の室内において,年間を通して揮発性成分を定期的に捕集し,ガスクロマトグラフ質量分析計(GC/MS)により分析を行い,比較した。分析したところ,どちらの実験棟においても,気温が低い冬季と比較して,気温の高い夏季でセスキテルペン類の濃度が高くなる傾向が見られた。.
24. 岡崎嘉孝, 藤田 弘毅, 堤 祐司, 髙田依里, 増村竜史, 田畑研二, 亀井一郎, ソーダAQ処理によるタケリグニンの単離と物質変換, 第67回日本木材学会大会(福岡), 2017.03, タケリグニンの新たな利用法の開発にむけて,これまでの研究では脱脂タケから亜リン酸水熱処理とソーダアントラキノン処理によりリグニンを分離した。しかし,得られたリグニンの構造解析の結果,非縮合型構造が減少しており,水素化によるリグニン由来低分子化合物の収率が低かった。そこで,今回は直接ソーダAQ 処理によりリグニンを単離した。処理後の各試料の化学組成分析を行い,単離条件の最適化を検索し,また単離条件に伴うリグニンの化学構造変化も解析した。.
25. 段 夢弘, 河野陽平, 藤田 弘毅, 堤 祐司, PEG・バイサルファイト法による液化したタケリグニンを原料とするカーボンナノ材料の調製, 第67回日本木材学会大会(福岡), 2017.03, 近年,竹林拡大による森林荒廃が重要な問題として指摘されており,竹の活用方法が求められている。その中でも,タケの主要成分であるリグニンは複雑な三次元構造を有する高分子のため,未だに高付加価値化する画期的な手法が報告されていない。本研究では,PEG・バイサルファイト法がタケ液化に有効であることを検討した。その結果,処理温度200℃においてリグニンを選択的に液化可能にすることを見出し,処理温度250℃において多糖画分を含めて高い可溶化を示した。また,両方の処理温度においてエレクトロスピニング法および炭化処理を液化物に適用することによりカーボンナノファイバーの調製を試みた。各液化物由来の炭化試料に対するXRD 測定法による結晶性の評価結果,ならびに,各炭化試料の形態観察結果についても報告する。.
26. 河野陽平, 段 夢弘, 藤田 弘毅, 堤 祐司, PEG・バイサルファイト法によるタケリグニン液化物から調製したカーボンファイバー, 第67回日本木材学会大会(福岡), 2017.03, 近年,国内タケの新規用途開発が求められているが,未だにタケの主要成分であるリグニンの画期的な利用手法は報告されていない。本研究室では,PEG・バイサルファイト法をタケに適用することにより,タケ/PEG・バイサルファイト液化物の調製を行った結果,処理温度200℃においてリグニンのみを選択的に液化可能にすることを見出した。本発表では,タケ液化物の新規利用法として,エレクトロスピニング法および炭化処理を液化物に適用することによりカーボン繊維の調製を試みたところ,タケ液化物および三酢酸セルロース混合試料では,繊維幅約1. 0 μm から500 nm を有する炭素繊維集合体が走査電子顕微鏡により観察されたことから,タケ液化物からカーボンナノファイバー(CNF)不織布を調製可能であることが示唆された。本発表では,CNF 不織布を調製するエレクトロスピニング条件の検討結果および顕微レーザーラマン分光による各試料の構造評価について報告する。.
27. 和田 卓, 藤田 弘毅, 堤 祐司, マイクロダイセクション:リグニン単位間5-5 型結合の探索, 第67回日本木材学会大会(福岡), 2017.03, 近年,モノリグノールの合成・輸送・重合というリグニン生合成機構の一端は明らかにされつつあるものの,リグニンの不均一性を制御する機構についてはほとんど知見が得られていない。そこで,本研究ではLasermicrodissection(LMD)により採取した試料の,熱分解GC-MS(Py-GC-MS)による組織・細胞種ごとの詳細なリグニン分析を試みている。今回,リグニン単位間5-5 結合型モデル化合物の二量体熱分解生成物の確認を行い,LMD によるダイセクションサンプル中での5-5 型の探索を行った。その結果,リグニン末端に形成される5-5 型結合の指標となる熱分解物が確認され,それが微量なダイセクションサンプル中でも検出可能であることが示された。また,多年生ポプラ個体の木部を数年輪にかけて解析し,リグニン単位間結合変化の調査も行った。.
28. 河野 陽平, 段 梦弘, 藤田 弘毅, 堤 祐司, PEG・バイサルファイト法によるタケリグニン液化物から調製したポリウレタンフォームの特性評価, 第61回リグニン討論会(京都), 2016.10, 国産タケの有効利用を目指した新規バイオリファイナリー開発が求められているが、タケの主要成分であるリグニンの画期的な手法は報告されていない。そこで、本研究では、PEG・バイサルファイト法をタケ粉に適用することにより、タケ/PEG・バイサルファイト液化物を調製した。その結果、処理温度250 ℃において多糖画分を含めて高い可溶化を示し、一方、処理温度200 ℃においてリグニンのみを選択的に液化可能にすることを見出した。また、各処理条件で得られた液化物からポリウレタンフォームを調製し、各ポリウレタンフォームを固体粘弾性測定に供したところ、リグニン含量の多いポリウレタンフォームはコントロールと比較して高い貯蔵弾性率を示し、多糖画分が多いリグニン含有ポリウレタンフォームは高温で急な貯蔵弾性率の低下を示した。本発表では、タケのPEG・バイサルファイト法の最適化条件、各ポリウレタンフォームの固体粘弾性測定による特性評価について報告する。.
29. 岡崎 嘉孝, 堤 祐司, 藤田 弘毅, 髙田 依里, 増村 竜史, 田畑 研二, 亀井 一郎, ソーダ処理と水熱処理によるタケリグニンの単離, 第23回日本木材学会九州支部大会(鹿児島), 2016.09, タケのバイオリファイナリー技術の開発を目指し、タケリグニンの選択的分離と分離成分の高付加価値物質への変換を検討することにした。これまでの研究ではまず既報を元に、亜リン酸水熱処理によってヘミセルロースを除去し、得られた残渣からソーダアントラキノン処理によってリグニンを分離することにした。しかし、得られたリグニンの構造解析の結果、リグニンの縮合反応が生じており、低分子の生成物の収率が極めて低いという結果が得られた。そのため、水熱処理を行わず、直接アルカリによる処理を行うことによる高付加価値利用の可能性についても目指すことにした。.
30. 段 梦弘, 河野 陽平, 藤田 弘毅, 堤 祐司, ポリエチレングリコール・バイサルファイト法によるタケリグニンの液化, 第23回日本木材学会九州支部大会(鹿児島), 2016.09, ポリエチレングリコール・バイサルファイト法がタケ液化に有効であることを見いだし、さらに選択的にリグニン含量の多いポリエチレングリコール・バイサルファイト液化物を得るための反応温度および時間を検討した。.
31. 西條 裕美, 吉村 友里, 中川 敏法, 松本 清, 鷲岡 ゆき, 羽賀 栄理子, 本傳 晃義, 中島 大輔, 藤田 弘毅, 藤本 登留, 清水 邦義, 渡邊 湧一郎, 岡本 元一, 井上 伸史, 安成 信次, 永野 純, 山田祐樹, 岡本 剛, 石川 洋哉, スギ材を使用した建物の室内空間における揮発性成分の分析およびその季節変動, 第23回日本木材学会九州支部大会(鹿児島), 2016.09.
32. 藤田 弘毅, 河野 陽平, 段 梦弘, 堤 祐司, タケのPEG・バイサルファイト蒸解法による液化特性と竹液化物から調製するポリウレタンフォームの特性, 第83回紙パルプ研究発表会(東京), 2016.06, 竹の有効利用法として、セルロース繊維とリグニンを分離可能なPEG・バイサルファイト蒸解法を行い、タケの液化特性を検討した。200度以下の蒸解条件ではリグニン選択的に、250℃以上ではセルロースを含めた液化が起こった。この液化物をウレタン重合させることでフォームの調製が可能であった。.
33. 川上 亮太, 内田 佳杏, 藤田 弘毅, 亀井 一郎, タケ由来ヘミセルロース利用に向けた担子菌の代謝改変
, 第83回紙パルプ研究発表会(東京), 2016.06, タケヘミセルロースの主成分であるキシランからの有用物質生産のための微生物開発を目的として、既存エタノール発酵性担子菌であるPhlebia sp. MG-60のピルビン酸デカルボキシラーゼ遺伝子のノックダウンおよびノックアウト手法開発による代謝改変を試みた。また、タケから発酵に適したヘミセルロース分離法についても検討した。.
34. 堤 祐司, 岡崎 嘉孝, 髙田 依里, 増村 竜史, 田畑 研二, 亀井 一郎, 藤田 弘毅, バンブ―リファイナリー技術の開発:タケリグニンの高付加価値利用に向けたモノマー変換, 第83回紙パルプ研究発表会(東京), 2016.06, 放置竹林となっている竹を医薬・化成品原料等の基礎材料へと変換する、バンブーリファイナリー技術を開発し竹の新規産業を創出するためのシーズ創出プロジェクトを開始した。プロジェクトの概要を説明するとともに、リグニンの水素化によるモノマー変換について発表する。.
35. 和田卓、藤田弘毅、堤祐司 , マイクロダイセクション:ポプラ 1 年輪内のリグニン単位間結合変化の解析, 第61回リグニン討論会, 2016.04, Lignification is known to occur in xylem tissue before programmed cell death (PCD). Recently,
it is suggested that lignification still proceeds after PCD in some reports, and our previous study also indicated
the similar results; the yields of pyrolysis products and S/G ratio, which derived from β-O-4 linked lignin
determined by laser micro dissection (LMD) and pyrolysis-GC-MS (Py-GC-MS), increased and decreased,
respectively, along with the radial direction within a growth ring in which the xylem fiber cells were already
suffered from PCD. In order to understand more detailed lignification process, in this study we analyzed β-β,
β-1, β-5 internal linkage in lignin using LMD and Py-GC-MS. First, we examined detection limit of Py-GC-MS
for these dimeric pyrolysis products from the dissected samples prepared by LMD. The minimum requirement
of the dissected area was 0.3 mm2 in. Then, the abundances of β-β, β-1, β-5 subunits in wood meal prepared
from old poplar stem, lignified fiber cells and unlignified fiber cells in a year-old P. alba stem were compared.
β-1 subunit was found in a young stem but not in wood meal, which indicate that β-1 is formed at an early stage
in differentiation of xylem fiber cells.
36. 羽明 駿, 藤田 弘毅, 堤 祐司, メキシコイトスギ培養細胞とヒノキ培養細胞の気相シグナル伝達の比較, 第66回日本木材学会大会(名古屋), 2016.03, 植物は外部からのストレスに反応して種々の揮発成分を放出することが明らかになっている。
その多くは自分の身を守るために役立つものである。またそれ以外に別の器官や植物へのシグナ ルとして働く成分もあることが知られている 1。
メキシコイトスギ培養細胞は、エリシターストレスに反応して 10 種類のモノテルペンを放出す る。そのうち 4 つのモノテルペンはサビネン→γ-テルピネン→p-シメン→テルピノレンという段階 的なストレスシグナル伝達経路を作っている。このシグナル伝達の結果、抗菌活性を示す心材成 分であるヒノキチオールの生産が促されることが示されている 2。
しかし、このようなモノテルペンによる段階的なシグナル伝達はメキシコイトスギの、特に培 養細胞でしか確認されておらず、その他の植物種については十分な知見がほとんど得られていな い。一方で、ヒノキから放出されるモノテルペンはメキシコイトスギ培養細胞から放出されるも のに似ていることが明らかになっている 3。そこで本研究では、ヒノキ培養細胞の気相シグナル伝 達を調べ、メキシコイトスギ培養細胞のシグナル伝達との比較を行った。.
37. 河野 陽平, 段 梦弘, 藤田 弘毅, 堤 祐司, タケの PEG・バイサルファイト法による液化と ポリウレタンフォームの調製, 第66回日本木材学会大会(名古屋), 2016.03, 竹は古くから日用製品および文学作品として、日本人の生活および文化に根差した素材である。
しかしながら、近年、拡大竹林とそれに伴う荒廃森林が問題になっている。そのため、竹林の整 備や拡大・侵入防止策および竹の新規用途開発が求められている。最近では、竹の主要成分であ るセルロースからセルロースナノファイバーを調製する手法が報告されている 1, 2)。一方、リグニ ンは複雑な高次構造の高分子のため、未だに高付加価値化する有効な手法が報告されていない。
坂井らはグリコール・バイサルファイト法をスギ樹皮に適用し、リグニンを含むスギ樹皮全体 の高い液化率を得た 3)。そこで本発表では、このグリコールとして、ポリエチレングリコール(PEG) を用いた PEG・バイサルファイト法をタケ粉に適用することにより、タケ/PEG・バイサルファイ ト液化物の調製を試みた。さらに、調製した液化物から概報 4)を参考に硬質ポリウレタンフォー ムの調製も試みた。
【実験方法】
脱脂処理した竹粉末 4 g に、PEG-400 を 12 mL および 6 wt%-亜硫酸水素ナトリウム水溶液 10 mL
を添加し、十分に撹拌を行った。その後、オートクレーブに封入し、オーブンにて所定処理温度 および保持時間で加熱処理を行った。処理後、氷水で急冷し、反応停止した試料をガラス繊維ろ 紙を用いて吸引ろ過を行った。ろ過後、残渣をジオキサンで洗浄および凍結乾燥処理を行った。 乾燥後の残渣の重量を計測し、タケ粉末からの可溶化率を算出した。また、残渣は酸不溶性リグ ニン (AIL) および酸可溶性リグニン (ASL) 測定に供した。

【結果および考察】
Table は処理温度 250 °Cにおける各処理時間のタケ/PEG・バイサルファイト液化物の可溶化率、
AIL および ASL 保持率を示している。60 min 以上の処理時間の場合、30 min の条件よりも大幅に 高い可溶化率を示した。また、60 および 90 min の処理時間では各保持率に大きな差異が見られな かった。以上の結果から、処理温度 250 °Cにおいて、試料の液化条件に適した処理時間は 60 min である可能性が示唆された。一方、リグニンのみを選択的に液化可能な処理温度 200 °Cにおいて 得られた試料の保持率、各成分の組成およびポリウレタンフォームの物性分析結果については本 発表にて報告する。
【謝辞】 本研究は農林水産業・食品産業科学技術研究推進事業(シーズ創出ステージ:27006A、バン
ブーリファイナリー技術開発による竹林有効利用の先進的九州モデル構築)の助成によって行わ れた。
【参考文献】
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38. 羽明 駿, 藤田 弘毅, 堤 祐司, 揮発性モノテルペンを用いたCupressus lusitanicaの情報伝達, 日本木材学会九州支部大会(大分), 2015.10, [URL], 培養細胞を用いた実験ではC. lusitanicaはテルペンのシーケンスで防御信号を伝達していると考えられる。しかし、この実験は未分化の培養細胞を用いた実験であり、実際の樹木が同じシグナル伝達経路を持つかどうかは未だ明らかになっていない。そこで、本研究では植物個体においてモノテルペンの暴露実験を行い、同様のシグナル伝達が個体にも存在するかどうかを検討した。.
39. 陶 揚洋, 藤田 弘毅, 堤 祐司, ハクサンハタザオによるCd/Pb 複合重金属の吸収, 日本木材学会九州支部大会(大分), 2015.10, [URL], これまでのファイトレメディエーションに関する研究では、単一重金属汚染に関する研究が行われてきたが、複合重金属汚染の浄化に関する研究はほとんど行われていない。そこで本研究では、日本で広く存在している植物であり、土壌中カドミウムの浄化に効果が報告されているハクサンハタザオ(Arabidopsis halleri ssp.gemmifera) に注目し、カドミウムと鉛の複合汚染時の重金属吸収能や重金属耐性の機構に関して検討を行った。.
40. 長池 淳, 山邊結子, 藤田 弘毅, 清水 邦義, 岡本 剛, 山田 祐樹, 永野 純, 佐藤 宣子, 川﨑 章惠, 藤本 登留, 空間嗜好性に着目した異なる木質空間における心理評価の違い, 第65回日本木材学会大会, 2015.03.
41. Suguru wada, Koki Fujita, Yuji Tsutsumi, Analysis of lignin structural changes within a growth ring of Populus alba xylem using Laser micro dissection and Py-GC-MS, International Symposium on Wood Science and Technology 2015, 2015.03, Lignin is the phenylpropanoid polymer composed of three monolignols through the several linkages generated by the radical couplings. The biosynthesis of monolignols has ever been studied using mainly homogenized organs or tissues which contains several types of cells. However, many reports indicated that deposition of lignin is heterogeneous, and lignin biosynthesis may be highly regulated depending on cell types or tissues. Further, it was reported that some genes related in monolignol biosynthesis were expressed in ray parenchyma cells in the lignified area1), and CWPO-C that is capable of lignin polymerization located in the cell corners of the matured xylem2). These reports suggest that lignification still keeps proceeding in the fiber cells after their programmed cell death. Recently, in cell culture systems, lignification of tracheary element cell walls has been indicated to continue to increase after the cell death3). In order to understand more detailed lignification process, we have tried to obtain the cell-type- or tissues- specific information on lignin biosynthesis mechanism.
In this study we employed the laser micro dissection (LMD) technique to dissect a current year growth ring of the Populus alba secondary xylem that contains approximately 70 cells in a line (Fig.) into several sections, at least 8 stage of different lignified levels. The dissected sections were subjected to Py-GC-MS, and the pyrolysis products and S/G ratio derived from β-O-4 linked lignin in the dissected samples were determined. The increase of pyrolysis products and decrease of S/G ratio along with the radial direction from cambial to pith within a growth ring suggested that lignification continues in the mature xylem fiber cells in which lignification has generally been thought to be completed. On the other hand acetocarmine staining of nuclei and fragments of DNA was observed only in the cells within the area of 20th or 30th from cambium (Fig.), but not in the older cells than them, suggesting that the fiber cells in the older cells area than 20th or 30th cells were already suffered from programmed cell death. These results imply that lignification in the fiber cells still continues even after programmed cell death, probably with the assistance of ray parenchyma cells..
42. 岡本 剛, 山田 祐樹, 永野 純, 松本 清, 山本 篤, 山邊結子, 中川敏法, 照井佳世, 藤田 弘毅, 川﨑 章惠, 佐藤 宣子, 藤本 登留, 清水 邦義, 光藤崇子, 石川洋哉, 大貫宏一郞, 中島大輔, 渡邊 雄一郎, 嶋津久憲, 安成信次, 木質空間の快適性に関する脳科学的定量化, 第64回日本木材学会大会, 2014.03.
43. 神戸 良, 藤田 弘毅, 堤 祐司, テルペンシンターゼによるシグナル伝達物質のde novo生産及び伝達メカニズム, 第64回日本木材学会大会, 2014.03, 近年、植物間コミュニケーションの存在が示唆され、その機構解明に関する研究が広く行われている。当研究室ではCupressus lusitanica培養細胞にエリシター処理を施すと放出されるモノテルペンの中に特定のモノテルペンの放出を誘導する機能があることを明らかにした。誘導される物質はsabinene→γ-terpinene→p-cymene→terpinoleneの順にひとつのカスケードを形成していると思われた。このモノテルペンリレーは極めて迅速であることから、本研究ではモノテルペンに対する培養細胞の応答メカニズムを知るためにテルペンシンターゼ活性の反応を経時的に観察した。結果、受け取ったモノテルペンの合成酵素活性の増加が顕著に見られ、短時間でのモノテルペンのde novo合成が確認され、確実なシグナル伝達のための増幅機構の存在が推定された。.
44. 神戸 良, 藤田 弘毅, 芦谷 竜矢, 堤 祐司, Cupressus lusitanica培養細胞が気相中に発散するモノテルペンの役割, 第57回 香料・テルペンおよび精油化学に関する討論会, 2013.10, [URL], Cupressus lusitanica培養細胞が気相中に発散するモノテルペンの消長を分析し、自然界でシグナル伝達に関与していると思われる状況を報告した。.
45. 山本 篤, 松本 清, 福田 竜大, 山邊結子, 藤田 弘毅, 川﨑 章惠, 佐藤 宣子, 藤本 登留, 清水 邦義, 岡本 剛, 山田祐樹, 永野 純, 光藤崇子, 石川洋哉, 大貫宏一郎, 中島大輔, 安成信次, 嶋津久憲, 渡邉雄一郎, 天然・低温乾燥材と新建材の調温・調湿機能比較 ―寝室環境の経時的変化から―, 日本木材学会九州支部, 2013.09, [URL].
46. 松本 清, 山本 篤, 福田 竜大, 山邊結子, 藤田 弘毅, 川﨑 章惠, 佐藤 宣子, 藤本 登留, 清水 邦義, 岡本 剛, 山田祐樹, 永野 純, 光藤崇子, 石川洋哉, 大貫宏一郎, 中島大輔, 安成信次, 嶋津久憲, 渡邉雄一郎, 木質空間における生理心理応答:無垢材と新建材での比較, 日本木材学会九州支部, 2013.09, [URL].
47. 神戸 良, 藤田 弘毅, 堤 祐司, Cupressus lusitanica培養細胞のシグナル伝達に関与する炭化水素モノテルペンの経時的特性, 日本木材学会九州支部, 2013.09, [URL].
48. Koki Fujita, Ryo Kanbe, Tatsuya Yagi, Ransika De Alwis, Tatsuya Ashitani, Yuji Tsutsumi, Air born defense signal transduction cascade with monoterpenes on Cupressus lusitanica culture cells , TERPNET2013, 2013.06, [URL], Many experiments for plant-plant communication had been conducted widely in field or laboratory; experiments used whole plant or organs like leaf, root and shoot. However, a model experiment system, which is simple and free from the influence of environment, is favorable. Our group has used cultured cell of Cupressus lusitanica to investigate the chemical communication as a model. This cell line produced 10 hydrocarbon monoterpenes as well as β-thujaplicin, which is strong phytoalexin, when they were elicited. Because these monoterpenes were emitted into atmosphere, special roles as vapor were expected previously. In this work, the cells were exposed with artificial vapor monoterpenes and then headspace gases of the culture flasks were analyzed with SPME and GCMS. As results, when culture cells were exposed with artificial sabinene, de novo produced γ-terpinene and p-cymene were detected in headspace gas. When culture cells were exposed with artificial γ-terpinene as well, the products were p-cymene and terpinolene. In case of the p-cymene exposure, terpinolene was emitted into the air. However, this phenomenon was not observed with the exposure of other monoterpenes, such as α-pinene, β-pinene, limonene, myrcene and terpinolene. These results strongly suggest “signal transfer cascade” which starts from sabinene and followed by γ-terpinene, p-cymene and, then, end at terpinolene. Though terpinolene didn’t cause air born signaling, it facilitated the starting time of β-thujaplicin production. That is, by pathogen or insect attack, C. lusitanica cells implement a signal cascade to prepare β-thujaplicin production of innate plant or adjacent leaves. The results led us to propose dual functions of the cascade as shown in Figure. 1. The signal can spread over longer range with the cascade of monoterpenes. 2. Tree can measure the distance from pathogen-invaded tree by depending on the kinds of monoterpenes recognized..
49. Koki Fujita, Yasufumi Bunyu, Ken-ichi Kuroda, Tatsuya Ashitani, Yuji Tsutsumi, Terpinolene is the first olefin monoterpene intermediate to a tropolone, β-thujaplicin –Potential novel pathway to tropolone ring–, TERPNET2013, 2013.06, [URL], β-Thujaplicin (Hinokitiol) is a wood monoterpene and a tropolonecompound, which has unique conjugated seven-membered ring. Because of its strong antifungal and antitumor activities, β-thujaplicin has been used in several fields. However, the biosynthetic pathway of it has not been elucidated. Our group had proved that geranyl pyrophosphate (GPP) was the starting material of this pathway using Cupressus lusitanica cell cultures with radioisotope feeding experiment. In addition, our previous study suggested that terpinolene was the next metabolite from GPP based on the results of terpene synthase assay. In this study, we performed feeding experiment of deuterium-labeled terpinolene into the cultured cell of C. lusitanica in order to determine whether terpinolene is intermediate of β-thujaplicin biosynthesis. GC/MS analysis of cell extract from the culture labeled-terpinolene fed revealed the existence of the peak of labeled β-thujaplicin which was not observed in treatment of non-labeled terpinolene. Identification of labeled β-
thujaplicin was confirmed by mass spectrum assignment. This indicated that terpinolene was the first olefin monoterpene intermediate of β-thujaplicin biosynthesis. There has been no report that tropolone compounds are biosynthesized via terpene biosynthesis system, so the result suggests the existence of a novel biosynthetic pathway to produce conjugated seven-membered ring. .
50. 豊丹生泰史, 藤田 弘毅, 黒田健一, 芦谷竜矢, 堤 祐司, テルピノレンはヒノキチオール生合成中間体である, 第63回日本木材学会大会(盛岡), 2013.03, [URL], ヒノキチオール(β-thujaplicin)はヒノキ科植物に含まれる共役7員環をもつモノテルペンの一種である。その生合成については、ゲラニル二リン酸がスタート物質であるということ以外、不明な点が多い。本研究では、これまでの研究よりテルピノレンがゲラニル二リン酸に続く生合成中間体であると予想し、重水素ラベルテルピノレンを合成してCupressus lusitanica培養細胞に投与した。その結果、重水素ラベル化されたヒノキチオールが確認され、テルピノレンがC. lusitanica培養細胞におけるヒノキチオール生合成の中間代謝物であることを明らかにした。.
51. 神戸 良,藤田弘毅,堤 祐司, Cuplessus lusitanica培養細胞における炭化水素モノテルペンを介したシグナル伝達, 第63回日本木材学会大会(盛岡), 2013.03, [URL], 植物が揮発性物質を用いてコミュニケーションを行っている例が報告されているが、その機構の解明には至っていない。培養細胞は機構解明に有利な実験モデル系であると考え、Cupressus lusitanica培養細胞にエリシター処理を行うと10種の炭化水素モノテルペンを放出していることを発見し、培養細胞へいくつかのモノテルペンを気相曝露したところ、ある特定のモノテルペンの放出と防御システムを誘導することが明らかになった。本研究では未検討の炭化水素モノテルペンのシグナル効果の確認を行い、sabineneによるシグナル効果を新たに発見した。また、低濃度でもシグナル効果を発現することを確認した。これらの結果は、シグナル伝達系を形成することで離れた場所にある樹木においても防御システムを誘導をすることを可能にし、外的ストレスに備えていることを示唆している。.
52. 和田 卓,藤田弘毅,堤 祐司, Laser microdissectionを用いたリグニンの不均一性制御機構の解明, 第63回日本木材学会大会(盛岡), 2013.03, [URL], リグニンは3種のフェニルプロパノイドの合成、細胞壁への輸送、高分子化という過程により植物細胞壁に蓄積される。一方で、リグニンの不均一性を制御する機構についてはほとんど知見が得られていない。そこで、木化過程を詳細に解析する技術が不可欠である。本研究では、Laser microdissection(LMD)により採取した試料の、熱分解GC-MS(Py-GC-MS)によるリグニン分析を行った。分析可能な最小サンプル量の検討を行った結果、放射方向に1~3細胞列(約0.7 μg)程度の試料で、Py-GC-MSによるリグニン由来生成物の定性・定量が可能であった。さらに放射方向への段階的なリグニン分析の結果、細胞壁形成初期ではS型がG型よりも合成され、リグニンの蓄積とともにG型の含有率の増加が確認された。これらの結果からLMDのリグニン分析への有用性が証明され、リグニン生合成の時間的変化情報が取得できた。.
53. 藤田 弘毅, 樹木間の化学生態学(メキシコイトスギのテルペンによる情報伝達), 2012.12.
54. TAKAKO HARADA, KOKI FUJITA AND YUJI TSUTSUMI, The relationship between the time courses of the β-thujaplicin production and of the activities of terpinolene oxygenases in Cupressus lusitanica cultured cells, 28th International Society of Chemical Ecology, 2012.07, [URL].
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85. 黒田健一、中川明子、芦谷竜矢、藤田弘毅, Tetramethylammonium hydroxide (TMAH) thermochemolysis of lignin: Behavior of β5-type lignin model
compounds, 第52回リグニン討論会, 2007.11, Phenolic 2-arylcoumarans 1-6 were subjected to tetramethylammonium hydroxide (TMAH)
thermochemolysis (500 ºC/4 s) to investigate reactions occurring in lignin specifically under these conditions.
Products were monitored by gas chromatography/mass spectrometry (GC/MS). GC/MS signals corresponding
to dimers overwhelmed all GC/MS traces. (2-Phenyl-2,3-don-3-yl) methan-1-ols (1 and 6) predominantly gave
2,3,3',4'-tetramethoxystilbenes involving in a loss of the γ-CH2OH substituent.
3-Methyl-2-phenyl-2,3-dihydrobenzofurans (2-5) gave a mixture of
1-(3,4-dimethoxyphenyl)-2-(2,3-dimethoxyphenyl)-1-methoxypropans and 2,3,3’,4’- tetramethoxy-stilbenes
having the γ-methyl group. Side chains –CH=CHCH2OH and -COOH on ring B were simply methylated to
produce the corresponding methyl ether and ester, respectively. A –CH=CHCH3 Side chain was preserved intact,
whereas a –CH=CHCHO side chain changed to a -CHO side chain. This was confirmed by isolating
5-formyl-2,3,3',4'-tetramethoxystilbene as an off-line TMAH thermo- chemolysis product from
3-[2-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-3- hydroxymethyl-7-methoxy-2, 3- dihydrobenzofuran-5-yl] propenal..
86. (秋田県大木高研)芦谷竜矢,(九大農)藤田弘毅,(秋田県大木高研)栗本康司, PEG・バイサルファイト法により液化したスギ樹皮由来ポリウレタンフィルムの調製(III), 第57回日本木材学会広島大会, 2007.08.
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93. Ransika de Alwis, 藤田弘毅, 芦谷竜矢, 黒田健一, Cupressus lusitanica培養細胞の産する揮発テルペノイドの固相抽出分析, 第56回日本木材学会, 2006.08.
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106. Zhao J, Fujita K, Sakai K, Multicomponents of elicitor signal transduction mediating beta-thujaplicin synthesis in Cupressus lusitanica suspension culture, NIAR-COE/BRAIN/CREST joint international symposium, 2000.11.
107. 三好正晃、藤田弘毅、坂井克己, スギ培養細胞を用いたヒノキレジノール生合成経路の解明, 第50回日本木材学会, 2000.04.
108. 藤田弘毅、坂井克己, ヒノキ科植物切り枝におけるテルペン類の生産, 第50回日本木材学会, 2000.04.
109. 山田順子,藤田弘毅,坂井克己, ヒノキ科樹木培養細胞によるヒノキチオールの生産と抑制, 農芸化学会(2000), 2000.04.
110. Yamada J, Fujita K, Sakai K, Suspension Culture of Cupressus lusitanica for β-thujaplicin Biosysthesis, 10th International Symposium on Wood and Pulping Chemistry, 1999.06.
111. 山田順子、藤田弘毅、坂井克己, Cupressus lusitanicaけん濁培養細胞によるヒノキチオールの生産, 第49回日本木材学会, 1999.04.
112. Fujita K, Yamaguchi T, Sakai K, Biosynthesis of beta-thujaplicin with the Cupressus lusitanica suspension cell culture, IXth International congress on plant tissue and cell culture, 1998.06.
113. 藤田弘毅、坂井克己, Cupressus lusitanica培養細胞におけるヒノキチオールの生合成(II)
[2-13C]および[U-13C]グルコースを用いたトレーサー実験, 第48回日本木材学会, 1998.04.
114. 根本聡、藤田弘毅、坂井克己, ヒノキレジノールの幾何異性について, 第48回日本木材学会, 1998.04.
115. 藤田弘毅、坂井克己, Cupressus lusitanica培養細胞におけるヒノキチオールの生合成−メバロン酸経路の確認ー, 第47回日本木材学会, 1997.04.
116. 山口崇、藤田弘毅、坂井克己, Cupressus lusitanica培養細胞を用いたヒノキチオール生合成経路の解明, 第47回日本木材学会, 1997.04.
117. 糸瀬龍次,藤田弘毅、坂井克己, Cupressus lusitanica懸濁培養細胞によるβーツヤプリシンの生成, 日本木材学会, 1996.04.
118. 藤田弘毅、近藤隆一郎、坂井克己、樫野由憲、西田友昭、高原義昌, 微生物(IZU−154株)によるクラフトパルプの漂白(第2報), 第35回リグニン討論会, 1990.10.
119. 藤田弘毅 , 近藤隆一郎 , 坂井克己 , 今村博之 , 樫野由憲 , 西田友昭 , 高原義昌 , 微生物(IZU−154株)によるクラフトパルプの漂白, 第40回木材学会, 1990.04, 微生物(IZU−154株)でクラフトパルプを処理することにより、残留リグニンが減少し漂白効果が得られた。.

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