| 1. |
田畑 香織、水野 颯人、廣田 豪、家入 一郎, 血清由来エクソソームを介した血液脳関門細胞におけるMRP4の発現変動解析, 第7回日本臨床薬理学会九州・沖縄地方会, 2023.07. |
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廣田 豪、水野 颯人、田畑 香織、家入 一郎, Exosomeを介した血液脳関門における薬物トランスポーター発現制御機構の解明, 第３９回日本TDM学会・学術大会, 2023.06. |
| 3. |
善明 直輝, 松本 侑也, 安田 斉弘, 内之宮 祥平, 進藤 直哉, 田畑 香織, 王子田 彰夫, システイン化学修飾を利用したタンパク質化学切断法の開発：②Cysホルミル化によるタンパク質配列選択的切断および細胞表層応用, 日本薬学会 第143年会（札幌）, 2023.03. |
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松本 侑也, 善明 直輝, 安田 斉弘, 内之宮 祥平, 進藤 直哉, 田畑 香織, 王子田 彰夫, システイン化学修飾を利用したタンパク質化学切断法の開発：1. システインホルミル化の化学特性解明, 日本薬学会 第143年会（札幌）, 2023.03. |
| 5. |
麻生 真理子, 劉 怡萱, 阿部 由紀子, 田畑 香織, リジン残基をソルバトクロミック蛍光基へ変換する標的親和性ベンズアルデヒド誘導体の合成と評価, 日本化学会 第103春季年会, 2023.03. |
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松本侑也, 善明直輝, 安田斉弘, 内之宮祥平, 進藤直哉, 田畑香織, 王子田彰夫, システイン化学修飾によるタンパク質切断法の開発, 第59回化学関連支部合同九州大会, 2022.07. |
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麻生 真理子・田畑 香織・阿部 由紀子・谷口 陽祐・佐々木 茂貴, 環境応答型solvatochromic 蛍光分子で修飾したDNA 結合性蛋白質の評価, 第１５回バイオ関連化学シンポジウム, 2021.09. |
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麻生 真理子・金城 綾香・田畑 香織 ・阿部 由紀子 ・谷口 陽祐 ・ 佐々木 茂貴, 反応性核酸を用いた環境応答型 solvatochromic 蛍光分子の蛋白質 への導入と修飾蛋白質の評価, 第１４回バイオ関連化学シンポジウム2020, 2020.09. |
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Sasaki-Tabata K, Matsuo A, Fuchida H, Ojida A, Tanaka H and Morimoto S, Cloning, expression and characterization of polyketide synthase gene from Scopolia Japonica, The 9th CSP-KSP-JSP Joint Symposium on Pharmacognosy, 2016.05, BACKGROUND AND PURPOSE: Various important pharmacological compounds such as atropine and scopolamine are included in Scopolia japonica. These compounds are synthesized using ornithine as a starting material, however, it’s unclear which enzyme catalyzes the tropinone synthesis reaction. Hence, in the present study we aimed to identify function and structure of novel polyketide synthase (PKS) from S. japonica.
EXPERIMENTAL APPROACH: A total RNA was extracted from leaves of S. japonica and cDNA was synthesized using a reverse transcriptase. Then, degenerate PCR, 5' and 3' RACE was performed using cDNA as a template. Two novel genes were obtained and expressed in E. coli. The recombinant protein was purified with affinity column and ion exchange column. We analyzed the enzyme activity using HPLC. Moreover, we crystallized and performed crystallographic analysis of PKS.
KEY RESULTS: Two novel genes of PKS from S. japonica were obtained. The recombinant PKSs expressed in E. coli as a soluble fraction was highly purified using affinity and ion exchange column and the enzyme assay with HPLC showed that new compounds were synthesized using some substrates. Moreover, crystallization screening resulted in obtaining needle or plate crystals. We could get single crystals in an optimized condition. The crystal diffracted to 2.0 angstrom at KEK-PF and the structures of PKS were determined using molecular replacement method.
CONCLUSION AND IMPLICATIONS: These PKS genes seem to belong to PKS family because they showed high similarity to other CHS from various plants. These novel findings may contribute to clarifying the mechanism of tropane synthesis.. |
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田畑香織, 松尾彩加, 田中 宏幸, 森元 聡, ハシリドコロ由来新規ポリケタイド合成酵素の構造および機能に関する研究, 日本薬学会 第136年会, 2016.03. |
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田畑香織, 松尾彩加, 渕田大和, 王子田 彰夫, 田中 宏幸, 森元 聡, ハシリドコロ由来新規ポリケタイド合成酵素に関する研究, 日本生薬学会 第62回年会, 2015.09. |
| 12. |
加藤梨那, 中村俊介, 相星彩佳, 坂元政一, 田畑香織, 田中 宏幸, 森元 聡, 植物ネクローシスにおけるcyclophilin Dの機能解析と抗体作製, 日本生薬学会 第61回年会, 2014.09. |
| 13. |
Pongkitwitoon B, Kaori Tabata, Hiroyuki Tanaka, satoshi morimoto, Construction of a single-chain variable fragment antibody against daidzin and its potential use in an enzyme-linked immunosorbent assay, 61st International Congress and Annual Meeting of the Society for Medicinal Plant and Natural Product Research, 2013.09. |
| 14. |
Hiroyuki Tanaka, Chao Z, Kaori Tabata, satoshi morimoto, Preparation of antibodies to paclitaxel, 2013 International Congress on Natural Products Research, 2013.07. |
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常浦祐未, 田畑 香織, 坂元政一, 田中 宏幸, 麻生 真理子, 末宗 洋, 森元 聡, 新規D-アミノ酸分析法開発を目指した抗D-セリンモノクローナル抗体の作製, 日本薬学会第１３４年会, 2014.03. |
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加藤梨那, 中村俊介, 相星彩佳, 坂元政一, 田畑 香織, 田中 宏幸, 森元 聡, 植物ネクローシスにおける cyclophilin D の機能解析, 日本薬学会第１３４年会, 2014.03. |
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戸切祥恵, 山下未知, 清水 瑠美, 安達基泰, 黒木良太, 田畑香織, 田中宏幸, 森元聡, ケシにおけるモルヒネ代謝酵素に関する研究, 日本生薬学会第60回年会, 2013.09. |
| 18. |
加藤梨那, 中村俊介, 相星彩佳, 田畑香織, 田中宏幸, 森元聡, 植物ネクローシスにおけるcyclophilinDの機能解析, 日本生薬学会 第60回年会, 2013.09. |
| 19. |
峰真也, 田畑香織, 田中宏幸, 森元聡, カンナビノイドの生育阻害の機能解明, 日本薬学会第１３２年会, 2012.03. |
| 20. |
今村聡, 今村麻美, 坂元政一, 田畑香織, 田中宏幸, 森元聡, コガネバナβ-glucuronidaseの反応メカニズムに関する研究, 日本薬学会第１３２年会, 2012.03. |
| 21. |
Pongkitwitoon B, 坂元 政一, 佐々木香織, 田中宏幸, 森元聡, ケシ由来O-Methyltransferase の遺伝子クローニングと発現, 日本薬学会第１３２年会, 2012.03. |
| 22. |
Pongkitwitoon B, Sakamoto S, Sasaki K, Tanaka H, Morimoto S, Molecular cloning and expression of O-methyltransferases from opium poppy, The XVI International Congress "PHYTOPHARM 2012, 2012.07. |
| 23. |
Tanaka H, Paudel MK, Takei A, Sakoda J, Juengwatanatrakul T, Sasaki-Tabata K, Putalun W, Shoyama Y, Morimoto S, Preparation of a recombinant Fab against the anti-malarial drugs, artemisinin and artesunate and their application, 2012 International Congress on Natural Products Research, 2012.07. |
| 24. |
田中宏幸, 相星彩佳, 田畑香織, 森元聡, 畠中孝彰, 伊東祐二, THCA誘導性植物ネクローシスに関する研究, 日本生薬学会 第５９回年会, 2012.09. |
| 25. |
Paudel MK, 田中宏幸, 田畑香織, 森元聡, 代田修, 関田節子, 免疫化学的手法によるチャット鑑別法の開発, 日本生薬学会 第５９回年会, 2012.09. |
| 26. |
田中 宏幸, 田畑 香織, 森元 聡, 組換え抗paclitaxel Fabの構築とその機能評価, 日本薬学会第133年会, 2013.03. |
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小野健治, 田畑香織, 鈴木弘美, 澤田 誠, 活性化に伴いiNOSを発現する細胞をMRIで可視化する方法の開発, 第３４回日本神経科学大会, 2011.09. |
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佐々木香織, 梶川瑞穂, 前仲勝実, BmNPVバクミドシステムを用いたカイコでの膜タンパク質の発現, 第１１回日本蛋白質科学会年会, 2011.06, タンパク質の機能解析や構造解析を行うにあたって大量のタンパク質の調製が必要となるが、真核生物由来のタンパク質を生理活性を保持した状態で調製するには大腸菌を用いた発現系では困難な場合が多い。
そこで、我々はバキュロウイルスを利用した昆虫細胞発現系の発展型として、カイコバキュロウイルス（BmNPV）バクミドDNAと、大量生産の期待できるカイコ個体を組み合わせた発現システムを構築した。バキュロウイルスを用いた外来遺伝子の発現系では糖鎖が付加されたものが得られるため、大変有用である。さらに、BmNPVバクミドシステムはカイコに感染可能なバクミドDNAを大腸菌で簡便に作製することができ、ウイルスのタイターを測定するような煩雑な操作が不要である点で優れている。
このBmNPVバクミドシステムを用いて、大腸菌で発現が難しいとされるヒト免疫受容体やGPCRのような膜タンパク質を活性を保持した状態で調製に成功した例を紹介する。. |
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小野 健治, 比嘉 円, 田畑 香織, 鈴木 弘美, 澤田 誠, 青色光照射によるChR2発現アストロサイトの活性化制御に関する解析, 第３３回日本分子生物学会年会、第８３回日本生化学会大会 合同大会, 2010.12. |
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小野 健治, 比嘉 円, 田畑 香織, 鈴木 弘美, 澤田 誠, 青色光照射によるChR2発現アストロサイトの活性化制御に関する検討, 第３３回日本神経科学大会、第５３回日本神経化学大会、第２０回日本神経回路学会大会 合同大会, 2010.09. |
| 31. |
佐々木香織, 田浦太志, 森元聡, 正山征洋, コガネバナのbaicalin代謝酵素に関する研究, 日本生薬学会 第４６回年会, 1999.09. |
| 32. |
佐々木香織, 田浦太志, 森元聡, 正山征洋, コガネバナのフラボノイド代謝酵素に関する研究, 日本生薬学会 第４７回年会, 2000.09. |
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佐々木香織, Prakairoong Pattanakachorn, 森元聡, 正山征洋, コガネバナのフラボノイド代謝に関する研究, 日本薬学会 第１２１回年会, 2001.03. |
| 34. |
佐々木香織, 岡本直明, 田中卓, 正井久雄, 前仲勝実, 神田大輔, 大腸菌由来PriAとオリゴヌクレオチドとの複合体の結晶化, 日本結晶学会 ２００３年度年会, 2003.12. |
| 35. |
佐々木香織, 尾瀬農之, 岡本直明, 田中卓, 正井久雄, 前仲勝実, 神田大輔, 大腸菌由来PriAとオリゴヌクレオチドとの複合体の結晶化, 第２７回日本分子生物学会年会, 2004.12. |
| 36. |
佐々木香織, 尾瀬農之, 田中卓, 前仲勝実, 正井久雄, 神田大輔, E. coli 由来PriAのN末端ドメインの立体構造解析, 第５回日本蛋白質科学会年会, 2005.06. |
| 37. |
佐々木香織, 尾瀬農之, 田中卓, 岡本直明, 前仲勝実, 正井久雄, 神田大輔, E. coli 由来PriAのN末端ドメインによるDNA 3’末端認識の構造的基盤, 日本バイオインフォマティクス学会 第１回プロテイン・インフォマティクスワークショップin九州, 2005.10. |
| 38. |
佐々木香織, 尾瀬農之, 田中卓, 岡本直明, 前仲勝実, 正井久雄, 神田大輔, E. coli 由来PriAのN末端ドメインによるDNA 3’末端認識の構造的基盤, 第２８回日本分子生物学会年会, 2005.12. |
| 39. |
佐々木香織, 尾瀬農之, 田中卓, 岡本直明, 前仲勝実, 正井久雄, 神田大輔, E. coli 由来PriAのN末端ドメインによるDNA 3’末端認識の構造的基盤, 文部科学省タンパク３０００プロジェクト 第４回産学連携フォーラムin福岡, 2006.03. |
| 40. |
佐々木香織, 梶川瑞穂, 黒木喜美子, 本橋智子, 霜島司, 朴龍洙, 神田大輔, 前仲勝実, BmNPVバクミドシステムを用いたカイコ個体でのヒト免疫細胞表面レセプターKIRの大量発現, 第６回日本蛋白質科学会年会, 2006.04. |
| 41. |
佐々木香織, 尾瀬農之, 岡本直明, 田中卓, 前仲勝実, 正井久雄, 斉藤美保子, 白井剛, 神田大輔, PriAタンパク質によるDNA 3’末端の塩基非選択的認識機構の解明, 第７回日本蛋白質科学会年会, 2007.05. |
| 42. |
佐々木香織, 田中卓, 正井久雄, 前仲勝実, 神田大輔, Structural basis for the DNA recognition of PriA protein in the stalled DNA replication fork, 第３０回日本分子生物学会年会・第８０回日本生化学会大会 合同大会, 2007.12. |
| 43. |
佐々木香織, 梶川瑞穂, 矢木宏和, 近藤幸子, 黒木喜美子, 本橋智子, 霜島司, 朴龍洙, 加藤晃一, 前仲勝実, BmNPVバクミドシステムによるヒト免疫細胞表面レセプターの発現と糖鎖解析, 第８回日本蛋白質科学会年会, 2008.06. |
| 44. |
佐々木香織, 梶川瑞穂, 矢木宏和, 近藤幸子, 黒木喜美子, 本橋智子, 霜島司, 朴龍洙, 加藤晃一, 前仲勝実, BmNPVバクミドシステムによるヒト免疫細胞表面レセプターの発現と糖鎖解析, 第３１回日本分子生物学会年会・第８１回日本生化学会大会 合同大会, 2008.12. |
| 45. |
Kaori Sasaki, Toyoyuki Ose, Taku Tanaka, Toshimi Mizukoshi, Tomoko Ishigaki, Naoaki Okamoto, Katsumi Maenaka, Hisao Masai and Daisuke Kohda, Structural analysis of the N-terminal domain of PriA from E. coli, XX Congress of he International Union of Crystallography, 2005.08. |
| 46. |
Kaori Sasaki, Toyoyuki Ose, Taku Tanaka, Naoaki Okamoto, Katsumi Maenaka, Tsuyoshi Shirai, Hisao Masai and Daisuke Kohda, Structural basis for the recognition of the 3'-terminus of DNA by PriA protein, 20th IUBMB International Congress of Biochemistry and Molecular Biology and 11th FAOBMB Congress, 2006.06. |
| 47. |
Kaori Sasaki, Structural basis for the stalled replication folk recognition by E. coli PriA, 第１回 研究所ネットワーク国際シンポジウム, 2005.07. |
